张焱
- 作品数：35 被引量：29H指数：4
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- 一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法
- 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法，其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术，具体包括：将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50～90%；离心除去细胞碎片，...
- 闭静秀周卫斌苏志国李岩黄永东赵岚张焱
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- 分子排阻色谱-多角度激光散射仪联用在线检测重组乙肝表面抗原（HBsAg）的分子量和颗粒大小
- ＜正＞ 重组乙肝表面抗原（HBsAg）免疫原性的强弱与其分子量和颗粒大小密切相关。在HBsAg的分离纯化过程中在线检测HBsAg的分子量和颗粒大小对乙肝疫苗生产过程的质量控制具有重要意义。
- 周卫斌闭静秀李岩张焱苏志国
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- 超大孔离子交换制备色谱分离纯化高活性凝血因子Ⅷ被引量：10
- 2012年
- 建立了一条从人血浆中分离高活性凝血因子Ⅷ(FⅧ)的纯化工艺。基于FⅧ和介质孔径的尺度比及其对蛋白质活性影响的分析,设计了以超大孔离子交换制备色谱为核心步骤的新型分离纯化工艺。分别进行超大孔离子交换色谱与传统离子交换色谱的条件优化,并对优化工艺所得产品进行了活性检测(底物显色法)和纯度检测(高效凝胶过滤和凝胶电泳)。结果表明,超大孔介质结构不但可以有效地保护蛋白质大分子结构,而且能够大幅度地提高制备色谱的传质速率,从而得到具有高凝血活性的FⅧ产品。FⅧ在超大孔制备色谱过程中的回收率(85%)比传统离子交换制备色谱高4～5倍,产品比活高达154 IU/mg。此外,还研究了超大孔介质的再生程序,采用5个柱体积的1 mol/L NaOH低流速清洗色谱柱,保证了色谱工艺的稳定性。本纯化工艺步骤简单,重现性好,易于放大生产。
- 康丽梅张焱罗坚李由周月芳余蓉苏志国
- 关键词：血浆蛋白分离纯化
- 乳腺生物反应器表达的重组人乳清白蛋白的高效分离纯化被引量：1
- 2011年
- 利用乳腺生物反应器高效地表达重组人乳清白蛋白,但是目标产物分离纯化的难度较大。通过分子模拟计算比较待分离原料中主要蛋白组分的物化性质,包括表面电势和表面疏水性,在此基础上设计了高分辨率、快速的分离纯化工艺。通过硫酸铵沉淀的正交试验条件优化,有效地去除了干扰层析精制过程的IgG杂质,提高了后续疏水层析的稳定性,从而成功地分离开目标蛋白及与其同源的牛乳清白蛋白杂质,得到纯度>95%的rHLA纯品,工艺回收率48.6%。乳糖合成活性和圆二色谱检测结果表明,纯化rHLA具有调节β-1,4-半乳糖苷转移酶活性和天然的空间结构。
- 李由张焱苏海佳罗坚白倩马光辉苏志国
- 关键词：乳腺生物反应器疏水层析同源蛋白质
- PEG沉淀结合层析分离重组乙肝病毒表面抗原被引量：6
- 2006年
- 应用聚乙二醇(PEG)沉淀结合层析技术纯化乙肝病毒表面抗原(HBsAg),对PEG浓度、pH值、离子强度等影响PEG沉淀的因素进行了正交实验研究.结果表明,浓度为0.12g/mL的PEG6000在4℃,pH9.0条件下沉淀HBsAg纯化效果比较理想,纯化倍数达3.7,回收率96.8%,有效地去除了生物大分子杂质和牛血清白蛋白(BSA),PEG在后续的凝胶过滤中可以除去,整个工艺的回收率可提高到41%.
- 张焱闭静秀周卫斌李岩董爱华孙娟苏志国
- 关键词：分离纯化
- 一种分离纯化凝血因子VIII的方法
- 本发明涉及血液制品分离纯化领域，具体地，本发明涉及一种分离纯化凝血因子VIII的方法。所述方法采用超大孔离子交换层析分离含有凝血因子VIII的层析原料，所述方法还包括在超大孔离子交换层析分离前进行粗分离处理的步骤。本发明...
- 张焱苏志国罗坚康丽梅马光辉
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- 离子交换色谱纯化口蹄疫灭活病毒抗原的方法
- 本发明涉及一种从细胞培养液中分离纯化口蹄疫灭活病毒抗原的方法。该方法利用离子交换色谱填料上的带电基团与口蹄疫灭活病毒抗原溶液中不同带电组分的相互作用，将口蹄疫灭活病毒抗原和杂蛋白质、核酸分离，从而达到提纯口蹄疫灭活病毒抗...
- 张松平苏志国杨延丽马光辉李浩张焱
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- 重组乙肝表面抗原的稳定性和优化分离纯化工艺的研究
- 乙型肝炎是危害人类健康的主要传染性疾病之一，疫苗接种是防治该病毒传染的主要途径。通过基因工程表达的乙肝表面抗原已经得到广泛的应用，但是下游分离纯化工艺不尽完善，主要表现为总HBsAg收率较低(＜20％)，成本较高，仍有较...
- 张焱
- 关键词：乙肝表面抗原羟基化合物表面抗原离子交换层析
- 文献传递
- 一种新型的琼脂糖疏水层析介质开发及其在重组乙肝表面抗原(CHO-HBsAg)分离纯化中的应用被引量：5
- 2006年
- 以粒径均一的国产高交联度快速流琼脂糖为基质,采用活化、交联等步骤合成了针对分离纯化CHO-HBsAg的3C间臂的丁基琼脂糖疏水介质,通过控制丁基配基密度提高分离HBsAg的纯化倍数和回收率,获得了纯化倍数约20、HBsAg回收率约80%的介质。评估了合成介质的理化性质,流速为500cm/h时柱压力小于0.06MPa,表明介质具有较高的机械强度和良好的流动性能,介质经过酸、碱、变性剂等处理后化学性质稳定。将介质合成工艺进一步放大到2L介质/批,应用到HBsAg分离纯化的三步层析整和工艺中,结果表明,批量合成的疏水介质,HBsAg回收率与进口介质相当,HBsAg终产品纯度在95%以上,符合国家药典要求。最后考察了介质合成批次间的配基密度的可控性和单批次合成介质的重复使用性,结果表明,合成工艺和介质的重复性能满足产业化要求,这种成本低的介质有望替代目前工业生产广泛使用的进口疏水介质。
- 王阳木闭静秀赵岚周卫斌李岩黄永东张焱林海苏志国
- 关键词：层析介质纯化
- 聚乙二醇伴随式离子交换层析分离重组乙肝病毒表面抗原被引量：3
- 2005年
- 针对由中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达的多聚亚基蛋白HBsAg在离子交换层析过程中容易因亚基解离而导致蛋白解聚和丧失生物活性的难题,实验中选择聚乙二醇(PEG)作为保护剂伴随式(Polyethylene Glycol-Accompanied)离子交换层析分离纯化HBsAg。实验表明,在流动相中加入1%PEG10000(WV)作为纯化伴侣,HBsAg的回收率由55%左右提高到80%以上,纯化倍数基本保持在12左右。对纯化产物进行SDS_PAGE分析表明,1%PEG10000的纯化伴侣伴随式离子交换层析能全部保留HBsAg的糖基化蛋白单体(27kD和30kD),高效液相色谱联用多角度激光散射(High Performance Size Exclusion Chromatography-Multiangle Laser Light Scattering,HPSEC-MALLS)进一步分析阐明了PEG能促使HBsAg颗粒尺寸分布更均一,结构更接近天然乙肝表面抗原。
- 闭静秀周卫斌李岩黄永东张焱董爱华苏志国
- 关键词：聚乙二醇乙肝表面抗原离子交换层析
