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胰岛素受体底物1基因沉默对3T3-L1细胞CCAAT增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响被引量：3: 2012年; 目的研究胰岛素受体底物1(IRS-1)沉默对3T3-L1前脂肪细胞分化关键分子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA及蛋白表达的影响,并观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞能力的改变,探讨胰岛素受体底物(IRSs)是否作为C/EBPα、PPARγ的上游调节信号在前脂肪细胞分化中起到重要的调节作用。方法合成4条IRS-1 shRNA,Western blotting筛选出沉默效率最高的1条。3T3-L1前脂肪细胞分为IRS-1沉默组和对照组。IRS-1沉默组细胞用沉默效率最高的IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞,沉默细胞中的IRS-1分子;对照组采用无意义IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞。转染24 h后诱导其分化成熟,分化72 h后检测促进前脂肪细胞分化的关键分子C/EBPα、PPARγ的表达。继续诱导分化至第7天,油红O染色观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的比例,检测其分化能力的改变。结果与对照组相比,IRS-1沉默组在诱导分化72 h后,Real-time PCR结果显示3T3-L1前脂肪细胞中C/EBPαmRNA、PPARγmRNA表达明显下降(Pa<0.05),Western blotting结果显示C/EBPα、PPARγ蛋白水平也同样显著下降(Pa<0.05);细胞继续分化至第7天,油红O染色显示,IRS-1沉默组前脂肪细胞分化成熟的比例与对照组比较显著降低。结论胰岛素可能通过IRS-1刺激C/EBPα、PPARγ的表达促进前脂肪组织的分化。; 郑锐丹廖丽红王成斌高金枝应艳琴宁琴罗小平; 关键词：胰岛素受体底物1 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 3T3-L1前脂肪细胞

生长追赶及宫内生长迟缓对大鼠脂肪细胞增殖分化及功能的影响: 2012年; 目的探讨宫内生长迟缓(IUGR)生长追赶对大鼠脂肪细胞增殖分化及功能的影响。方法母鼠孕期饥饿法建立IUGR模型,仔鼠出生后减少每窝仔鼠数以实现生长追赶;大鼠4周时取肾周白色脂肪组织进行前脂肪细胞和成熟脂肪细胞培养并诱导分化。测定前脂肪细胞增殖能力,成熟脂肪细胞脂联素分泌水平、葡萄糖摄取率,以及各前脂肪细胞及成熟脂肪细胞的二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、胰岛素受体底物1和2(IRS1、IRS2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)mRNA表达水平。结果 IUGR大鼠前脂肪细胞的后期增殖能力高于对照组(P<0.05);IUGR大鼠成熟脂肪细胞的脂联素分泌水平低于对照组(P<0.01),葡萄糖摄取率无变化(P>0.05)。IUGR大鼠前脂肪细胞,成熟细胞的DGAT、LPL mRNA表达水平高于对照组(P<0.01),IRS1、IRS2 mRNA表达水平均低于对照组(P<0.05),PI3K mRNA表达水平无变化(P>0.05)。结论 IUGR可能在大鼠胎儿期即引起脂肪组织多基因改变,影响前脂肪细胞的增殖分化,改变成熟脂肪细胞的糖脂代谢功能,进而造成生后生长追赶者胰岛素抵抗的易感性。; 高金枝郑睿丹王成斌应艳琴罗小平; 关键词：宫内生长迟缓前脂肪细胞成熟脂肪细胞胰岛素抵抗

一种儿科消化内科用灌洗装置: 本实用新型涉及医疗器械技术领域，具体涉及一种儿科消化内科用灌洗装置；灌洗机构的输入端与储液箱管道连接，灌洗机构的输出端设置有灌洗头，座椅的顶部还设置有插入槽，灌洗头与插入槽相对应，伺服电机的输出端设置有丝杆，丝杆上设置有...; 王成斌陈高艳唐菱若; 文献传递

胰岛素受体底物在生长追赶宫内发育迟缓新生大鼠脂肪细胞中的表达被引量：6: 2014年; 目的研究胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2在生长追赶宫内发育迟缓新生大鼠脂肪细胞中的时序性表达及其与胰岛素抵抗的关联。方法通过母鼠孕期全程饲料限制建立宫内发育迟缓模型,相对增加哺乳期子鼠营养摄入实现生长追赶。于4周龄时心脏采血测定空腹血糖、胰岛素和三酰甘油,计算胰岛素抵抗指数。测定1、3、5、7周龄SD大鼠的成熟脂肪细胞及前脂肪细胞分化的成熟脂肪细胞的IRS-1和IRS-2 m RNA以及蛋白水平的变化。结果生长追赶的宫内发育迟缓新生大鼠原代培养的成熟脂肪细胞IRS-1和IRS-2 m RNA表达分别于生后第5周和第7周显著下调,差异有统计学意义(P<0.05);前脂肪细胞分化的成熟脂肪细胞IRS-1和IRS-2 m RNA表达均于生后第5周显著下调,差异有统计学意义(P<0.05);两种成熟脂肪细胞IRS-1和IRS-2蛋白水平均于生后第1周开始显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生长追赶的宫内发育迟缓新生大鼠脂肪细胞IRS-1和IRS-2的基因表达发生相对下调,可能与其生后远期的胰岛素抵抗密切相关。; 王成斌郑锐丹高金枝廖立红叶娟应艳琴宁琴罗小平; 关键词：胰岛素受体底物宫内发育迟缓胰岛素抵抗

PI3K抑制剂LY294002对鼠前脂肪细胞分化和C/EBPα及PPARγ表达的影响被引量：5: 2011年; 目的研究磷脂酰肌醇激酶(PI3K)抑制剂LY294002对小鼠前脂肪细胞分化和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨胰岛素受体底物(IRSs)/PI3K信号通路在前脂肪细胞分化中的作用。方法小鼠3T3-L1细胞分为实验组和对照组,实验组加入LY294002(25μmol/L),对照组加入同体积DMSO。应用0.5 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、10-6mol/L地塞米松和5μg/mL胰岛素诱导两组前脂肪细胞分化,在培养的0 d、2 d、4 d、8 d分别收集细胞,实时PCR法及Western blot法检测细胞中C/EBPα和PPARγ表达水平。培养8 d油红O染色,观察细胞分化情况。结果小鼠3T3-L1细胞基础状态下两组C/EBPα及PPARγ表达差异无统计学意义(P>0.05);诱导分化时实验组C/EBPα及PPARγ表达低于对照组(分别P<0.05,P<0.01)。油红O染色示实验组细胞无明显脂滴。结论 PI3K抑制剂LY294002能抑制小鼠前脂肪细胞分化及C/EBPα和PPARγ的表达,提示IRSs/PI3K信号通路可通过调节PPARγ和C/EBPα的表达在3T3-L1前脂肪细胞的分化中发挥重要作用。; 高金枝郑睿丹王成斌应艳琴罗小平; 关键词：PI3K抑制剂 3T3-L1细胞 C/EBPΑ PPARΓ

细胞信号转导抑制因子在宫内发育迟缓大鼠骨骼肌细胞中的表达及意义被引量：2: 2011年; 目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠骨骼肌细胞中细胞信号转导抑制因子(SOCS)及胰岛素信号通路重要分子胰岛素受体底物-1(IRS-1)的表达变化。探讨其在IUGR大鼠成年后胰岛素抵抗发生中的机制及意义。方法用孕期限制饮食法建立大鼠IUGR模型,原代培养大鼠骨骼肌细胞,采用Real time PCR和Western blot检测0周和12周龄IUGR子鼠骨骼肌细胞中SOCS-1、SOCS-3及IRS-1的mRNA和蛋白表达。采用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果与对照组相比,0周和12周龄IUGR组子鼠中骨骼肌细胞中SOCS-1、SOCS-3的mRNA和蛋白表达水平均增加(Pa<0.05),而IRS-1的mRNA和蛋白表达水平均下降(Pa<0.05)。IRS-1mRNA与SOCS-1 mRNA、SOCS-3 mRNA表达水平均呈负相关(r=-0.832、-0.789,Pa<0.01)。结论 IUGR大鼠子代骨骼肌细胞SOCS-1、SOCS-3表达增加,通过负性调节使得IRS-1表达降低,可能是骨骼肌胰岛素抵抗和成年代谢综合征发生的机制之一,提示SOCS-1和SOCS-3可以作为2型糖尿病和其他胰岛素抵抗的治疗靶点。; 廖立红郑锐丹王成斌应艳琴罗小平; 关键词：宫内生长受限胰岛素受体底物-1 胰岛素抵抗

生长追赶宫内发育迟缓大鼠肝细胞细胞因子信号转导抑制因子3表达与胰岛素抵抗的发生机制被引量：3: 2012年; 目的研究生长追赶宫内发育迟缓(CG-IUGR)大鼠肝细胞中细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)以及胰岛素信号转导途径中关键分子胰岛素受体底物1(IRS1)和胰岛素受体底物2(IRS2)的表达变化,探讨CG-IUGR大鼠发生胰岛素抵抗的机制。方法采用孕期全程限食及缩减每产子鼠数量的方法建立CG-IUGR大鼠模型。正常摄食孕鼠所产子鼠设为正常对照组(AGA组)。运用改良原位两步非循环灌流法分离并培养原代大鼠肝细胞;用实时定量PCR和Western blot法检测胰岛素抵抗CG-IUGR大鼠肝细胞于基础状态和胰岛素刺激状态下SOCS3、IRS1和IRS2分子mRNA和蛋白水平表达变化。结果 CG-IUGR大鼠肝细胞在基础状态和胰岛素刺激状态下,SOCS3 mRNA和蛋白水平表达量均较AGA组高(Pa<0.05),IRS1 mRNA和蛋白水平表达量均较AGA组低(Pa<0.05),而IRS2 mRNA和蛋白水平表达量与AGA组比较均无统计学差异(Pa>0.05)。结论 CG-IUGR大鼠肝细胞中SOCS3表达量增加,并通过负性调节下调IRS1表达,这可能是CG-IUGR大鼠发生以胰岛素抵抗为核心的疾病分子机制之一。; 叶娟王群郑瑞丹王成斌应艳琴罗小平; 关键词：宫内发育迟缓胰岛素抵抗细胞因子信号转导抑制因子3 胰岛素受体底物肝细胞

一种儿科支气管镜导管装置: 本实用新型公开了一种儿科支气管镜导管装置，包括固定板、呼吸面罩和安装板，所述呼吸面罩安装在固定板的顶部，且固定板的顶部安装有两个分别位于呼吸面罩左右两侧的定位座，所述固定板的底部安装有与定位座插接的定位柱，所述安装板的顶...; 陈高艳王成斌李晓刚; 文献传递

细胞信号转导抑制因子3特异性shRNA的构建及鉴定: 2011年; 目的构建针对大鼠细胞信号转导抑制因子3(SOCS-3)基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体,选取最有效shRNA模板序列。方法设计并合成编码的shRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,进行序列测定;转染至骨骼肌细胞中。Real-time PCR和Western blot检测各组SOCS-3的表达情况。结果测序证实重组质粒构建成功。4对shRNA模板序列对SOCS-3的表达抑制与空白及阴性对照相比差异均有统计学意义(均P<0.05),且以SOCS-3-shRNA a干预效果较好。结论 SOCS-3特异性shRNA重组表达载体构建成功,能有效抑制大鼠骨骼肌细胞SOCS-3的表达,为后续研究及代谢综合征的基因治疗奠定了基础。; 廖立红郑锐丹王成斌应艳琴罗小平; 关键词：短发夹RNA RNA干扰

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王成斌

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