何南
- 作品数：4 被引量：49H指数：4
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 苹果酸脱氢酶的克隆、表达与生物活性的研究被引量：5
- 2003年
- 根据大肠杆菌DNA中苹果酸脱氢酶的序列合成上下游引物 ,以大肠杆菌E .coliDH5α基因组为模板通过PCR扩增得到苹果酸脱氢酶的基因 ,将该基因与表达载体pET2 8a连接构建重组子 ,将该重组子转化入大肠杆菌E .coliBL2 1构建工程菌 ,通过IPTG诱导表达苹果酸脱氢酶 ,并初步测定了该菌株拆分DL 苹果酸的能力。
- 杨柳青李萍何南袁伟春张玉彬
- 关键词：苹果酸脱氢酶克隆生物活性
- 手性药物的生物转化被引量：25
- 2000年
- 由于手性药物消旋体中不同光学异构体的药理作用不同 ,为提高药效 ,减少不良反应 ,必须对其进行拆分或直接合成单旋体。本文综述了脂肪酶、酯酶、转氨酶等在手性药物生产中的应用 。
- 杨柳青何南张玉彬
- 关键词：手性药物生物转化
- 新型降钙素基因工程菌高表达发酵条件的研究被引量：7
- 2000年
- 对新型降钙素基因工程菌 n CT/p GEX-2 T/E.coli BL2 1高表达发酵条件进行了优化研究。研究表明重组工程菌遗传性状稳定 ,采用 LB培养基、1 %接种量 ,当菌体浓度到达 A6 0 0 nm 0 .6时 ,添加诱导剂 IPTG至终浓度为 0 .l mmol/L,37℃培养 4 h,可使含新型降钙素的融合蛋白高效表达 ,融合蛋白占菌体总蛋白的 35%。2 0 L发酵罐中采用上述条件发酵培养 ,融合蛋白亦可高效表达 ( 32 % ) ,其菌体密度是摇瓶培养发酵的两倍。Western-blotting试验表明融合蛋白中含有新型降钙素 。
- 张玉彬王旻吴梧桐陈建华何南张兆林郭长缨
- 关键词：基因工程菌发酵条件
- 新型降钙素的制备及活性测定被引量：13
- 2000年
- 新型降钙素 (一种人降钙素类似物 )基因工程菌nCT/ pGEX 2T/E .coliBL2 1经 2 0L规模发酵 ,离心收集细胞 ,反复冻融裂解细胞 ,裂解液经G Sepharose 4B亲和层析纯化得到融合蛋白。融合蛋白进行磺酸化和溴化氰裂解后 ,用S Sepharose纯化得到新型降钙素前体 ,其纯度为 97 6 %。选用羧肽酶Y(CPY)将其前体转化为C 末端酰胺化的新型降钙素 ,转化率为 34 %。转化液经HPLC分离纯化得到新型降钙素。大鼠体内降血钙试验表明新型降钙素具有显著降血钙活性。
- 张玉彬吴梧桐王旻吴滔何南郭长缨
- 关键词：工程菌发酵纯化活性
