王伟
- 作品数：29 被引量：52H指数：4
- 供职机构：首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 结核分枝杆菌实时荧光重组酶介导的等温扩增检测方法的建立与应用
- 2023年
- 目的由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的结核病(tuberculosis,TB)是全球第二大单一感染致死病因,快速和准确的结核诊断技术有助于对其进行精准防控。方法针对MTB菌株插入序列IS6110高度保守区域设计引物和exo探针并进行筛选,建立了MTB实时(real-time,RT)荧光重组酶介导的等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)检测方法。通过检测11种非结核分枝杆菌以及金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌评价RT-RAA方法的特异性。以实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR)方法作为平行对照,应用RT-RAA方法扩增梯度稀释的含有目的基因序列不同拷贝数的重组质粒p EASY-Blunt-IS6110,以评价RT-RAA方法的检测敏感度和重复性。将建立的MTB RT-RAA方法应用于173份肺结核临床样品检测中,同时与q PCR方法进行比较。结果建立的MTB RT-RAA方法在42℃条件下30min内即可完成反应;与非结核分枝杆菌以及金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌均无交叉反应;最低检测模板质粒浓度为116拷贝/2μl,优于q PCR方法(138拷贝/2μl);组内和组间的变异系数均小于8%,重复性好。对于肺结核临床样品的检测,RT-RAA方法检测的阳性率与q PCR方法差异无统计学意义。结论本研究建立的MTB RT-RAA方法是一种方便、灵敏和低成本的MTB快速检测方法,具有良好的应用前景。
- 刘园园任卫聪薛仲探王伟张旭霞姚丛尚媛媛李姗姗逄宇
- 关键词：结核分枝杆菌荧光定量PCR
- 酪氨酸激酶抑制剂调控宿主抗结核作用的研究进展
- 2024年
- 尽管现有的抗结核治疗方案在药物敏感结核病患者的治疗中取得了显著成效,但是药物毒性及耐药菌株的问题日益突出。因此,研究者们开始寻找新的药物和治疗策略,以期更好地治疗结核病。宿主导向治疗(host-directed therapy,HDT)可利用小分子化合物调节宿主的免疫反应,进而保护组织并清除病原体。HDT的主要目的是增强宿主的抗结核免疫功能,同时缩短传统抗生素治疗的时间,提高治疗效果,被视为治疗结核病的一种有前景的方法。酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)主要参与激活细胞信号转导,从而调节细胞生长、增殖、死亡等一系列生理生化过程。酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)是一种新型抗癌药物,在多种恶性肿瘤中可靶向过表达细胞通路,也可通过诱导自噬并激活其他信号通路发挥抗肿瘤活性。研究发现,TKI也可以在巨噬细胞中调节信号转导过程,降低胞内结核分枝杆菌的载量,具有巨大的治疗潜力。因此,TKI可作为HDT的潜在候选药物,应用于临床辅助治疗结核病。笔者将从PTK及信号转导入手,针对潜在的HDT治疗结核病的靶向药物研究进行综述,旨在为HDT疗法更好地应用于现有药物及研发新药,从而辅助治疗结核病提供参考。
- 段淑娟王伟逄宇李凌
- 关键词：结核抗结核药蛋白酪氨酸激酶类
- 趋化因子5和趋化因子受体5基因多态性与肺结核易感性的关系被引量：1
- 2016年
- 目的探讨趋化因子5（CCL5）及趋化因子受体5（CCR5）基因多态性与肺结核（pulmonarytuberculo—sis，PTB）易感性的关系。方法选取2014年2月至2015年4月首都医科大学附属北京胸科医院收治的PTB患者作为病例组，共494例；选取413名健康志愿者作为对照组。采集研究对象静脉血，使用竞争性等位基因特异性PCR方法检测其CCL5启动子区rs2107538和CCR5启动子区rs1799987基因型，计算病例组和对照组的基因型及等位基因频率，并对其分布情况进行比较，分析各基因多态性与PTB患病的相关性。结果CCL5启动子区rs2107538基因-403位点GG、GA、AA基因型及等位基因G、A的频次和频率病例组分别为：202（41％）、224（45％）、68（14％）和628（64％）、360（36％）；对照组分别为：152（38%）、209（51％）、52（13％）和513（62％）、313（38％），两组之间基因型分布和等位基因分布差异均无统计学意义（X2值分别为2．50和0．35，P值均〉0．05）。CCR5启动子区rs1799987基因-2459位点AA、AG、GG基因型及等位基因A、G的频次和频率病例组分别为：99（20％）、272（55％）、123（25％）和470（48％）、518（52％）；对照组分别为：67（16%）、210（51％）、136（33％）和344（42％）、482（58％），两组之间基因型分布和等位基因分布差异均有统计学意义（X2值分别为7．62和6．14，P值均〈0．05）。携带该位点基因型GO和等位基因G可降低PTB患病风险[OR（95％CI）值分别为：0．68（0．50～0．91）、0．78（0．64～0．94）]。结论CCL5启动子区rs2107538基因多态性与PTB患病无相关性；携带CCR5启动子区rs1799987基因-2459位点基因型GG和等位基因G可降低PTB患病风险。
- 王慧琳王伟刘京铭李传友高孟秋
- 关键词：趋化因子类单核苷酸疾病易感性
- 三种细胞因子在肺结核与肺癌胸腔积液中的诊断价值
- 2019年
- 目的分析肺结核患者(TB)和肺癌患者胸腔积液中巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、孤核受体a(RORa)和孤核受体γ(RORγ)水平的差异,探讨其在肺结核与肺癌鉴别诊断中的价值。方法通过简单随机抽样,将已确诊为肺结核和肺癌的冻存胸腔积液样本进行编号,抽取样本各80例,总结研究对象的基本信息,采用酶联免疫吸附法检测各样本中的MIF、RORα及RORγ水平。采用SPSS20.0软件进行统计学对比分析,本研究中两组计量资料不符合正态分布,采用“Mann-Whitney U检验”,以P<0.05为差异有统计学意义。结果肺结核组和肺癌组胸腔积液中的MIF水平中位数(四分位数)[M(Q1,Q3)]分别为5.83(2.41,16.43)、2.79(0.91,11.12)ng/L,差异有统计学意义(U=2314.50,P<0.01);肺结核组和肺癌组胸腔积液中RORα水平[A/(Q1,Q3)]分别为0.63(0.37,1.66)、0.63(0.57,2.16)ng/L,差异无统计学意义(U=3525.00,P>0.05);肺结核组和肺癌组胸腔积液中RORγ水平[M(Q1,Q3)]分别为3.23(1.82,5.26)、3.44(1.94,7.11)ng/L,差异无统计学意义(U=3431.50,P>0.05)0结论肺结核患者胸腔积液中MIF水平高于肺癌患者,检测胸腔积液中MIF水平对肺结核与肺癌的鉴别有一定诊断价值;而胸腔积液中RORα及RORγ水平检测的价值仍有待进一步验证。
- 刘浩然张亚莉任卫聪赵玲娟李传友王伟高孟秋
- 关键词：胸腔积液巨噬细胞游走抑制因子酶联免疫吸附测定
- 结核分枝杆菌黏附素(HBHA)对小鼠结核病免疫治疗作用的实验研究
- 2012年
- 目的探讨结核分枝杆菌粘附素(HBHA)对小鼠结核病实验模型的免疫治疗作用。方法取在改良罗氏培养基上生长良好的结核分枝杆菌H37Rv两周培养物,制备成均匀菌悬液,每只小鼠尾静脉注射菌量为106 CFU。于感染2周后,分别对CPG组30 ug、HBHA组5 ug、CpG+HBHA组(CpG 30 ug和HBHA 5 ug)及对照组腹腔注射生理盐水。于感染后4周脱颈处死小鼠,称取小鼠体重、肺脏和脾脏重量,对肺和脾组织进行菌落计数,观察肺病理改变。结果各实验组肺组织的重量与体重和对照组相比稍有偏大,菌落计数中发现HBHA免疫治疗组明显优于空白对照组,在病理切片中对照组小鼠肺组织有大片肉芽肿形成,病理损害严重。其它各组肺部病变呈弥散分布,但病变程度明显轻于对照组,在抗酸染色中空白对照组有大量的抗酸杆菌存在,其它各组相对明显减少。结论实验结果表明HBHA对治疗小鼠结核病变模型起一定的作用。
- 张旭霞田苗张海青丁志新王伟车南颖刘和平李传友
- 关键词：HBHA结核病
- 结核分枝杆菌特异基因MPT64-Rv1985c融合蛋白的免疫诊断价值研究被引量：2
- 2012年
- 目的表达和纯化结核分枝杆菌特异蛋白MPT64，Rv1985c及其融合蛋白MPT64-Rv1985c，并探讨三种抗原在结核病免疫诊断中的价值。方法通过PCR获得基因MPT64，Rv1985c及其融合基因，并克隆到pET32a（＋）表达载体，转化E．coli．BL21（DE3），经IPTG诱导表达后用镍柱进行纯化，再用SDS-PAGE及Western blot方法检测并鉴定目的产物。采用ELISA方法检测在血清（肺结核患者31例、肺外结核患者45例、健康人135例）及胸腔积液样本（结核性胸膜炎患者91例、肺癌性胸膜炎患者91例）中三种抗原的结核病诊断效率。结果三种目的蛋白均以包涵体形式表达。经过纯化及复性获得纯度较高的可溶性蛋白。血清及胸腔积液样品中特异性IgG抗体检测结果显示，融合蛋白MPT64-Rv1985c在诊断肺结核、肺外结核敏感性为87．1％和88．9％，诊断结核病的特异性为75．6％；诊断结核性胸膜炎敏感性为91．2％，特异性为84．6％，敏感性较单一抗原MPT64及Rv1985c有显著提高。结论融合蛋白MPT64-Rv1985c诊断效果显著高于单一抗原，在结核病诊断研究中具有重要的研究价值。
- 车南颖丁志鑫王伟张旭霞李传友
- 关键词：融合蛋白特异抗原
- GSK1292263在制备抑制结核分枝杆菌药物中的应用
- 本发明涉及医药技术领域，尤其是涉及小分子化合物在制备抑制结核分枝杆菌药物中的应用，所述小分子化合物为GSK1292263或含有GSK1292263的组合物，所述GSK1292263的组合是包含GSK1292263和其他活...
- 王伟逄宇段淑娟任卫聪李姗姗
- 调节性T细胞在调控抗结核免疫过程中的研究进展被引量：1
- 2022年
- 结核分枝杆菌(MTB)作为一种胞内寄生菌,主要通过飞沫传播侵入人体,可导致人体多器官感染从而引起机体产生以T细胞为主导的抗结核免疫应答。调节性T细胞(Treg细胞)作为一类负向调节机体免疫反应的T淋巴细胞亚群,在宿主抗结核免疫中发挥着调控免疫平衡的重要作用。大量研究表明MTB特异性Treg细胞影响着结核病的发生、发展以及疫苗的效能。因此,阐明MTB特异性Treg细胞的抗结核免疫应答的作用及调控机制将有助于进一步揭示宿主抗MTB免疫细胞功能降低的机制,可为结核病的免疫治疗研究提供依据。本文简要介绍了Treg细胞的亚型与功能,对其在结核病领域的研究进展进行了综述。
- 李浩然姚丛李珊珊王伟逄宇
- 关键词：TREG细胞机体免疫反应抗结核免疫飞沫传播调节性T细胞
- 结核分枝杆菌特异基因MPT64-Rv1985c融合蛋白的免疫诊断价值研究被引量：3
- 2012年
- 目的表达和纯化结核分枝杆菌特异蛋白MPT64、Rv1985c及其融合蛋白MPT64-Rv1985c,探讨3种抗原在结核病免疫诊断中的价值。方法通过PCR获得基因MPT64、Rv1985c及其融合基因,并克隆到pET32a(+)表达载体,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后用镍柱进行纯化,再用SDS-PAGE及Western blot方法检测并鉴定目的产物。采用ELISA方法检测3种抗原在血清及胸腔积液样本中的结核病诊断效率。结果 3种目的蛋白均以包涵体形式表达。经过纯化及复性获得纯度较高的可溶性蛋白。血清及胸腔积液样本中特异性IgG抗体检测结果显示,融合蛋白MPT64-Rv1985c在诊断肺结核、肺外结核的敏感性为87.1%和88.9%,特异性为75.6%;诊断结核性胸膜炎的敏感性为91.2%,特异性为84.6%,敏感性较单一抗原MPT64及Rv1985c有显著提高(P﹤0.05)。结论融合蛋白MPT64-Rv1985c诊断效果显著高于单一抗原,在结核病诊断中具有重要的研究价值。
- 车南颖丁志鑫王伟张旭霞李传友
- 关键词：结核分枝杆菌融合蛋白特异抗原
- ESRRB rs12437118多态性与中国华北汉族人群结核病易感性的关系
- 2023年
- 目的:调查ESRRB编码基因ESRRB内的rs12437118多态性与中国华北汉族人群结核病易感性的关系。方法:收集2018年3月至2019年10月于首都医科大学附属北京胸科医院就诊的籍贯信息为华北地区的607例汉族结核病患者作为病例组,以及660名籍贯信息为华北地区的结核病专科医院的汉族工作人员作为健康对照组。采用竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele-specific PCR,KASP)测定ESRRB基因rs12437118位点的单核苷酸多态性(SNP)。ESRRB蛋白的血清水平通过酶联免疫吸附测定法检测。通过比对基因型和ESRRB蛋白的差异,分析ESRRB基因rs12437118位点多态性与结核病易感性的关系。使用不同的遗传模型(包括显性和隐性模型)评估ESRRB rs12437118多态性与结核病的关联。结果:GG、GA和AA rs12437118基因型频率在病例组中分别为50.2%(305/607)、38.1%(231/607)和11.7%(71/607),在健康对照组中分别为44.9%(296/660)、45.6%(301/660)和9.5%(63/660),两组比较差异有统计学意义(χ^(2)=7.619,P=0.022)。GA rs12437118 SNP基因型与华北地区汉族人群结核病低风险明显相关[OR(95%CI)=1.34(1.06~1.70),χ^(2)=6.079,P=0.014]。病例组血清ESRRB水平[243.1(174.3,367.3)pg/μl],明显低于健康对照组血清ESRRB水平[360.3(240.0,604.1)pg/μl],差异有统计学意义(Z=5.623,P<0.001)。病例组AA、GA、GG基因型的ESRRB水平分别为328.9(226.3,553.0)pg/μl、232.6(164.7,379.7)pg/μl、196.8(150.1,328.4)pg/μl,差异无统计学意义(F=1.790,P=0.171);对照组AA、GA、GG基因型的ESRRB水平分别为427.5(253.9,619.4)pg/μl、353.7(247.8,666.4)pg/μl、303.3(219.8,519.1)pg/μl,差异无统计学意义(F=1.751,P=0.177)。结论:中国华北地区的汉族人群中ESRRB rs12437118 GA基因型与结核病易感性之间存在明显关联性,ESRRB在结核病患者人群血清中的低表达与rs12437118基因多态性无关。
- 段淑娟赵玲娟李传友李凌王伟
- 关键词：雌激素多态性单核苷酸结核疾病易感性
