赵俊辉
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏省高技术研究计划(农业)项目江苏省普通高等学校高新技术产业发展项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 用乳腺上皮细胞生产人乳铁蛋白转基因克隆羊的研究
- 引言国内外普遍采用胎儿成纤维细胞作为生产转基因克隆动物的供体细胞。但目前国内外还没有用转基因乳腺上皮细胞作供核细胞获得克隆羊的报道,其重构胚的发育能力还不清楚。
- 袁玉国成勇丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟
- 关键词：核移植乳腺上皮细胞人乳铁蛋白山羊
- 文献传递
- 以乳腺上皮细胞为供核细胞生产克隆羊
- 利用电转染方法将人乳铁蛋白乳腺特异性表达载体电转染山羊乳腺上皮细胞,经G418和PCR筛选获得刚性克隆细胞株,经诱导的细胞株上清液用Western-blot方法检测.以转基因阳性细胞株为核供体细胞,进行山羊体细胞核移植....
- 袁玉国丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟成勇
- 关键词：转基因山羊核移植乳腺上皮细胞人乳铁蛋白体细胞核移植
- 文献传递
- 以经过转染的乳腺上皮细胞生产克隆羊被引量：7
- 2009年
- 为研究转基因乳腺上皮细胞发育的全能性,利用电转染方法将人乳铁蛋白(hLF)乳腺特异性表达载体电转染山羊乳腺上皮细胞,经G418和PCR筛选获得阳性克隆细胞株,经催乳素诱导的细胞株上清液用Western blotting方法检测hLF的表达。以转基因与上清液中表达hLF均为阳性的细胞为核供体细胞,进行山羊体细胞核移植。结果为:16株细胞表达重组hLF,分子质量为75 kD;将144枚重构胚移入16只同步发情的山羊输卵管中,在移植后的30 d、60 d和90 d的妊娠率分别为87.5%、81.3%和62.5%;最终3只受体妊娠足月,产下3只克隆羊,克隆效率为2.1%,PCR-RFLP分析表明克隆羊均来自供体羊细胞,但没有整合外源基因。结果表明,hLF转基因乳腺上皮细胞能分泌hLF;乳腺上皮细胞经转染、筛选和长期培养的条件下,能保持发育的全能性。
- 袁玉国丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟缪明星成勇
- 关键词：乳腺上皮细胞核移植人乳铁蛋白
- 含双筛选基因的人乳铁蛋白乳腺特异表达载体的构建及其表达
- 为提高表达构件的表达水平和表达稳定性,采用CMV组成型启动子和牛αs1-CSN基因调控元件组成双启动子调控元件.为检验其表达状况,在上述调控元件中插入hLF cDNA,组成重组构件pbCNCS/LF36,为便于后续体细胞...
- 袁玉国安礼友杨廷佳于宝利赵俊辉曹玉娟成勇
- 关键词：人乳铁蛋白双启动子小鼠胎儿成纤维细胞荧光蛋白
- 文献传递
- 转染乳腺上皮细胞为供核细胞制备克隆羊
- 为研究转基因乳腺上皮细胞发育的全能性,利用电转染方法将人乳铁蛋白(hLF)乳腺特异性表达载体电转染山羊乳腺上皮细胞,经G418和PCR筛选获得阳性克隆细胞株,经催乳素诱导的细胞株上清液用Western-blot方法检测h...
- 袁玉国丁国梁安礼友赵俊辉曹玉娟缪明星成勇
- 关键词：乳腺上皮细胞核移植人乳铁蛋白
- 文献传递
- 含双筛选基因的人乳铁蛋白乳腺特异表达载体的构建及其表达
- 为提高表达构件的表达水平和表达稳定性，本文采用CMV组成型启动子和牛as1-CSN基因调控元件组成双启动子调控元件。为检验其表达状况，在上述调控元件中插入hLFcDNA，组成重组构件pbCNCS/LF36，为便于后续体细...
- 袁玉国安礼友杨廷佳于宝利赵俊辉曹玉娟成勇
- 关键词：人乳铁蛋白双启动子动物模型胎儿成纤维细胞荧光蛋白
- 文献传递
