安礼友
- 作品数：16 被引量：26H指数：3
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏省科技支撑计划项目国家科技重大专项江苏省高技术研究计划(农业)项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 利用乳腺上皮细胞生产转fat-l基因克隆羊的研究
- 本研究以转基因乳腺上皮细胞为供核细胞进行了7次核移植实验，共超排了28只供体山羊，将165枚卵移植到17只受体中，到期1只受体出生了1只转fat-1基因克隆羊，另有1只受体待产。在9只妊娠的受体中，有5只羊在妊娠至中后期...
- 袁玉国于宝利杨廷佳安礼友成勇
- 关键词：核移植乳腺上皮细胞
- 以经过转染的乳腺上皮细胞生产克隆羊被引量：7
- 2009年
- 为研究转基因乳腺上皮细胞发育的全能性,利用电转染方法将人乳铁蛋白(hLF)乳腺特异性表达载体电转染山羊乳腺上皮细胞,经G418和PCR筛选获得阳性克隆细胞株,经催乳素诱导的细胞株上清液用Western blotting方法检测hLF的表达。以转基因与上清液中表达hLF均为阳性的细胞为核供体细胞,进行山羊体细胞核移植。结果为:16株细胞表达重组hLF,分子质量为75 kD;将144枚重构胚移入16只同步发情的山羊输卵管中,在移植后的30 d、60 d和90 d的妊娠率分别为87.5%、81.3%和62.5%;最终3只受体妊娠足月,产下3只克隆羊,克隆效率为2.1%,PCR-RFLP分析表明克隆羊均来自供体羊细胞,但没有整合外源基因。结果表明,hLF转基因乳腺上皮细胞能分泌hLF;乳腺上皮细胞经转染、筛选和长期培养的条件下,能保持发育的全能性。
- 袁玉国丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟缪明星成勇
- 关键词：乳腺上皮细胞核移植人乳铁蛋白
- 不同FSH剂量·季节和重复超排对山羊超数排卵的影响被引量：11
- 2011年
- [目的]研究不同FSH剂量、季节和重复超排等因素对供体羊超排效果的影响,为扬州地区进一步做好山羊胚胎移植和胚胎生物工程研究提供必要的数据。[方法]设计不同FSH剂量(240 IU和300 IU)、季节(10～12月份和4～6月份)、重复超排(第1次和第2次),鉴定超排效果。[结果]FSH 240 IU和300 IU组的平均排卵点和可用胚数分别为10.12个、8.82枚和15.55个、13.15枚,2组间平均排卵点和可用胚数差异显著(P<0.05);在4～6月份和10～12月份的平均排卵点和可用胚数分别为9.05个、7.05枚和15.55个、13.15枚,2组间平均排卵点和可用胚数差异显著(P<0.05);供体使用1次和2次的超排效果差异不显著(P>0.05)。[结论]FSH剂量、季节因素对超排效果影响显著,供体重复使用对超排效果影响不显著。
- 袁玉国安礼友于宝利杨廷佳成勇
- 关键词：超数排卵山羊FSH
- 含双筛选基因的人乳铁蛋白乳腺特异表达载体的构建及其表达
- 为提高表达构件的表达水平和表达稳定性，本文采用CMV组成型启动子和牛as1-CSN基因调控元件组成双启动子调控元件。为检验其表达状况，在上述调控元件中插入hLFcDNA，组成重组构件pbCNCS/LF36，为便于后续体细...
- 袁玉国安礼友杨廷佳于宝利赵俊辉曹玉娟成勇
- 关键词：人乳铁蛋白双启动子动物模型胎儿成纤维细胞荧光蛋白
- 小鼠乳汁中重组人乳铁蛋白的提取与抗菌活性的研究
- 本研究从人乳铁蛋白(hLF)cDNA转基因小鼠乳汁中提取重组人乳铁蛋白(rhLF)，并用提取的rhLF进行抗菌活性分析。收集了2个基因和2个品系的(PcL25和AP基因)转基因小鼠乳汁，采用凝胶过滤层析法从转基因小鼠乳汗...
- 缪明星柏亚军安礼友周咏松郭磊袁玉国成勇
- 关键词：人乳铁蛋白转基因小鼠抑菌作用乳汁抗菌活性
- 用乳腺上皮细胞生产人乳铁蛋白转基因克隆羊的研究
- 引言国内外普遍采用胎儿成纤维细胞作为生产转基因克隆动物的供体细胞。但目前国内外还没有用转基因乳腺上皮细胞作供核细胞获得克隆羊的报道,其重构胚的发育能力还不清楚。
- 袁玉国成勇丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟
- 关键词：核移植乳腺上皮细胞人乳铁蛋白山羊
- 以乳腺上皮细胞为供核细胞生产克隆羊
- 利用电转染方法将人乳铁蛋白乳腺特异性表达载体电转染山羊乳腺上皮细胞,经G418和PCR筛选获得刚性克隆细胞株,经诱导的细胞株上清液用Western-blot方法检测.以转基因阳性细胞株为核供体细胞,进行山羊体细胞核移植....
- 袁玉国丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟成勇
- 关键词：转基因山羊核移植乳腺上皮细胞人乳铁蛋白体细胞核移植
- 含双筛选基因的人乳铁蛋白乳腺特异表达载体的构建及其表达
- 为提高表达构件的表达水平和表达稳定性,采用CMV组成型启动子和牛αs1-CSN基因调控元件组成双启动子调控元件.为检验其表达状况,在上述调控元件中插入hLF cDNA,组成重组构件pbCNCS/LF36,为便于后续体细胞...
- 袁玉国安礼友杨廷佳于宝利赵俊辉曹玉娟成勇
- 关键词：人乳铁蛋白双启动子小鼠胎儿成纤维细胞荧光蛋白
- 转染乳腺上皮细胞为供核细胞制备克隆羊
- 为研究转基因乳腺上皮细胞发育的全能性,利用电转染方法将人乳铁蛋白(hLF)乳腺特异性表达载体电转染山羊乳腺上皮细胞,经G418和PCR筛选获得阳性克隆细胞株,经催乳素诱导的细胞株上清液用Western-blot方法检测h...
- 袁玉国丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟缪明星成勇
- 关键词：乳腺上皮细胞核移植人乳铁蛋白
- 人乳铁蛋白乳腺特异性表达载体的构建及其功能的验证被引量：6
- 2011年
- 构件pbCNCS/LF36经微注射获得转基因小鼠,同时为了准确筛选出整合的单克隆细胞,增加1个Cre/LoxP-GFP-Neo系统构建成pAPLM,将其转染山羊胎儿成纤维细胞筛选阳性细胞。结果表明:小鼠受体妊娠率28.5%,产仔32个,PCR整合检测4只阳性(3♀、1♂,整合率12.5%)。构件产生的3只母鼠和4号后代母鼠乳汁中重组人乳铁蛋白(hLF)用ELISA方法检测,表达量分别为3.8、2.8、0.9mg.mL-1,4号后代3只母鼠表达量分别为4.2、3.9、3.6mg.mL-1。构件pAPLM片段转染细胞后,经G418筛选,挑取单克隆扩大培养,其中8株PCR阳性克隆细胞荧光显微镜观察100%都有GFP的表达。以上结果证实,双启动子能调控外源基因在乳腺中特异高水平表达hLF,双标记基因可提高筛选阳性供核细胞的准确性,这为进一步作体细胞转基因克隆奠定基础。
- 袁玉国安礼友于宝利杨廷佳成勇
- 关键词：人乳铁蛋白双启动子小鼠胎儿成纤维细胞荧光蛋白
