周钦
- 作品数：9 被引量：43H指数：4
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- AP-1在转录水平调控氧化低密度脂蛋白诱导的转化生长因子-β_1表达被引量：20
- 2002年
- 目的 了解转录激活蛋白 1(AP 1)是否参与调控氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)诱导转化生长因子 β1(TGF β1)基因的表达 ,探讨Ox LDL激活AP 1可能的信号转导途径。方法 首先利用SD大鼠TGF β1启动子缺失体 荧光素酶 (luciferase)报告基因瞬时转染系膜细胞并检测虫荧光素酶相对活性 ,找出可能的应答区域 ;然后对AP 1结合位点进行突变并加入c Jun/AP 1抑制剂 ,比较启动子活性的变化情况。利用Western印迹检测了Ox LDL对系膜细胞p38有丝分裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)总蛋白和磷酸化水平的影响。最后 ,用凝胶阻滞法 (EMSA)观察在特异性的蛋白激酶抑制剂处理下的AP 1活性的变化。结果 对Ox LDL刺激的应答 ,TGF β1启动子 - 15 5 0到 - 84 5之间是一个正调控区域 ,- 6 2 9到 - 4 2 2之间则是一个负调控区。AP 1结合位点突变和c Jun/AP 1抑制剂均导致TGF β1启动子活性显著降低。在Ox LDL刺激下p38MPAK表现出的不是量的变化 ,而是其磷酸化水平的增加。PKC抑制剂明显地抑制了Ox LDL诱导的AP 1活性 ;与之相反 ,p38MPAK抑制剂则对AP 1活性无显著影响。结论 在大鼠肾系膜细胞 ,AP 1在转录水平参与调控Ox LDL诱导TGF β1表达的过程 ;且Ox LDL可能部分是通过PKC信号转导途径激活AP 1中的c Jun蛋白 ,再由c Jun/AP 1从?
- 周钦兰洋王远程赵昀吴兆龙
- 关键词：肾小球膜氧化低密度脂蛋白信号转导通路肾小球纤维化
- 氧化-低密度脂蛋白诱导系膜细胞转录激活蛋白1活化的信号转导通路被引量：2
- 2003年
- 目的 观察氧化-低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导系膜细胞转录激活蛋白1(AP-1)活化的作用,探讨AP-1活化的上游信号转导机制。方法 大鼠肾小球系膜细胞随机分为正常细胞组,ox-LDL处理组和ox-LDL+蛋白激酶抑制剂组。采用Western blot测定丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)家族磷酸化水平,采用凝胶迁移率实验观察蛋白激酶抑制剂bisindolylmaleimide I、H89、genistein、PD98059及SB203580对ox-LDL诱导系膜细胞AP-1活性的影响。结果 ox-LDL呈浓度和时间依赖性激活JNK1/SAPK(stress activated protein kinase)、p38MAPK磷酸化(P<0.05),而ox-LDL对p44/42MAPK磷酸化无影响(P>0.05)。bisindolylmaleimide I浓度为50、100、200 nmol/L时均显著抑制ox-LDL诱导系膜细胞AP-1活性。H89剂量为0.5、5 μmol/L时,AP-1活性显著受抑制。genistein浓度为25、50 μmol/L时并不抑制ox-LDL诱导AP-1活性,浓度达100 μmol/L时则显著抑制ox-LDL诱导系膜细胞AP-1活性。SB203580和PD98059均不能抑制ox-LDL诱导AP-1活性。结论 PKC、PKA及PTK等多种蛋白激酶参与对ox-LDL诱导系膜细胞AP-1活性的调控。
- 王远程吴兆龙周钦
- 关键词：肾小球疾病发病机制信号转导蛋白激酶类
- 核转录因子-κB对氧化低密度脂蛋白诱导大鼠系膜细胞转化生长因子β1转录的调控被引量：4
- 2003年
- 兰洋周钦吴兆龙
- 关键词：核转录因子-КB氧化低密度脂蛋白肾系膜细胞转化生长因子Β1
- 2bit/cell Multilevel Flash Memory的研究与设计
- 作为发展最快的非挥发性存储器，Flash存储器有着可比拟DRAM的随机存取速度，很高的集成度和在线编程擦除能力，在消费类电子，通信技术等许多领域都得到广泛的应用。但是，随着市场对存储密度和容量要求越来越高，传统工艺的lb...
- 周钦
- 关键词：FLASH存储器
- 文献传递
- AP-1对Ox-LDL诱导大鼠肾系膜细胞TGF-β<,1>表达的转录调控及基因治疗研究
- 在该文中,我们拟通过实验观察AP-1是否参与调控Ox-LDL刺激MsC表达TGF-β<,1>的转录过程;了解Ox-LDL激活AP-1可能涉及的信号转导通路.在明瞭AP-1活化的信号转导通路及其与TGF-β<,1>表达关系...
- 周钦
- 关键词：肾系膜细胞转录激活蛋白-1
- 文献传递
- 丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导系膜细胞转化生长因子-β_1表达被引量：13
- 2005年
- 目的 观察丙丁酚对ox- LDL诱导系膜细胞AP -1活性和TGF -β1 表达的作用 ,探讨抗氧化剂治疗脂质肾损伤的分子机制。方法 大鼠系膜细胞随机分为正常细胞组、ox- LDL处理组和ox- LDL +丙丁酚处理组。运用凝胶迁移率实验检测AP-1活性变化 ,Western杂交检测c- Jun、JNK/SAPK磷酸化及TGF- β1 蛋白表达水平的改变。运用Northern杂交检测TGF- β1- mRNA表达。结果 丙丁酚 5 0 μmol/L预处理系膜细胞 2 0h ,显著降低ox LDL诱导系膜细胞AP 1活性。丙丁酚浓度为 5 0、1 0 0、2 0 0 μmol/L时 ,均显著抑制ox- LDL诱导JNK ,/SAPK磷酸化 ;且ox LDL +丙丁酚处理组的c Jun蛋白表达分别为ox- LDL处理组的 6 0 %、5 1 %和 4 6 %。Northern杂交显示 :ox LDL为 1 0 μg/mL时并不激活TGF- β1 mRNA表达 (P >0 .0 5 ) ;而当ox-LDL浓度增至 5 0、1 0 0 μg/mL时 ,TGF -β1 mRNA表达分别增加 1 .8和 1 .9倍。Western杂交显示ox -LDL呈剂量依赖方式增加TGF β1 蛋白质表达。加入丙丁酚后显著降低ox LDL诱导系膜细胞的TGF -β1- mRNA和蛋白质表达 (P <0 .0 5 )。结论 丙丁酚可能通过抑制JNK1 /SAPK磷酸化和AP 活性下调ox- LDL诱导系膜细胞TGF- β1 表达。
- 王远程叶志斌周钦张宗梁吴兆龙
- 关键词：丙丁酚NORTHERN杂交JNK/SAPKAP-1活性抗氧化剂治疗杂交检测
- 肾小球系膜细胞转化生长因子-β_1基因启动子中氧化低密度脂蛋白应答元件的研究被引量：5
- 2002年
- 目的 :了解在氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)刺激下 ,转化生长因子 β1(TGF β1)基因启动子中顺式作用元件的应答情况。研究在大鼠肾系膜细胞中 ,Ox LDL对TGF β1基因启动子转录活性的影响作用。 方法 :用聚合酶链反应 (PCR)、酶切和亚克隆的方法 ,构建出 5个TGF β1启动子缺失体—虫荧光素酶 (luciferase)报告基因 ,利用其瞬时转染系膜细胞并检测luciferase相对活性。 结果 :在Ox LDL(10 0mg/L)刺激下 ,luciferase的活性 12h即出现 ,并于 36h达到平台期。对Ox LDL刺激的应答 ,TGF β1启动子 15 5 0到 845之间可能存在着增强子 , 6 2 9到 4 2 2之间则可能有抑制子。计算机软件分析表明 ,前者内有一转录激活蛋白 1(AP 1)精确识别位点。 结论 :在大鼠肾系膜细胞TGF β1基因启动子中 ,AP 1结合序列 (TGAGTCA)可能是应答Ox LDL的顺式作用元件。Ox LDL上调TGF β1的表达至少部分是通过AP 1蛋白来介导的 ,且Ox LDL可能通过蛋白激酶C(PKC)信号通路激活AP 1从而正调控TGF β1基因的转录过程。
- 周钦王远程兰洋赵昀陆长德吴兆龙
- 关键词：肾小球系膜细胞氧化低密度脂蛋白转化生长因子-Β1
- AP-1在转录水平调控氧化低密度脂蛋白诱导的转化生长因子-β_1表达(摘要)
- 2003年
- 目的 了解转录激活蛋白-1(AP-1)是否参与调控氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导转化生长因子-β1(TGF-β1)基因的表达，探讨Ox-LDL激活AP-1可能的信号转导途径。方法 首先利用SD大鼠TGF-β1启动子缺失体-荧光素酶(1uciferase)报告基因瞬时转染系细胞并检测虫荧光素酶相对活性，找出可能的应答区域；然后对AP-1结合位点进行突变并加入c-Jun／AP-1抑制剂，比较启动子活性的变化情况。利用Western印迹检测Ox-LDL对系膜细胞p38有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)总蛋白和磷酸化水平的影响。最后，用凝胶阻滞法(EMSA)观察在特异性蛋白激酶抑制剂处理下的AP-1活性的变化。结果对Ox-LDL刺激应答，TGF-β1启动子-1550到-845之间是一个正调控区域，-629到-422之间则是一个负调控区。AP-1结合位点突变和c-Jun／AP-1抑制剂均导致TGF-β1启动子活性显著降低。在Ox-LDL刺激下p38 mPAK表现出的不是量的变化，而是其磷酸化水平的增加。PKC抑制剂明显地抑制了Ox-LDL诱导的AP-1活性；与之相反，p38 MPAK抑制剂则对AP-1活性无显著影响。结论 在大鼠肾系膜细胞，AP-1在转录水平参与调控Ox-LDL诱导TGF-β1表达的过程，且Ox-LDL可能部分是通过PKC信号转导途径激活AP-1中的c-Jun蛋白，再由c-Jun／AP-1从转录水平上调TGF-β1的表达。
- 周钦
- 关键词：AP-1OX-LDLC-JUN氧化低密度脂蛋白转录水平
- TGF-β在糖尿病肾病信号传导中的作用被引量：1
- 2003年
- 周钦吴兆龙
- 关键词：信号传导细胞因子
