陈美芳
- 作品数：49 被引量：197H指数：8
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长沙市科技局科技项目湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 非对称性二甲基精氨酸对高血压患者外周血单核细胞CXCR2表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:检测一氧化氮合酶(NOS)抑制剂非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对原发性高血压(EH)患者外周血单核细胞趋化活性的影响。方法:收集42例EH患者(EH组)和40例门诊健康体检者(对照组)。检测血浆中ADMA和NO水平、血管假性血友病因子(vWF)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度,并观察ADMA对外周血单核细胞IL-8受体CXCR2 mRNA表达的影响。结果:与对照组比较,EH患者血浆中AD-MA和vWF水平升高、NO生成减少(P<0.05),同时血中IL-8和TNF-α水平显著升高(P<0.05)。EH患者分离的外周血单核细胞CXCR2 mRNA表达明显高于对照组,外源性的ADMA 30μmol/L孵育4 h后可进一步上调CXCR2 mRNA的表达(P<0.05)。结论:EH患者血中升高的ADMA可能增加外周血单核细胞的趋化活性,促进动脉粥样硬化的发生。
- 陈美芳李元建杨天伦陈志雄谢秀梅
- 关键词：高血压非对称性二甲基精氨酸单核细胞白细胞介素-8
- STAT3抑制剂Stattic激活ERK通路诱导THP-1细胞IL-8的产生及细胞凋亡被引量：3
- 2019年
- 目的观察信号转导子与转录激活子3(STAT3)抑制剂Stattic对THP-1细胞产生白细胞介素8(IL-8)和细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用(0、1、5、10、15、20)μmol/L Stattic处理THP-1细胞0、1、3、6、12、24h,实时荧光定量PCR检测细胞IL-8、IL-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平,ELISA检测细胞培养上清液IL-8蛋白水平,流式细胞术检测THP-1细胞的凋亡,Western blot法检测细胞STAT3、细胞外信号调节激酶(ERK)的蛋白磷酸化水平;采用(0、1、5、10)μmol/L的ERK通路选择性抑制剂U0126预处理THP-1细胞,反转录PCR检测U0126对Stattic诱导THP-1细胞表达IL-8 mRNA水平的影响。结果(10~20)μmol/LStattic显著上调IL-8在THP-1细胞中的mRNA和蛋白表达,仅(15、20)μmol/LStattic能诱导THP-1细胞凋亡;Stattic处理THP-1细胞1、3、6、12、24 h,均显著上调IL-8的mRNA水平,以3 h时最为明显,在6 h以后呈时间依赖性上调IL-8的蛋白水平并诱导THP-1细胞凋亡;Stattic呈浓度和时间依赖性抑制STAT3磷酸化,时间依赖性地诱导ERK磷酸化,在(1、5、10、15、20)μmol/L时均显著诱导ERK磷酸化。另外,U0126显著抑制Stattic诱导的IL-8 mRNA表达。结论STAT3抑制剂Stattic通过激活ERK信号通路诱导THP-1细胞凋亡和IL-8产生。
- 肖智林陈美芳杨梅陈晓彬
- 关键词：THP-1细胞细胞凋亡
- 氯沙坦通过下调单核细胞趋化因子受体表达抑制ADMA诱导的单核细胞黏附
- 陈美芳李元建杨天伦谢秀梅
- 氯沙坦通过降低ADMA水平诱导血管内皮保护作用被引量：8
- 2007年
- 目的本实验拟观察在培养的人脐静脉内皮细胞,氯沙坦对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的血管内皮活化的保护作用是否与降低非对称二甲基精氨酸（ADMA）水平有关。方法用不同浓度的AngⅡ（10^-9-10^-6mol.L^-1）孵育不同时间（6-48 h）,并加入不同浓度的氯沙坦（1、3、10μmol.L^-1）预处理1 h,检测细胞培养上清液中的ADMA、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子（TNF-α）水平,细胞中蛋白甲基转移酶（PRMT）蛋白表达、二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）和活化蛋白（AP-1）活性。结果AngⅡ呈浓度和时间依赖性增加PRMT的表达,AngⅡ（10^-6mol.L^-1,24 h）显著增加培养液中ADMA、TNF-α水平,减少NO的生成,降低细胞DDAH活性,增加细胞AP-1活性。氯沙坦可拮抗AngⅡ所致的上述效应。结论这些结果提示氯沙坦诱导的血管内皮细胞保护作用可能与降低ADMA水平有关。
- 陈美芳谢秀梅杨天伦李元建
- 关键词：氯沙坦
- 冠心病合并2型糖尿病患者Profilin-1、RAGE的水平及临床意义
- 2013年
- 目的检测冠心病（CAD）及冠心病合并糖尿病（DM）患者血浆中前纤维蛋白l（Profilin．1）、晚期糖基化终产物受体（RAGE）的水平，并进一步探讨其临床意义。方法入选89例研究对象，其中对照组27例，CAD组31例，CAD合并2型糖尿病组31例，空腹采集外周静脉血，采用ELISA法检测血浆Profilin-1、RAGE水平，收集所有研究对象的一般临床资料及常规生物化学指标，根据Gensini积分系统计算冠状动脉狭窄程度。
- 陈美芳杨达峰马丽平杨天伦谢秀梅
- 关键词：冠心病糖尿病GENSINI积分
- 内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:观察内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPCs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMCs)增殖的影响。方法:采用6%羟乙基淀粉沉降红细胞和密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,EGM-2细胞培养基进行培养,诱导单个核细胞贴壁并向EPCs分化;采用荧光显微镜双染色、流式细胞术鉴定EPCs,间接免疫荧光检测VSMCs收缩表型标志物α-SM-actin和calponin的表达;Tr-answell培养板建立早期EPCs和大鼠VSMCs共培养模式,以20%胎牛血清刺激VSMCs增殖,分别共培养6,12,24,48,72h后收集VSMCs,采用BrdU标记法、蛋白定量、流式细胞术分析VSMCsDNA合成能力、细胞总蛋白含量以及细胞周期进程。结果:从脐血单个核细胞成功培养了EPCs。EPCs和大鼠VSMCs共培养12,24,48,72h后,VSMCsDNA合成能力、细胞总蛋白含量均较对照组明显降低(P<0.05),其中以48h最明显;流式细胞术显示,共培养组VSMCs细胞周期中S期细胞所占百分率较对照组显著降低(P<0.05),而细胞周期中G1期细胞所占百分率均相应高于对照组(P<0.05),其中均以48h最明显。结论:早期EPCs能够抑制VSMCs增殖。
- 方立陈美芳余国龙肖智林陈晓彬谢秀梅
- 关键词：内皮祖细胞血管平滑肌细胞增殖细胞周期
- 聚肌胞对人脐血内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及其机制被引量：1
- 2016年
- 目的观察Toll样受体3(TLR3)的配体聚肌胞(Poly I∶C)对人脐血内皮祖细胞(EPC)增殖、凋亡的影响并阐明其具体机制。方法采用不同浓度的聚肌胞持续干预EPC,通过流式细胞术检测聚肌胞对EPC细胞周期时相分布及细胞凋亡的影响。利用CCK-8细胞增殖试验分别检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)对细胞凋亡的影响,以及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶Caspase 8、Caspase 9的抑制剂、IL-1β受体的中和抗体对聚肌胞诱导EPC凋亡的作用。结果与对照组相比,较高浓度的聚肌胞(1、10 g/L)显著减少S期和G2/M期细胞比例,并通过下调细胞周期蛋白A、B1、D1、E的表达阻滞细胞周期于G0/G1期;同时聚肌胞还呈剂量依赖性诱导EPC凋亡。Caspase 8和Caspase 9的抑制剂并不能抑制聚肌胞诱导的细胞凋亡;TNF-α对EPC的凋亡率无影响;IL-1β呈剂量依赖性诱导EPC凋亡;而使用IL-1β受体的中和抗体anti-IL-1R1预先封闭IL-1β的结合位点后,再加入聚肌胞干预,结果发现高浓度的anti-IL-1R1可以部分抑制聚肌胞诱导的细胞凋亡。结论高浓度的聚肌胞通过将细胞周期阻滞于G0/G1期并诱导细胞凋亡从而抑制EPC增殖。聚肌胞活化TLR3后通过上调IL-1β的表达诱导EPC凋亡,而内、外源性细胞凋亡途径及TNF-α均不参与聚肌胞诱导的细胞凋亡。
- 杨梅肖智林陈美芳陈晓彬谢秀梅
- 关键词：聚肌胞内皮祖细胞细胞周期细胞凋亡
- 冠心病合并2型糖尿病患者Profilin-1、RAGE的水平及临床意义
- 目的 检测冠心病(CAD)及冠心病合并糖尿病(DM)患者血浆中前纤维蛋白1(Profilin-1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)的水平,并进一步探讨其临床意义.方法 入选89例研究对象,其中对照组27例,CAD组31...
- 陈美芳杨达峰马丽平杨天伦谢秀梅
- 关键词：冠心病糖尿病GENSINI积分
- 美乐托宁对冠心病患者循环血中内皮祖细胞增殖与凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨抗氧化剂美乐托宁对冠心病患者循环血中内皮祖细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法选择冠状动脉造影确定冠心病患者36例,密度梯度离心法获取冠心病患者外周血单个核细胞,培养7天后,收集贴壁细胞并加入不同浓度美乐托宁(0.5、1.0和2.0 mmol/L)干预6、12、24和48 h。MTT法检测美乐托宁对内皮祖细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测美乐托宁对细胞凋亡率的影响,逆转录-聚台酶链式反应技术检测Bc l-2mRNA表达,W estern b lot检测Bc l-2的蛋白表达。结果美乐托宁呈浓度和时间依赖性改善体外培养的冠心病患者外周血内皮祖细胞的粘附、迁移和增殖能力(P<0.01);美乐托宁抑制体外培养的冠心病患者外周血中内皮祖细胞的凋亡,作用呈浓度和时间依赖性(P<0.01);美乐托宁上调内皮祖细胞内Bc l-2 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论美乐托宁能改善体外培养的冠心病患者外周血内皮祖细胞的粘附、迁移和增殖能力,并通过上调凋亡抑制基因Bc l-2而发挥抑制内皮祖细胞凋亡的作用。
- 李秀丽谢秀梅陈美芳陈晓彬何晋
- 关键词：美乐托宁内皮祖细胞细胞增殖BCL-2
- 氯沙坦通过下调单核细胞趋化蛋白1受体表达抑制单核细胞活化被引量：3
- 2007年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ对单核细胞趋化蛋白1受体CCR2表达的影响及氯沙坦的干预作用。方法人单核细胞株与血管紧张素Ⅱ(10-7mol/L)孵育,加或不加氯沙坦(10-7、10-6和10-5mol/L),检测上清液中单核细胞趋化蛋白1水平、单核和内皮细胞粘附情况以及CCR2mRNA的表达。结果与对照组比较,血管紧张素Ⅱ明显增加单核细胞培养上清液中单核细胞趋化蛋白1水平(26.46±3.58ng/L比10.56±2.34ng/L,P<0.01),增加单核内皮细胞间粘附(596±27比268±16,P<0.01)。血管紧张素Ⅱ刺激细胞后明显上调CCR2mRNA表达,氯沙坦能显著抑制血管紧张素Ⅱ的作用,降低单核细胞趋化蛋白1的水平,减少单核内皮细胞间粘附,下调CCR2 mRNA表达。结论氯沙坦通过下调单核细胞趋化蛋白1受体CCR2基因表达抑制单核细胞活化。
- 陈美芳谢秀梅杨天伦陈志雄李元建
- 关键词：内科学单核细胞逆转录聚合酶链反应氯沙坦单核细胞趋化蛋白1受体
