张海瑜
- 作品数：7 被引量：22H指数：2
- 供职机构：中国农业大学生物学院微生物学与免疫学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 042BS菌株的分类地位和结瘤遗传机制的研究
- 费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)042BS分离自新疆的苜蓿根瘤,交叉结瘤试验发现它既可以在苜蓿上又能在大豆上结瘤固氮.提取042BS的总DNA,经EcoRI完全酶切后, 分别与费氏中华根瘤菌no...
- 张海瑜
- 关键词：费氏中华根瘤菌DNA同源性绿色荧光蛋白结瘤基因
- 文献传递
- 费氏中华根瘤菌042BS结瘤特性和结瘤调节基因的克隆及功能检测
- ＜正＞ 费氏中华根瘤菌（Sinorhzobium.fredii）042BS分离自新疆的苜蓿根瘤。通过交叉结瘤试验,发现它既可在苜蓿上又可在大豆上结瘤固氮。16S rDNA PCR-RFLP分析表明,042BS与费氏中华根...
- 张海予杨苏声张海瑜李小红温尚昆
- 文献传递
- 一株能在苜蓿上结瘤的费氏中华根瘤菌被引量：15
- 2001年
- 费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii) 0 4 2BS分离自新疆的苜蓿根瘤 ,通过交叉结瘤试验 ,发现它既可在苜蓿上又可在大豆上结瘤固氮。 1 6SrDNAPCR RFLP分析表明 ,0 4 2BS与费氏中华根瘤菌模式菌株USDA2 0 5的 4种限制性酶切图谱完全一致。其G +Cmol%为 60 0 ,与费氏中华根瘤菌USDA2 0 5和USDA1 91的DNA同源性分别为 84 9%和89 6% ,表明 0 4 2BS属于费氏中华根瘤菌。应用绿色荧光蛋白基因标记 0 4 2BS ,得到重组菌株 0 4 2BSG。将其接种保定苜蓿和北引 1号大豆 ,并重新分离出根瘤菌 ,利用激光共聚焦荧光显微镜检测到标记基因的表达 ,从而确证了 0 4 2BS能在苜蓿和大豆上结瘤。而且 ,0 4
- 张海瑜张海予李小红杨苏声
- 关键词：费氏中华根瘤菌DNA同源性绿色荧光蛋白苜蓿
- 苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关的DNA片段的克隆被引量：10
- 1999年
- 以耐盐的苜蓿中华根瘤菌（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｍｅｌｉｌｏｔｉ）０４２Ｂ为材料，制备其总ＤＮＡ，经过限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ的部分酶解，利用电洗脱方法回收１５ ～２５ｋｂ 大小的ＤＮＡ 片段。以碱法制备载体质粒ｐＬＡＦＲⅠ，用ＥｃｏＲⅠ将其切成线状，然后用Ｔ４ＤＮＡ 连接酶将回收片段与线状载体连接，利用包装蛋白进行包装后，感染大肠杆菌（ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）Ｓ１７１，构建了０４２Ｂ的基因文库。以固体亚硝基胍作为诱变剂处理出发菌株，在０５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ 的条件下，从２０００ 个菌落中筛选得到１２ 株０４２Ｂ的盐敏感突变株，以其中稳定的盐敏突变株ＧＺ１７ 为受体菌，利用两亲本杂交将含有０４２Ｂ的ＤＮＡ 片段的ｐＬＡＦＲⅠ重组质粒转移到ＧＺ１７ 中，在含有四环素和０５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ 的基本培养基上筛选出能够耐盐的阳性克隆，获得了与耐盐有关的７ｋｂ 长的ＤＮＡ片段。对该片段进行亚克隆，最终获得了４ｋｂ
- 陈雪松张海瑜高为民朱坤阚凤玲杨苏声
- 关键词：苜蓿中华根瘤菌耐盐基因文库亚克隆
- 菌株的分类地位和结瘤遗传机制的研究
- 张海瑜
- 关键词：费氏中华根瘤菌DNA同源性绿色荧光蛋白结瘤基因
- 费氏中华根瘤菌042BS结瘤调节基因的克隆及功能检测
- 2002年
- 费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii) 0 4 2BS可以在大豆和苜蓿上结瘤。用费氏中华根瘤菌USDA2 5 7的nodD1和nodD2基因分别作为探针 ,与 0 4 2BS总DNA进行Southern杂交 ,发现其DNA经EcoRI酶切后分别在 3 0kb和 6 0kb处各有一条阳性带。回收这两条阳性带附近的DNA片段 ,建立部分基因文库 ,克隆到带有nodD1基因的 3 0kb片段 ,以及带有nodD2基因的 6 0kb片段。对nodD1和nodD2进行序列分析 ,结果表明 0 4 2BS的nodD1与费氏中华根瘤菌根瘤菌USDA2 5 7和USDA1 91的同源性高达 99% ,而nodD2与USDA2 5 7的同源性为1 0 0 %。再将nodD1的片段克隆到pBBRIMCS 5载体上 ,导入豌豆根瘤菌蚕豆生物变种 (Rhi zobiumleguminosarumbv.viciae)LPR5 0 5 4中进行功能检测 ,显示 0 4
- 张海瑜张海予李小红温尚昆杨苏声
- 关键词：费氏中华根瘤菌克隆
