韩芳
- 作品数:21 被引量:30H指数:4
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- C57BL/6J小鼠耳蜗血管纹Na-K-2Cl联合转运子-1的年龄相关性变化被引量:7
- 2006年
- 目的观察不同周龄C57BL/6J(C57)小鼠听力及血管纹Na-K-2Cl联合转运子-1(Na-K-2Cl co-transporter-1,NKCC1)表达的情况。方法应用听性脑干反应(auditory brainstemresponse,ABR)分别检测4、8、16、32、48、64周龄组C57小鼠的听力;采用免疫组织化学染色法观察其血管纹NKCC1表达的变化。结果C57小鼠随年龄增大出现听力下降,自16周龄时ABR阈值出现显著性增高(P<0.05);血管纹NKCC1表达也出现年龄相关性减少,其灰度值自16周龄时显著增高(P<0.01)。结论C57小鼠血管纹NKCC1蛋白表达随年龄增长而减少,可能与年龄相关性听力损失具有一定相关性。
- 熊浩褚汉启韩芳吴振恭黄孝文张平崔永华
- 关键词:听性脑干反应年龄相关性听力损失
- 编码Na-K-2Cl的基因缺陷小鼠出现听觉和平衡功能障碍及内耳形态异常被引量:1
- 2007年
- 目的:培育突变型纯合子NKCC1-/-、杂合子NKCC1+/-及野生型NKCC1+/+小鼠,将这3种基因型小鼠作为实验平台,研究NKCC1离子通道(Na-K-2Cl,co-transporter)在耳蜗听觉平衡功能中的作用,并观察不同基因型小鼠的内耳形态特征。方法:利用同窝生各个基因型小鼠NKCC1-/-(突变纯合子)、NKCC1+/-(杂合子)和NKCC1+/+(野生型)为实验对象,采用听觉脑干反应(ABR)和耳蜗内电位(EP)检测技术,对各基因型小鼠的听觉功能和EP进行检测;同时利用光学显微镜观察不同基因型小鼠的内耳形态变化。结果:NKCC1+/+野生型小鼠听力正常,ABR检测的click短音阈值为[(23.13±3.78)dB,SPL];EP为(98±16)mV。NKCC1+/-杂合子小鼠听力低于同窝生的NKCC1+/+野生型小鼠,ABR检测其Click短音阈值为[(38.49±12.29)dB,SPL],EP为(78±7)mV。NKCC1+/+和NKCC1+/-小鼠ABR的阈值均值在各个频率的差异显著(P<0.01);两者EP的均值差异也显著(P<0.05)。NKCC1-/-突变型纯合子小鼠呈现全聋,ABR各个频率在100dB均无反应,其EP接近消失(4mV±6mV)。NKCC1-/-突变型纯合子小鼠表现出听觉功能丧失和旋转为主的平衡失调。光镜下NKCC1+/+野生型小鼠和NKCC1+/-杂合子小鼠的耳蜗解剖结构无明显异常;NKCC1-/-突变纯合子小鼠的耳蜗出现前庭膜塌陷、内淋巴腔缩小而致中阶完全消失,并有血管纹萎缩、Corti器缺失、螺旋神经节萎缩;且球囊和椭圆囊膜迷路失去正常结构并出现塌陷等病理改变。结论:NKCC1离子通道在内耳K+循环和维系内耳正常听觉平衡功能中起重要作用。NKCC1通道的缺失或功能受限,均可导致耳蜗内淋巴K+负荷水平,进而影响耳蜗的听觉平衡功能。
- 褚汉启熊浩韩芳吴振恭黄孝文崔永华
- 关键词:NKCC1基因敲除耳蜗耳蜗内电位
- 半拷贝基因NKCC1杂合小鼠与年龄相关性听力下降的关系被引量:4
- 2006年
- 目的培育杂合子NKCCl+/-和野生型NKCCl+/+小鼠,观察携带不同拷贝基因的NKCCl小鼠的年龄相关性听力表现,研究NKCCl基因及其离子通道在年龄相关性听力下降(age- related hearing loss,AHL)中的作用,并初步探讨其可能发生的机制。方法运用NKCCl+/-杂合子小鼠和NKCCl+/+野生型小鼠为平台,于小鼠生长过程中的各个年龄段分别检测小鼠的听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)和耳蜗内电位(endocochlear potential,EP);同时采用扫描电镜进行耳蜗形态学观察和免疫印迹杂交检测不同鼠龄小鼠耳蜗的NKCCl通道蛋白的含量。结果NKCCl+/-杂合子小鼠与NKCCl+/+野生型小鼠相比较,其ABR检测短声阈值在每一年龄组的各测试频率均升高,各年龄组相比较差异有统计学意义(P值均<0.05)。NKCCl+/-杂合子半拷贝基因鼠的听力随年龄增长而逐渐下降,与低龄鼠相比,老龄鼠的ABR阈值显著性升高(P值均< 0.05)。NKCCl+/-小鼠的EP也随年龄增长而呈下降趋势,老龄小鼠的EP值与其低龄鼠相比明显降低(P<0.05)。老龄小鼠的耳蜗NKCCl蛋白含量低于低龄鼠。与老龄NKCCl+/+鼠相比较,老龄NKCCI+/-鼠的耳蜗底回外毛细胞出现散在的点状缺失。结论当NKCCl基因呈现半拷贝复制时小鼠可呈现AHL,NKCCl基因可能在AHL的发病中起一定的作用。AHL的发病可能与NKCCl通道蛋白的遗传特性及功能有关,还可能与NKCCl+/-鼠出现的耳蜗底回外毛细胞缺失有关。
- 褚汉启熊浩韩芳吴振恭黄孝文崔永华
- 关键词:离子通道年龄因素膜蛋白质类
- 小鼠耳蜗侧壁α_2 Na,K-ATPase在听觉及年龄相关性听力下降中的作用被引量:2
- 2006年
- 目的探讨耳蜗侧壁α2Na,K-ATPase通道在听觉功能和年龄相关性听力减退中的作用。方法利用半拷贝基因的α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠作为试验平台,采用听性脑干反应(ABR)和耳蜗内电位(endoco-chlear potential,EP)检测方法,对α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠和α2Na,K-ATPase+/+野生型小鼠进行ABR和EP检测,并对各个鼠龄段的小鼠进行ABR检测。结果α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠的听力和EP值均低于α2Na,K-ATPase+/+野生型鼠;α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠的听力随鼠龄增长而逐渐下降,高龄期小鼠的ABR阈值与其低龄时相比显著性升高(P<0.05)。结论耳蜗侧壁的α2Na,K-ATPase通道对听觉功能具有重要作用;携带半拷贝基因的αNa,K-ATPase+/-杂合子小鼠表现出轻度年龄相关性听力减退。
- 褚汉启黄孝文熊浩韩芳吴振恭周良强崔永华
- 关键词:耳蜗离子通道老年性聋
- 增殖诱导配体mRNA在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达
- 2007年
- 目的检测增殖诱导配体(APRIL)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)的表达水平,探讨APRIL在SLE发病中的意义。方法采用半定量RT-PCR法检测36例SLE患者及17例正常人PBMC的APRIL mRNA表达,并与SLE疾病活动指数(SLEDAI)进行相关性分析。结果SLE患者活动期组和非活动期组APRIL mRNA表达水平均明显高于正常对照组(P<0.05或P<0.01),活动期组较非活动期组增高更明显(P<0.01);SLE患者APRIL mRNA表达水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.6725,P<0.01)。结论SLE患者APRIL mRNA表达水平的增高,可能在SLE的发病机制中具有重要作用。
- 胡绍先熊金河毛静吴记平肖文泽孔芳柯丹韩芳
- 关键词:红斑狼疮增殖诱导配体外周血单个核细胞
- 系统性红斑狼疮患者热休克蛋白90和白细胞介素18的表达及意义
- 2007年
- 目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者热休克蛋白90(HSP90)和血浆白细胞介素18(IL-18)的表达水平及与疾病活动的关系。方法:运用Westernblot技术检测SLE患者外周血单个核细胞HSP90的表达,ELISA方法检测血浆中的IL-18水平,并与SLE疾病活动指数(SLEDAI)进行相关性分析。结果:⑴SLE患者HSP90的表达水平在活动期组(0.82±0.10)和稳定期组(0.54±0.09)与正常对照组(0.37±0.11)比较均具有显著性差异(分别P<0.01),且活动期组较稳定期组增高更明显(P<0.01);⑵SLE患者血浆IL-18水平在稳定期组(327.82±101.45pg/ml)和活动期组(459.79±134.08pg/ml)均显著高于正常对照组(252.32±76.45pg/ml)(分别为P<0.05,P<0.01);⑶SLE患者的HSP90和IL-18水平与SLEDAI评分之间呈正相关(分别为r=0.80,P<0.01;r=0.49,P<0.01)。结论:SLE患者外周血单个核细胞HSP90和血浆IL-18水平均显著增高,并且与SLE的病情活动密切相关,可能在SLE的发病机制中发挥重要作用。
- 胡绍先徐卿涂巍沈桂芬杨柳韩芳王晓璐
- 关键词:系统性红斑狼疮热休克蛋白90白细胞介素18
- 系统性红斑狼疮患者程序性死亡配体-1表达的初步研究
- 2007年
- 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达水平,探讨其在系统性红斑狼疮发病过程中的作用。方法密度梯度离心法分离系统性红斑狼疮患者和正常人PBMC,采用半定量RT-PCR检测PBMC的PD-L1mRNA表达。结果系统性红斑狼疮患者活动期组和稳定期组的PD-L1mRNA表达与对照组比较明显增高,差异有显著性(P均<0.05);但PD-L1mRNA表达在系统性红斑狼疮活动期组与稳定期组之间比较无显著性差异(P>0.05)。结论系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞PD-L1mRNA表达水平增加,程序性死亡配体-1可能在系统性红斑狼疮的发病机制中有一定的作用。
- 胡绍先陈新国熊金河毛静吴记平何培根雷小妹韩芳王晓璐
- 关键词:系统性红斑狼疮外周血单个核细胞程序性死亡配体-1
- 大气压低温等离子体诱导HepG2细胞凋亡的机制研究
- 大气压低温等离子体由于具有高效安全,无毒无副作用的优点在食品灭菌、医疗器械消毒方面有着广泛的应用。近年来,人们把目光越来越多的集中在等离子体技术与生物医学的相结合这个新兴的领域。等离子体医学研究已成为等离子体发展的重要方...
- 韩芳
- 关键词:细胞凋亡活性氧线粒体抗氧化能力
- 文献传递
- 小鼠耳蜗血管纹边缘细胞的原代培养体系的建立
- 第一部分新生小鼠耳蜗血管纹边缘细胞的分离及原代培养
目的:建立稳定的新生小鼠耳蜗血管纹(StriaVascularis,SV)边缘细胞(MarginalCells,MCs)的体外培养体系,为研究边缘细胞的形态和...
- 韩芳
- 关键词:耳蜗血管纹边缘细胞原代培养细胞角蛋白18波形蛋白
- 文献传递
- KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹的表达及在听觉中的意义被引量:3
- 2007年
- 目的探讨KCNQ1在耳蜗侧壁血管纹的表达及其在听觉中的作用。方法以不同基因型小鼠KC-NQ1-/-(突变纯合子)、KCNQ1+/-(杂合子)和KCNQ1+/+(野生型)以及C57BL/6J小鼠为实验对象,采用免疫组织化学和ABR检测技术,检测KCNQ1在小鼠耳蜗血管纹的表达及其听力。结果KCNQ1蛋白阳性颗粒集中在小鼠耳蜗血管纹边缘细胞顶膜。KCNQ1+/+小鼠的听力正常,短声ABR的阈值为36.67±7.13dBSPL;KCNQ1+/-小鼠听力低于同窝KCNQ1+/+野生型鼠,短声ABR的阈值为38.25±9.35dB SPL;KCNQ1-/-小鼠呈现全聋,ABR在100dB SPL时仍无反应。结论KCNQ1是位于耳蜗侧壁血管纹边缘细胞的重要通道蛋白,在维系耳蜗听觉功能中有重要作用。KCNQ1通道蛋白的缺失或功能受限可以不同程度地影响耳蜗的听觉功能。
- 褚汉启熊浩韩芳吴振恭周良强黄孝文崔永华
- 关键词:KCNQ1离子通道耳蜗