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携带大鼠胶质细胞源性神经营养因子基因慢病毒载体的构建及转染被引量：3: 2008年; 目的构建携带增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)基因的慢病毒载体,转染原代培养的神经干细胞(neural stem cell,NSC),观察能否获得持续的GDNF表达。方法采用聚合酶链反应扩增,限制性内切酶酶切,T4DNA连接酶连接,将GDNF插入慢病毒主体载体pGC-FU,构建重组慢病毒载体(lenti-CMV-GDNF-EGFP)。将构建成功的慢病毒三质粒系统通过Lipofectamine 2000转染于人胚肾细胞系(293T),测定病毒滴度。感染NSC,荧光显微镜下观察EGFP的表达。流式细胞仪检测转染效率,Western blot检测GDNF的表达,酶联免疫吸附测定法检测NSC转染后释放GDNF的量。结果构建的慢病毒载体能高效感染NSC,转染效率达77.7%,3个月后仍有73.7%,Western blot的结果表明GDNF成功在细胞内表达,而酶联免疫吸附测定法表明转染后细胞外分泌GDNF的量随着时间的推移增多,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建携带EGFP和GDNF基因的慢病毒载体,并感染NSC,能使之持续表达GDNF。; 施勇周梁田洁汪洋; 关键词：慢病毒载体神经干细胞绿色荧光蛋白胶质细胞源性神经营养因子

一种经颈部咽旁间隙肿瘤手术用内镜拉钩: 本实用新型公开了一种经颈部咽旁间隙肿瘤手术用内镜拉钩，包括：手柄部、连接部、长钩部、固定管和吸引管；所述连接部沿上下方向延伸，所述连接部的上端设有向后延伸的所述手柄部，所述连接部的下端设有向后延伸的所述长钩部，所述长钩部...; 徐成志陈永正陶磊张明吴春萍施勇

因喉梗阻先行气管切开对喉癌外科治疗效果的影响被引量：1: 2017年; 目的探讨在喉癌外科治疗前先行气管切开对喉癌患者预后的影响。方法 2006年10月~2008年10月收治的喉鳞癌患者共173例,其中因呼吸困难需先行气管切开,再行喉切除手术者82例(A组),同期临床特征相似的喉癌患者91例(B组),分别比较2组病例的局部控制率、颈部控制率以及5年总生存率。结果 A组82例,均先行气管切开,喉部新生物活检,1周左右待病理确诊为喉鳞癌后再行喉切除术,术后局部复发30例、颈部淋巴结转移20例、全身转移7例;B组91例,同时行喉切除术和气管切开或单独行喉切除术,术后局部复发14例、颈部淋巴结转移9例、全身转移3例。2组局部复发率(36.3%∶15.4%)差异具有统计学意义(χ~2=10.222 6,P<0.005),颈部淋巴结转移率(24.4%∶9.9%)差异有统计学意义(χ~2=6.499 5,P<0.05),5年总生存率(54.9%∶72.5%)差异有统计学意义(χ~2=7.778,P<0.05)。结论在喉癌外科治疗前行气管切开术可被认为是影响喉癌预后的独立阴性因素。; 施勇周梁吴海涛黄维庭李筱明陈小玲李采; 关键词：喉切除术气管切开术鳞状细胞癌预后

神经干细胞移植到神经导管修复大鼠面神经缺损的研究被引量：7: 2012年; 目的:观察移植神经干细胞到可降解的聚乳酸/聚羟基乙酸(PLGA)神经导管修复大鼠面神经缺损的可行性。方法:20只SD大鼠随机分为2组,每组进行右侧面神经损伤手术,分别移植PLGA导管(A组)或含有神经干细胞的PLGA管(B组)。术后4、12周分别通过电生理检测、轴突形态学检测等方法来评估面神经的修复效果。结果:术后4周和12周,B组在神经动作电位的振幅分别为(27.53±7.48)、(141.23±21.18)μV,轴突的面积为(10 539.48±3 605.35)、(30 076.22±7 614.05)μm2,都高于A组[术后4周和12周,动作电位振幅为(13.03±11.38)、(118.50±22.70)μV;轴突面积为(6 633.20±3 759.30)、(20 772.53±10 903.65)μm2](P<0.05)。结论:神经干细胞移植可能会促进面神经的再生。; 施勇周梁田洁汪洋; 关键词：神经再生干细胞神经导管

RNA干扰神经干细胞中NgR基因的表达修复大鼠面神经缺损的体外实验研究: 2014年; 目的:应用RNA干扰技术抑制神经干细胞中NgR基因表达,观察神经干细胞的体外分化,为体内面神经修复提供营养支持。方法:采用PCR扩增,限制性内切酶酶切,T4DNA连接酶连接,将NgR与pGCsi载体连接,构建重组载体NgR shRNA,通过测序鉴定。NgR shRNA通过Lipofectamine 2000感染神经干细胞,荧光显微镜下观察EGFP的表达,Western Blot检测NgR的表达,免疫细胞化学鉴定转染前后神经干细胞向神经元分化的比例,转染后的神经干细胞种植于PLGA管,扫描电镜观察。结果:成功构建NgR shRNA质粒,成功感染神经干细胞,Western Blot结果表明干扰后的神经干细胞中的NgR表达减弱、免疫细胞化学结果示干扰后的神经干细胞向神经元分化比例明显高于对照组(P<0.01),差异有统计学意义。结论:成功构建NgR shRNA质粒,感染神经干细胞,使神经干细胞向神经元进一步分化,能更有效促进神经轴突的再生,为面神经损伤修复提供高效稳定的基因平台。; 施勇周梁田洁汪洋; 关键词：神经干细胞 RNA干扰 NOGO受体短发夹RNA

一种用于经口腔咽旁间隙手术的撑开装置: 本发明公开了一种用于经口腔咽旁间隙手术的撑开装置，包括撑开装置、辅助固定装置、医用恒温加热装置和医用蠕动泵；本发明属于口腔咽旁间隙手术撑开领域，具体是指一种用于经口腔咽旁间隙手术的撑开装置；本发明通过利用“热敷”疗法这一...; 徐成志陶磊张明吴春萍施勇曹鹏宇周健陈永正

开喉剑喷雾剂联合双参咽炎颗粒治疗慢性咽炎的研究被引量：6: 2023年; 目的观察开喉剑喷雾剂联合双参咽炎颗粒治疗慢性咽炎的临床疗效。方法将2019年1月—2020年1月复旦大学眼耳鼻喉科医院诊治的100例慢性咽炎患者随机分为研究组和对照组,每组50例。研究组给予开喉剑喷雾剂联合双参咽炎颗粒治疗,对照组仅给予双参咽炎颗粒治疗,2组均治疗14 d。观察2组治疗前、治疗7 d和治疗14 d后咽炎症状评分、生活质量评分、血清炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平、免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))变化,比较2组临床疗效。结果治疗7 d、14 d后,2组咽炎症状评分、生活质量评分及血清IL-6、CRP、TNF-α水平和CD8^(+)均明显降低(P均<0.05),且研究组各项指标均明显低于对照组(P均<0.05);2组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均明显升高(P均<0.05),且研究组各项指标均明显高于对照组(P均<0.05)。研究组治疗总有效率明显高于对照组[92%(46/50),74%(37/50)](P<0.05)。结论开喉剑喷雾剂联合双参咽炎颗粒治疗慢性咽炎的疗效优于双参咽炎颗粒单用,不仅可减轻症状,提高生活质量,而且可明显下调炎症因子水平而减轻炎症反应,调节机体免疫功能。; 吴春萍黄冬雁张明谢明施勇高春丽陶磊; 关键词：慢性咽炎开喉剑喷雾剂

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施勇