张海予
- 作品数：7 被引量：21H指数：2
- 供职机构：中国农业大学生物学院微生物学与免疫学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 粪产碱菌nif H,nif D和部分nif K的克隆、定位及序列分析被引量：1
- 1997年
- 提取粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)总DNA,经限制性内切酶酶切和琼脂糖凝胶电泳,以含肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)nif H和nif H-D基因的DNA片段为探针进行Southern杂交,筛选出与nif HDK同源的4.6kb片段,克隆到pBluesript SK^+载体上,构建了重组质粒pBZl.经亚克隆、酶切、DNA序列分析后发现,粪产碱菌具有与其它固氮菌相似的结构特征,其nif HDK共用1个启动子,具有上游激活序列UAS,RNA聚合酶σ^(54)因子识别序列、1个A-T富集区和SD序列.nifH和nif D的阅读框架分别为888和1476bp,GC含量各为61.6%和60.2%.nifH-nif D和nif D-nif K的基因间隔区长度分别为101和105bp,各存在1个7bp的反向重复和1个SD序列.由阅读框架(ORF)推导的铁蛋白和钼铁蛋白α亚基的氨基酸序列与其它固氮菌相比有较高的同源性,高度保守的氨基酸残基所处的位置也很相似.同源性比较说明,粪产碱菌与棕色固氮菌(Azotobacter vinelandii)同源性最高.
- 张海予萧凤回萧凤回朱新生林敏方宣钧萧凤回
- 关键词：粪产碱菌克隆
- 费氏中华根瘤菌042BS结瘤特性和结瘤调节基因的克隆及功能检测
- ＜正＞ 费氏中华根瘤菌（Sinorhzobium.fredii）042BS分离自新疆的苜蓿根瘤。通过交叉结瘤试验,发现它既可在苜蓿上又可在大豆上结瘤固氮。16S rDNA PCR-RFLP分析表明,042BS与费氏中华根...
- 张海予杨苏声张海瑜李小红温尚昆
- 文献传递
- 一株能在苜蓿上结瘤的费氏中华根瘤菌被引量：15
- 2001年
- 费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii) 0 4 2BS分离自新疆的苜蓿根瘤 ,通过交叉结瘤试验 ,发现它既可在苜蓿上又可在大豆上结瘤固氮。 1 6SrDNAPCR RFLP分析表明 ,0 4 2BS与费氏中华根瘤菌模式菌株USDA2 0 5的 4种限制性酶切图谱完全一致。其G +Cmol%为 60 0 ,与费氏中华根瘤菌USDA2 0 5和USDA1 91的DNA同源性分别为 84 9%和89 6% ,表明 0 4 2BS属于费氏中华根瘤菌。应用绿色荧光蛋白基因标记 0 4 2BS ,得到重组菌株 0 4 2BSG。将其接种保定苜蓿和北引 1号大豆 ,并重新分离出根瘤菌 ,利用激光共聚焦荧光显微镜检测到标记基因的表达 ,从而确证了 0 4 2BS能在苜蓿和大豆上结瘤。而且 ,0 4
- 张海瑜张海予李小红杨苏声
- 关键词：费氏中华根瘤菌DNA同源性绿色荧光蛋白苜蓿
- 粪产碱菌nifH启动子与LacZ的融合基因构建及其表达调控被引量：4
- 1997年
- 在ｐＲＫ２９０载体上将粪产碱菌固氮酶基因ｎｉｆＨ的启动子与报告基因ＬａｃＺ相融合，获得表达载体ｐＳＫ６，并转导到粪产碱菌Ａ１５０１菌株中，探讨了铵和氧对该启动子的表达调控．结果表明，粪产碱菌ｎｉｆＨ启动子仍受到铵和氧的调节．当铵浓度大于３ｍｍｏｌ／Ｌ时，其表达水平大幅度下降，但铵浓度高达４０ｍｍｏｌ／Ｌ，仍有很低水平表达．而且，带有巴西固氮螺菌ｎｉｆＨ∶ｌａｃＺ的粪产碱菌接合子在高铵条件下（４０ｍｍｏｌ／Ｌ）也有低水平表达．此外，氧对粪产碱菌的ｎｉｆＨ启动子有抑制作用，这在无铵条件下表现最为明显．
- 张海予林敏萧凤回萧凤回
- 关键词：粪产碱菌基因调控固氮菌
- 费氏中华根瘤菌042BS结瘤调节基因的克隆及功能检测
- 2002年
- 费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii) 0 4 2BS可以在大豆和苜蓿上结瘤。用费氏中华根瘤菌USDA2 5 7的nodD1和nodD2基因分别作为探针 ,与 0 4 2BS总DNA进行Southern杂交 ,发现其DNA经EcoRI酶切后分别在 3 0kb和 6 0kb处各有一条阳性带。回收这两条阳性带附近的DNA片段 ,建立部分基因文库 ,克隆到带有nodD1基因的 3 0kb片段 ,以及带有nodD2基因的 6 0kb片段。对nodD1和nodD2进行序列分析 ,结果表明 0 4 2BS的nodD1与费氏中华根瘤菌根瘤菌USDA2 5 7和USDA1 91的同源性高达 99% ,而nodD2与USDA2 5 7的同源性为1 0 0 %。再将nodD1的片段克隆到pBBRIMCS 5载体上 ,导入豌豆根瘤菌蚕豆生物变种 (Rhi zobiumleguminosarumbv.viciae)LPR5 0 5 4中进行功能检测 ,显示 0 4
- 张海瑜张海予李小红温尚昆杨苏声
- 关键词：费氏中华根瘤菌克隆
