- 间充质干细胞对原发免疫性血小板减少症患者T细胞分泌细胞因子及调节性T细胞水平影响的体外研究被引量：5
- 2013年
- 目的体外观察骨髓间充质干细胞（MSC）对原发免疫性血小板减少症（ITP）患者CD4＋CD25＋T细胞比例以及T细胞分泌IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10功能的影响。方法采用Ficoll分离骨髓单个核细胞，体外培养扩增MSC；采用Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取正常人及ITP患者外周血T细胞，应用流式细胞术（FCM）检测T细胞中CD4＋CD25＋T细胞比例；MSC经丝裂霉素（MMC）处理后分别以1×10^4、5×10^4、2×10^5／孔接种于培养板，然后分别接种体外分离纯化的异体ITP患者及正常人T细胞，共培养5d后用FCM检测CD4＋CD25＋T细胞比例，用ELISA法测定培养上清中IL-2、IFN—γ、IL-4、IL-10含量。结果2×10＋／孔MSC与ITP患者T细胞共培养5d后，CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋／CD4＋细胞均高于未加MSC的ITP患者T细胞[（4．56±0．70）％对（2．24±0．81）％，（9．91±1．18）％对（4．08±1．17）％]，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与未加MSC的ITP患者T细胞组比较，培养上清中IL-2、IFN-γ浓度减低l（97．21±12．07）pg／ml对（280．47＋17．33）pg／ml，（72．75±7．81）pg／ml对（129．33＋16．34）pg／ml]，IL-4、IL-10浓度升高[（37．98±4．05）pg／ml对（16．34±2．60）pg／ml，（113．77＋5．68）pg／ml对（54．78±5．62）pg／m1]。结论MSC在体外可抑制ITP患者Thl细胞分泌IL-2、IFN-γ，促进Th2细胞分泌IL．4、IL-10，上调CD4＋CD25＋T细胞比例，进而诱导ITP患者免疫耐受形成。
- 赵霞丁慧芳郭成山路希敬徐敏邢健韩芳王椋鲁光刘国强
- 关键词：间质干细胞血小板减少调节性白细胞介素类干扰素Γ
- 支气管哮喘患儿血清25-一羟基维生素D3水平变化及其与血清IgE和FeNO的相关性被引量：13
- 2018年
- 【目的】探讨支气管哮喘患儿血清25-羟基维生素D3[25（0H）D3]水平变化及其与血清免疫球蛋白E（IgE）和呼出气一氧化氮（FeN0）的相关性。【方法】选取支气管哮喘患儿108例，按随机数表法分为观察组和对照组，每组54例。另外选取同期儿保健康体检儿童50例（健康组）。对照组惠儿给予常规治疗，观察组患儿在常规治疗基础上给予维生素D治疗3个月，比较两组疗效。同时比较受试者血清25（OH）D。水平、总IgE水平、Fe—NO3并分析血清25（OH）D。水平与血清总IgE和FeNO相关性。【结果】观察组治疗总有效率为90．74％（49／54），高于对照组的75．930（41／54），其差异有统计学意义（P〈0．05）；观察组、对照组患儿血清25（OH）D3水平显著低于健康组（P〈0．05），血清总IgE水平、FeNO均显著高于健康组（P〈0．05）。Pearson相关分析显示：血清25（OH）D。水平与IgE和FeN0呈负相关（r=-O．825，P=0．001；r=-0．876，P=0．001）。【结论】补充维生素D辅助治疗可改善小儿支气管哮喘疗效；患儿血清25（OH）D3水平与气道高反应性和机体变应反应指标（血清总IgE和FeNO）呈负相关。
- 魏杰男刘兰韩芳
- 多发性骨髓瘤化疗前后Treg细胞变化及其与化疗疗效肿瘤负荷关系研究被引量：4
- 2014年
- 目的分析硼替佐米为主联合化疗治疗多发性骨髓瘤(MM)患者前后Treg细胞变化及其与化疗疗效、肿瘤负荷的关系。方法分别采用流式细胞术、CCK-8法检测2010年1月至2013年1月胜利油田中心医院21例初治、16例复治MM患者接受硼替佐米为主联合化疗前后外周血中Treg细胞比例及活性,分析Treg细胞变化与疗效、血清β2-微球蛋白(β2-MG)浓度变化的关系。结果与健康志愿者相比,化疗前MM患者Treg细胞比例明显升高。经硼替佐米为主联合化疗后,初治组化疗有效MM患者的Treg细胞比例由(8.69±1.39)%下降为(6.07±1.21)%(P<0.05);复治组化疗有效MM患者的Treg细胞比例由(9.35±1.32)%下降为(7.33±1.06)%(P<0.05)。与化疗前相比,两组化疗有效的MM患者Treg细胞的免疫抑制功能活性明显降低(P<0.05);但两组化疗无效MM患者Treg细胞比例及免疫抑制功能活性与化疗前差异无统计学意义。进一步分析发现硼替佐米为主联合化疗后外周血中Treg细胞比例下降与血清β2-MG浓度下降呈线性相关。结论硼替佐米为主联合化疗治疗初治及复治性MM的疗效确切,Treg细胞可作为反映硼替佐米为主联合化疗疗效、肿瘤负荷的指标。
- 邢健鲁光刘国强徐敏路希敬赵霞韩芳王椋尚应辉丁慧芳
- 关键词：多发性骨髓瘤
- 冻存自体血小板治疗急性白血病化疗后血小板减少症的临床观察被引量：1
- 2011年
- 目的探讨冻存自体血小板治疗急性白血病(AL)化疗后血小板减少症的临床疗效。方法选择40例AL化疗完全缓解(CR)后血小板减少症患者,随机分为两组各20例。观察组于化疗间歇期采集自体血小板并低温保存;化疗后血小板计数≤15×109/L时将血小板解冻后输注,并检测其血小板CD42b、CD62p,计算输注后1 h、24 h血小板校正增加值(CCI)。对照组输注正常献血者的冻存血小板。结果两组血小板CD42b、CD62p表达率及输注后1 h、24 h CCI比较,P均>0.05;观察组有效率(85%)明显高于对照组(55%),其输血反应率(15%)明显低于对照组(45%)(P均<0.05)。结论 AL患者CR后深低温冻存自体血小板的功能与正常人的冻存自体血小板无统计学差异,但其止血效果优于后者,且输血不良反应少。
- 刘国强丁慧芳路希敬徐敏邢健赵霞韩芳
- 关键词：血小板膜糖蛋白CD62P
- 输注间充质干细胞治疗小鼠原发性免疫性血小板减少症的疗效观察及机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨输注间充质干细胞（MSC）对小鼠原发性免疫性血小板减少症（ITP）的治疗效果及其机制。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体的方法诱导建立雌性BAI，B／c小鼠ITP模型，取建模成功小鼠20只作为实验组，经尾静脉注射雄性BALB／c小鼠的MSC2×10’／个；另取20只建模成功小鼠作为对照组，不注射MSC。注射MSC14d后，取两组小鼠外周血，测定血小板数，应用流式细胞术检测外周血髓系树突细胞（mDC，Lin—HLA-DR’CDllc’细胞）绝对数及其表面共刺激分子CD80和CD86的表达水平，用酶联免疫吸附试验测定Tn1细胞因子7干扰素（INF-7）、白细胞介素2（IL-2）及Tn2细胞因子IL-4、IL-10的水平。结果注射MSC14d后，实验组小鼠血小板数量为（623±78．9）X10’／L，明显高于对照组的（288±87．8）×10^9／i．（P〉0．05）。实验组mDC绝对数量为（16．24±9．97）／ml，明显低于对照组的（29．32±13．21）／ml（P〈0．05）；实验组mEK；表面的CDS0和0986的表达分别为（2．31±1．26）％和（46．25±20．21）％，明显低于对照组的（6．27±3．31）％和（62．21±16．41）％（P〈0．05）。实验组外周血INF7和IL-2水平分别为（3．1±1．7）和（3．2±2．1）pg／ml，明显低于对照组的（10．3±4．8）和（16．3±5．7）pg／ml（P〈0．05）；IL-4和IL-10水平分别为（88．6±15．2）和（38．3±11．8）pg／ml，明显高于对照组的（32．7±5．7）和（22．1±3．4）pg／ml（P〈0．05）。结论MS（2可以有效治疗小鼠ITP，其机制与MSC抑制小鼠IX；活化导致T。1细胞的极化有关。
- 徐敏路希敬丁慧芳刘国强鲁光邢健赵霞韩芳王椋尚应辉
- 关键词：小鼠间质干细胞免疫性血小板减少症TH1细胞树突细胞
- 间充质干细胞治疗提升免疫性血小板减少症小鼠的血小板数并影响其外周血单核细胞中 T-bet 和 GATA-3基因表达被引量：3
- 2013年
- 目的：探讨间充质干细胞（ MSC）对原发免疫性血小板减少症（ ITP）小鼠血小板数目的影响及其机制。方法采用腹腔注射大鼠抗小鼠CD41抗体（ MWReg30单抗）的方法诱导BALB/c小鼠产生ITP后，取20只作为实验组，20只作为对照组。之后通过鼠尾静脉给实验组小鼠注射MSC 2×107个/只。注射后5 d、7 d、14 d，测定实验组与对照组小鼠外周血血小板数；14 d时应用逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR）检测小鼠外周血单个核细胞（ PBMC）中转录因子T-bet和GATA-3 mRNA的表达；应用酶联免疫法测定Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2及Th2类细胞因子IL-4、IL-10的水平。结果7 d、14 d后，注射MSC实验组小鼠血小板值[（588．0±81．6）×109/L、（623．0±78．9）×109/L]明显高于未注射MSC对照组[（317．0±90．1）×109/L、（288．0±87．8）×109/L]（P＜0．05）；14 d时，实验组PBMC中T-bet mRNA表达水平低于对照组[（0．04±0．03） vs （0．27±0．05）]（P＜0．05）；GATA-3 mRNA的表达水平高于对照组[（0．14±0．04） vs （0．07±0．05）]（P＜0．05）；实验组Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2水平[（3．1±1．7） pg/ml、（3．2±2．1） pg/ml]明显低于对照组[（10．3±4．8） pg/ml、（16．3±5．7） pg/ml]（P＜0．05）；实验组外周血 Th2类细胞因子 IL-4、IL-10水平[（88．6±15．2） pg/ml、（38．3±11．8） pg/ml]明显高于对照组[（32．7±5．7） pg/ml、（22．1±3．4） pg/ml]（P＜0．05）。结论 MSC可以有效提升ITP小鼠的血小板数，机制可能与抑制了T-bet和GATA-3的表达失常导致的Th1细胞极化有关。
- 徐敏王椋刘国强鲁光丁慧芳邢健赵霞韩芳尚应辉
- 关键词：免疫性血小板减少症小鼠转录因子T-BET转录因子GATA-3
- 人脂肪间充质干细胞对再生障碍性贫血T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：3
- 2014年
- 目的研究人脂肪间充质干细胞(haMSCs)对再生障碍性贫血(AA)T淋巴细胞(TLCs)的作用,初步探讨其治疗AA的机制。方法从人脂肪中提取并培养haMSCs;从AA患者外周血中分离T淋巴细胞(AA-TLCs);将两者共培养后,MTT法检测细胞增殖;real-time RCR和Western blot测定T-bet和GATA-3的表达,ELISA法检测上清IL-2、IL-4、IL-10和INF-γ的水平。结果 HaMSC呈时间依赖性的抑制AA-TLCs的增殖,AA-TLCs与haMSCs共培养3、5和7 d后的抑制率分别为34.94%±10.11%、53.44%±6.16%和68.13%±15.24%(P<0.05);haMSC能够下调AA-TLCs转录因子T-bet的表达,同时上调GATA-3的表达(P<0.05);haMSCs能够升高Th2类细胞因子IL-4、IL-10的水平,降低Th1类细胞因子INF-γ、IL-2的水平。[MSCs+AA-TLCs组:IL-4(88.6±15.2)ng/L、INF-γ(8.7±2.7)ng/L;AA-TLCs组:IL-4(1.4±0.6)ng/L、INF-γ(41.5±3.7)ng/L(P<0.05)]。结论 HaMSCs在体外对AA患者TLCs具有免疫调节作用,其机制可能是通过调节转录因子T-bet和GATA-3的表达从而抑制Th细胞向Th1细胞方向分化。
- 王椋刘国强徐敏邢健赵霞韩芳丁慧芳
- 关键词：间充质干细胞再生障碍性贫血免疫调节T-BETGATA-3
- 急性白血病化疗后输注冻存自体血小板20例临床观察被引量：2
- 2012年
- 血小板减少症是急性白血病（AL）化疗后常见、严重的并发症，可危及患者生命，通常需即时输注异体血小板治疗，但存在输血反应、输血相关性移植物抗宿主病（TA—GVHD）、输血传播性疾病、输注无效等副反应。本研究应用深低温冻存自体血小板输注治疗AL化疗后血小板减少症，并检测其功能，观察临床效果，报道如下。
- 刘国强丁慧芳路希敬徐敏邢健赵霞韩芳
- 关键词：急性白血病血小板膜糖蛋白CD62P
- ADAMTS13在血栓前疾病状态中的水平及其相关因素分析被引量：3
- 2016年
- 目的:检测血栓前状态病例血浆中血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)的活性水平并探讨其临床意义,同时分析ADAMTS13与血管性血友病因子(v WF)、凝血酶敏感蛋白1(TSP1)、C-反应蛋白(CRP)、肌酐等生化指标和血压等因素是否存在一定的相关性。方法:用残余胶原结合试验(R-CBA)检测病例组(急性早幼粒细胞白血病、恶性肿瘤、败血症等患者共260例)及50例正常对照组血浆中ADAMTS13的活性,ELISA试剂盒检测两组血浆中TSP1和v WF蛋白水平,同时对病例组血浆CRP、肌酐等生化指标和血压水平等与ADAMTS13活性关系进行相关性分析。结果:病例组血浆中ADAMTS13活性均显著低于正常对照组(P<0.05),TSP1及v WF蛋白水平均高于对照组(P<0.05);相关性分析发现,ADAMTS13活性与TSP1、肌酐、血糖、血压、D-二聚体及CRP呈负相关(r=-0.25至r=-0.54,P<0.05),与血脂、血型、血小板数目、血红蛋白无明显相关性(P>0.05)。结论:血栓前状态病例血浆中ADMATS13活性降低,提示ADAMTS13的减少与血栓前状态疾病的发病相关。检测血浆中ADAMTS13的活性有助于对血栓前疾病的诊断。
- 孙彩凤刘国强赵霞韩芳徐敏邢健刘娟
- 关键词：血栓前状态血管性血友病因子裂解蛋白酶血管性血友病因子
- 25二羟D3和基质金属蛋白酶9在哮喘患儿中的表达及临床意义被引量：5
- 2019年
- 目的探讨25二羟维生素D3[25-(OH)_2D_3]和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在哮喘患儿中的表达及临床意义。方法回顾性选择2016年5月至2018年5月东营市胜利油田中心医院儿科收治的58例哮喘患儿作为研究对象,根据病情严重程度将其分为轻度组(n=15)与中重度组(n=43),并选择同期健康体检患儿41例作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组患儿血清25-(OH)_2D_3、MMP-9水平及支气管肺泡灌洗液(BALF)的MMP-9水平。根据血清25-(OH)_2D_3水平将58例哮喘患儿分为维生素D(VD)缺乏组(n=36)、VD不足组(n=13)、VD正常组(n=9),比较三组患儿血清、BALF的MMP-9水平,并采用Pearson相关性来分析哮喘患儿血清25-(OH)_2D_3水平与血清MMP-9水平、BALF的MMP-9水平的相关性。结果研究组患儿血清25-(OH)_2D_3水平明显低于对照组,血清、BALF的MMP-9水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。中重度组患儿血清25-(OH)_2D_3水平明显低于轻度组,血清、BALF的MMP-9水平明显高于轻度组,差异有统计学意义(P <0. 05); VD正常组患儿血清、BALF的MMP-9水平明显低于VD不足组及VD缺乏组(P <0. 05); VD不足组患儿血清、BALF的MMP-9水平明显低于VD缺乏组(P <0. 05);哮喘患儿血清25-(OH)_2D_3水平与血清MMP-9水平呈负相关(P <0. 05),与BALF的MMP-9水平呈负相关(P <0. 05)。结论哮喘儿童血清25-(OH)_2D_3处于低水平状态,血清及BALF的MMP-9水平处于高水平状态,对哮喘临床诊断及病情程度预测有一定指导意义。
- 魏杰男韩芳张志军刘兰
- 关键词：儿童哮喘基质金属蛋白酶9
