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伽玛刀治疗脑转移瘤的现状与进展被引量：4: 2004年; 李晓钟许建新; 关键词：伽玛刀脑转移瘤放射外科

RGDS四肽对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响: 2008年; 探讨精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸(Arg-Gly-Asp-Ser RGDS)4肽诱导人结肠癌细胞SW480凋亡的作用。采用DAPI染色、DNA琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞技术分析RGDS对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响。结果表明,与对照组相比,RGDS处理细胞后,形态学观察显示DAPI染色的细胞核染色质凝聚、细胞溶解形成凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯状带(DNA ladder);流式细胞分析可见凋亡峰,凋亡率约是对照组的4.5倍。因此,RGDS具有诱导人结肠癌细胞SW480凋亡的作用。; 王晓霞牛勃解军李晓钟张悦红王惠珍王文渊; 关键词：凋亡 SW480

RNA干扰STK15基因对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响: 2013年; STK15（serine／threonine kinase15）是一类广泛存在于真核细胞中的丝氨酸／苏氨酸激酶，通过磷酸化下游特定底物影响G2／M期转换，促进中心体成熟、双极纺锤体建立以及染色体的分离。许多研究表明，多种肿瘤中STK15呈高表达状态，在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用。; 李晓钟王晓霞安奇君冯建宏裴毅; 关键词：STK15 RNA干扰结肠癌凋亡

STK15基因RNA干扰真核表达载体的构建及对人结肠癌细胞侵袭的影响: 2013年; 目的构建STK15基因特异的RNA干扰(RNAi)真核表达质粒,将其转染人结肠癌细胞SW480后,观察对STK15基因表达的抑制作用及对肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法设计并合成能表达小发夹结构RNA(shRNA)的DNA序列,退火后与载体pGPU6/GFP/Neo连接,构建重组表达载体pGPU6/GFP/NeoSTK15 shRNA,转化DH5α菌株后挑选阳性克隆,提取质粒进行序列测定。脂质体介导重组质粒转染人结肠癌SW480细胞,于转染后24 h和48 h通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法分别在mRNA和蛋白水平检测STK15基因的表达,并通过细胞体外侵袭实验检测肿瘤细胞的侵袭能力。结果测序证实插入pGPU6/GFP/Neo载体的DNA序列、方向和位点均正确。与阴性质粒转染组比较,pGPU6/GFP/Neo-STK15 shRNA质粒转染细胞24 h和48 h后,STK15基因的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,且呈现时间依赖性,STK15 mRNA水平分别下调80%和98%,蛋白水平分别下调40%和80%。与阴性质粒转染组比较,pGPU6/GFP/Neo-STK15shRNA质粒转染细胞的侵袭能力分别下降约67%和89%。结论成功构建了针对STK15基因的特异性shRNA真核表达载体,转染细胞后可抑制STK15基因的表达和细胞的侵袭能力,为进一步研究STK15基因功能以及探讨结肠癌治疗的新途径奠定了基础。; 李晓钟王晓霞贺杰峰裴毅; 关键词：RNA干扰真核表达载体 STK15

STK15过表达对人食管癌细胞株KYSE150生长的影响: 2013年; 目的:探讨丝氨酸/苏氨酸激酶15(serine/threonine kinase 15,STK15)过表达对人食管癌细胞株KYSE150生长的影响。方法:采用脂质体法将pEGFP-C1-STK15真核表达载体转染人食管鳞癌细胞株KYSE150,构建STK15过表达的稳定细胞系(GFP-STK15),通过荧光显微镜和Western blotting检测STK15的表达。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察STK15过表达对体外肿瘤细胞生长的影响。通过流式细胞术分析STK15过表达对细胞周期和凋亡的影响。采用裸鼠致瘤实验观察STK15过表达对体内肿瘤细胞生长的影响。结果:pEGFP-C1-STK15质粒转染细胞后筛选得到稳定克隆,荧光显微镜显示GFP-STK15融合蛋白定位于细胞的中心体以及纺锤体,Western blotting可检测到GFP-STK15融合蛋白的表达。与对照细胞相比,GFP-STK15细胞系的体外生长能力明显增加;G0/G1期细胞百分率降低,细胞凋亡率减少;GFP-STK15细胞系接种组裸鼠肿瘤明显增大,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:STK15过表达能促进人食管癌KYSE150细胞的生长,提示STK15将可能成为治疗食管癌的新靶点。; 王晓霞李晓钟路娜赵艳王康裴毅; 关键词：丝氨酸食管肿瘤细胞增殖

AoGDW肽抑制血小板聚集的作用机制被引量：8: 2007年; 目的研究RGD(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)肽衍生物-AoGDW(ω-氨基辛酸-甘氨酸-天门冬氨酸-色氨酸)抑制血小板聚集的作用机制。方法采用双色荧光标记以及流式细胞技术检测AoGDW肽对CD41抗体与血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合的抑制作用以及对血小板膜上P-选择素表达的影响。结果随着AoGDW肽浓度的增加,CD41抗体与活化血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合率呈现下降趋势,相对于阴性对照组,P<0.01。但CD41抗体与静止血小板GPⅡb/Ⅲa受体的结合率以及CD62p抗体与静止血小板P选择素的结合率与阴性对照组相比,P>0.05。结论AoG-DW肽是通过占据血小板上纤维蛋白原的结合位点即活化的GPⅡb/Ⅲa受体而发挥抑制血小板聚集的作用,并且不具有活化血小板的作用,是一种选择性的GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂。; 王晓霞李晓钟刘红林解军张悦红王惠珍牛勃; 关键词：RGD 流式细胞技术

IQGAP1高表达抑制食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性: 2023年; 本文旨在研究含IQ模序的GTP酶激活蛋白1(IQ motif containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)过表达或基因干扰是否影响食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性。质粒转染构建IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系,并采用Western blot进行鉴定。然后,采用不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)的顺铂处理细胞,通过3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝[3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测IQGAP1高表达、IQGAP1基因干扰和相应对照细胞的活力,通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-Diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色和流式细胞技术检测细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果显示,IQGAP1高表达和基因干扰的稳定细胞系成功建立。在不同浓度的顺铂处理后,MTT结果表明,IQGAP1高表达细胞活力明显高于对照细胞(P<0.05);而IQGAP1基因干扰细胞活力明显低于对照细胞(P<0.05)。DAPI染色和流式细胞检测结果显示,IQGAP1高表达细胞凋亡率明显低于对照细胞(P<0.05),IQGAP1基因干扰细胞凋亡率明显高于对照细胞(P<0.05)。Western blot结果表明,IQGAP1高表达细胞的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3酶原(pro-cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Procaspase-3)和多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)原带表达水平均高于对照细胞,裂解PARP(cleaved-PARP)的表达水平低于对照细胞,IQGAP1基因干扰细胞的Procaspase-3和PARP原带表达水平均低于对照细胞。研究结果表明,IQGAP1过表达影响凋亡抑制食管鳞癌细胞对顺铂的敏感性,提示IQGAP1过表达是导致顺铂在食管鳞癌细胞中产生耐药的重要机制。干扰IQGAP1表达后能提高食管鳞癌细胞对顺铂化疗的敏感性,提示IQGAP1可能是提高食管鳞癌化疗敏感性的重要治疗靶点。; 李鑫婷孙雪娇李婷杨子怡杨佳程王正谦赵欣冉李晓钟王晓霞; 关键词：IQGAP1 顺铂化疗耐药食管鳞状细胞癌

一种特异性降低人Aurora-A基因表达的shRNA及其应用: 本发明涉及分子遗传学及生物医药领域，具体为一种特异性降低人Aurora-A基因表达的shRNA及其应用，本发明提供了一种可以特异性降低人Aurora-A基因表达的发夹型干扰RNA，如SEQIDNO.1所示，针对的靶序列为...; 王晓霞裴毅李晓钟路娜陈显久牛勃

伽玛刀治疗垂体腺瘤的疗效分析被引量：1: 2003年; 郭裕天李鹏程李晓钟许建新刘学礼郝占平李鹏闫平平; 关键词：伽玛刀垂体腺瘤疗效体征并发症

YAP抑制剂Verteporfin对食管癌细胞存活和同质黏附能力的影响: 2023年; 为探讨Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)抑制剂Verteporfin(VP)对食管癌细胞存活和同质黏附(即细胞间黏附)能力的影响,采用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测了不同浓度的VP对食管癌细胞KYSE150和KYSE30存活率的影响。利用细胞聚集实验、细胞分离实验检测了VP处理后对KYSE150和KYSE30细胞同质黏附能力的影响。MTT比色法实验结果显示,VP对食管癌细胞生存有抑制作用,且抑制作用随药物浓度增大而增强;细胞聚集实验和细胞分离实验结果显示,与未经药物处理的细胞相比,VP处理后的细胞聚集的团块数量较少、体积较大、细胞的分离程度小,且浓度越大越显著。以上结果提示,细胞同质黏附能力显著增强,且呈浓度依赖性。VP能抑制食管癌细胞存活,增强食管癌细胞同质黏附能力,为VP可能成为治疗食管癌的新型药物奠定了理论基础。; 王秀丽李婷杨子怡李鑫婷赵蓉赵欣冉杨佳程李晓钟王晓霞; 关键词：VERTEPORFIN 食管癌

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李晓钟

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