应艳琴
- 作品数：34 被引量：183H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 异基因造血干细胞移植治疗X-连锁肾上腺脑白质营养不良被引量：5
- 2013年
- 背景:X-连锁肾上腺脑白质营养不良一直是国内外遗传界研究的热点,对此病的治疗一直缺乏有效的手段。目的:分析2例异基因造血干细胞移植治疗X-连锁肾上腺脑白质营养不良的疗效和并发症。方法:对华中科技大学同济医学院附属同济医院2例进行异基因造血干细胞移植的X-连锁肾上腺脑白质营养不良患儿进行综合分析及基因检测,观察移植成功情况及移植后并发症的发生。结果与结论:2例均为儿童脑型X-连锁肾上腺脑白质营养不良。1例异基因造血干细胞移植成功,但发生严重的移植相关并发症,另1例移植失败。异基因造血干细胞移植是目前治疗早期儿童脑型X-连锁肾上腺脑白质营养不良的有效方法,但最终的疗效受移植是否成功及移植后并发症等因素的影响,且异基因造血干细胞移植的疗效尚需要长期的观察。
- 张菁应艳琴罗小平张义成肖毅
- 关键词：干细胞X-连锁肾上腺脑白质营养不良异基因脂肪酸类过氧化酶体
- 胰岛素受体底物1基因沉默对3T3-L1细胞CCAAT增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究胰岛素受体底物1(IRS-1)沉默对3T3-L1前脂肪细胞分化关键分子CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA及蛋白表达的影响,并观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞能力的改变,探讨胰岛素受体底物(IRSs)是否作为C/EBPα、PPARγ的上游调节信号在前脂肪细胞分化中起到重要的调节作用。方法合成4条IRS-1 shRNA,Western blotting筛选出沉默效率最高的1条。3T3-L1前脂肪细胞分为IRS-1沉默组和对照组。IRS-1沉默组细胞用沉默效率最高的IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞,沉默细胞中的IRS-1分子;对照组采用无意义IRS-1 shRNA质粒转染3T3-L1前脂肪细胞。转染24 h后诱导其分化成熟,分化72 h后检测促进前脂肪细胞分化的关键分子C/EBPα、PPARγ的表达。继续诱导分化至第7天,油红O染色观察IRS-1沉默后前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的比例,检测其分化能力的改变。结果与对照组相比,IRS-1沉默组在诱导分化72 h后,Real-time PCR结果显示3T3-L1前脂肪细胞中C/EBPαmRNA、PPARγmRNA表达明显下降(Pa<0.05),Western blotting结果显示C/EBPα、PPARγ蛋白水平也同样显著下降(Pa<0.05);细胞继续分化至第7天,油红O染色显示,IRS-1沉默组前脂肪细胞分化成熟的比例与对照组比较显著降低。结论胰岛素可能通过IRS-1刺激C/EBPα、PPARγ的表达促进前脂肪组织的分化。
- 郑锐丹廖丽红王成斌高金枝应艳琴宁琴罗小平
- 关键词：胰岛素受体底物1过氧化物酶体增殖物激活受体Γ3T3-L1前脂肪细胞
- 生长追赶宫内发育迟缓大鼠肝细胞细胞因子信号转导抑制因子3表达与胰岛素抵抗的发生机制被引量：3
- 2012年
- 目的研究生长追赶宫内发育迟缓(CG-IUGR)大鼠肝细胞中细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)以及胰岛素信号转导途径中关键分子胰岛素受体底物1(IRS1)和胰岛素受体底物2(IRS2)的表达变化,探讨CG-IUGR大鼠发生胰岛素抵抗的机制。方法采用孕期全程限食及缩减每产子鼠数量的方法建立CG-IUGR大鼠模型。正常摄食孕鼠所产子鼠设为正常对照组(AGA组)。运用改良原位两步非循环灌流法分离并培养原代大鼠肝细胞;用实时定量PCR和Western blot法检测胰岛素抵抗CG-IUGR大鼠肝细胞于基础状态和胰岛素刺激状态下SOCS3、IRS1和IRS2分子mRNA和蛋白水平表达变化。结果 CG-IUGR大鼠肝细胞在基础状态和胰岛素刺激状态下,SOCS3 mRNA和蛋白水平表达量均较AGA组高(Pa<0.05),IRS1 mRNA和蛋白水平表达量均较AGA组低(Pa<0.05),而IRS2 mRNA和蛋白水平表达量与AGA组比较均无统计学差异(Pa>0.05)。结论 CG-IUGR大鼠肝细胞中SOCS3表达量增加,并通过负性调节下调IRS1表达,这可能是CG-IUGR大鼠发生以胰岛素抵抗为核心的疾病分子机制之一。
- 叶娟王群郑瑞丹王成斌应艳琴罗小平
- 关键词：宫内发育迟缓胰岛素抵抗细胞因子信号转导抑制因子3胰岛素受体底物肝细胞
- 小于胎龄儿生长相关异常及生长激素治疗被引量：11
- 2004年
- 应艳琴罗小平
- 关键词：小于胎龄儿生长激素宫内生长迟缓
- PI3K抑制剂LY294002对鼠前脂肪细胞分化和C/EBPα及PPARγ表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的研究磷脂酰肌醇激酶(PI3K)抑制剂LY294002对小鼠前脂肪细胞分化和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨胰岛素受体底物(IRSs)/PI3K信号通路在前脂肪细胞分化中的作用。方法小鼠3T3-L1细胞分为实验组和对照组,实验组加入LY294002(25μmol/L),对照组加入同体积DMSO。应用0.5 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、10-6mol/L地塞米松和5μg/mL胰岛素诱导两组前脂肪细胞分化,在培养的0 d、2 d、4 d、8 d分别收集细胞,实时PCR法及Western blot法检测细胞中C/EBPα和PPARγ表达水平。培养8 d油红O染色,观察细胞分化情况。结果小鼠3T3-L1细胞基础状态下两组C/EBPα及PPARγ表达差异无统计学意义(P>0.05);诱导分化时实验组C/EBPα及PPARγ表达低于对照组(分别P<0.05,P<0.01)。油红O染色示实验组细胞无明显脂滴。结论 PI3K抑制剂LY294002能抑制小鼠前脂肪细胞分化及C/EBPα和PPARγ的表达,提示IRSs/PI3K信号通路可通过调节PPARγ和C/EBPα的表达在3T3-L1前脂肪细胞的分化中发挥重要作用。
- 高金枝郑睿丹王成斌应艳琴罗小平
- 关键词：PI3K抑制剂3T3-L1细胞C/EBPΑPPARΓ
- 宫内脂多糖暴露后新生大鼠脑髓鞘基质蛋白、胶质纤维酸性蛋白、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α的表达变化
- 2010年
- 目的探讨宫内脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）暴露后新生大鼠脑中炎症因子的表达与脑白质损伤的关系。方法向孕19dSD大鼠宫内注射LPS（0．4μg／孕囊间）构建宫内感染大鼠模型作为LPS组（n=14），对照组给予同体积的无菌生理盐水（n=10）。取1、3、7、11日龄新生大鼠脑标本（每组每时间点6只），通过免疫组织化学方法检测髓鞘基质蛋白与胶质纤维酸性蛋白在新生大鼠脑组织中的表达；采用逆转录-聚合酶链反应技术检测脑组织白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α mRNA的水平。组间差异比较采用t检验。结果（1）LPS组孕鼠胎盘组织HE染色可见显著炎性细胞浸润、间质明显增生、毛细血管腔变窄。（2）LPS组11日龄新生大鼠小脑、间脑髓鞘基质蛋白表达分别为1．29±0．76和1．71±0．49，均较对照组（分别为2．43±0．79和2．50±0．76）明显减少（P均〈0．05）；而LPS组11日龄新生大鼠海马、胼胝体、间脑和小脑中胶质纤维酸性蛋白的表达分别为2．71±0．49、2．40±0．55、1．50±0．55和2．80±0．45，均较对照组（分别为1．75±0．50、1.50±0．58、1．00±0．00和1．60±0．55）增强（P均〈0．05）。（3）LPS组与对照组1、3、7、11日龄新生大鼠脑组织中白细胞介素-1β与肿瘤坏死因子-αmRNA的表达差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论宫内LPS暴露导致宫内炎性改变、影响胎盘血供，并致新生大鼠低出生体重，可能引起新生大鼠出现以低髓鞘化及反应性星形胶质化为特征的脑白质损伤。
- 戴红梅肖彩菊余肖王伟应艳琴宁琴罗小平
- 关键词：脂多糖类
- 一个Laron综合征家系患者临床特点和生长激素受体基因突变分析(英文)被引量：3
- 2007年
- Laron综合征是一种常染色体隐性遗传病,生长激素受体(GHR)基因缺陷是导致Laron综合征的主要病因。Laron综合征主要临床特征为生后严重的生长落后伴特殊面容,血生化特点为高生长激素(GH)、低胰岛素样生长因子-I(IGF-I)和低胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)。该研究报道一家系2例Laron综合征患者的临床特点及GHR基因突变。这两个病人为同胞姐弟。弟弟8岁,身高80.0cm(-8.2SDS),姐姐11岁,身高96.6cm(-6.8SDS)。他们出生体重和身长无特殊,自生后出现生长落后,身高明显落后于同龄正常儿童,并均呈现了典型Laron综合征外貌特征:身材矮、肥胖、前额突出、大眼睛、塌鼻梁、头发稀软。这两个病人空腹血清GH值均明显高于正常儿童,空腹血清IGF-I明显低于同年龄同性别正常儿童,血浆IGFBP-3和生长激素结合蛋白(GHBP)低于检测线。其中1例(8岁男孩)胰岛素和可乐定刺激后GH峰值大于350ng/mL,给予重组人生长激素治疗1年,身高由治疗前的80.0cm增加至83.3cm。GHR基因序列测定结果显示2例患者均存在外显子4上第65位氨基酸的纯合突变S65H(TCA→CCA),为新发现的突变。Laron综合征患者存在特殊的面貌特征,结合血GH、IGF-I、IGFBP-3和GHBP测定可以明确诊断。GHR基因外显子4上S65H突变可能是这两位Laron综合征患者的致病原因。
- 应艳琴魏虹曹励之吕娟娟罗小平
- 关键词：基因突变聚合酶链式反应
- 生长追赶宫内发育迟缓大鼠早期糖脂代谢及脂肪细胞功能的改变被引量：16
- 2012年
- 目的探讨生长追赶宫内发育迟缓(IUGR)大鼠早期糖脂代谢及脂肪细胞功能的改变。方法母孕期饥饿法建立IUGR大鼠模型。禁食组仔鼠作为生长追赶IUGR模型组(IUGR组),正常喂养仔鼠作为对照组(AGA组)。12周龄时检测血浆甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-C(LDL-C)、高密度脂蛋白-C(HDL-C)以及脂联素、促酰化刺激蛋白(ASP)的水平。隔日行糖耐量试验(OGTT),检测血浆葡萄糖和胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI)。随后仔鼠断头处死,共聚焦显微镜下观察免疫荧光染色的成熟脂肪细胞中葡萄糖转运体-4(GLUT-4)的表达。结果 12周末时IUGR组大鼠体重、BMI显著高于AGA组(均P<0.01),血TG、TC、LDL-C水平显著高于AGA组,HDL-C水平明显低于AGA组(P<0.05)。OGTT中IUGR组注射葡萄糖后各时间点血糖水平均高于AGA组(P<0.05),IRI值亦显著增高(P<0.05)。与AGA组比较,IUGR组ASP水平明显升高(P<0.05),而脂联素水平显著降低(P<0.05)。IUGR大鼠成熟脂肪组织中GLUT-4在基础状态和不同浓度胰岛素刺激下的表达水平与AGA组相比均明显降低(P<0.05)。结论 IUGR大鼠生后发生明显的生长追赶,12周时即存在高血脂、高血糖及胰岛素抵抗。脂肪细胞分泌功能的异常和脂肪组织GLUT-4表达水平的降低可能参与了生长追赶IUGR大鼠胰岛素抵抗的形成。
- 郑锐丹汪无尽应艳琴罗小平
- 关键词：宫内发育迟缓胰岛素抵抗脂肪细胞
- 胰岛素受体底物在宫内发育迟缓新生鼠肌肉组织中的表达被引量：3
- 2006年
- 目的探讨胰岛素受体底物(IRS-1I、RS-2)基因在宫内发育迟缓(IUGR)新生鼠心肌、骨骼肌(股四头肌)中的表达及意义。方法采用母孕期饥饿法建立IUGR新生鼠模型,正常新生鼠作对照,应用RT-PCR技术检测心肌、股四头肌组织IRS-1I、RS-2mRNA水平,凝胶电泳条带用成像系统照相定量分析结果,分别计算PCR产物条带与-βactin条带光密度值的比值,作为目的基因相对表达量。结果IUGR鼠出生时体质量、身长显著小于对照组(P均<0.01)。IUGR新生鼠心肌IRS-1 mRNA相对表达水平显著高于对照组(t=2.568 P=0.022),股四头肌IRS-1 mRNA相对表达水平、心肌IRS-2 mRNA相对表达水平显著低于对照组(t=2.868 P=0.012;t=2.358 P=0.035),股四头肌IRS-2 mRNA相对表达水平与对照组相比无显著差异(t=1.426 P=0.177)。结论IUGR对心肌、骨骼肌IRS-1基因表达的影响具有组织选择性,心肌IRS-1基因表达上调是适应宫内营养不良环境的结果;骨骼肌IRS-1基因表达下降,并可能“程序化”,可能是IUGR易患代谢综合征的分子机制之一。
- 王谦应艳琴宁琴罗小平
- 关键词：胰岛素受体底物胎儿代谢综合征
- 亚太儿童内分泌学会第四次学术会议概述被引量：1
- 2007年
- 亚太儿童内分泌学会（Asia Pacific Pediatric Endocrine Society，APPES）第四次学术会议于2006年11月1—4日在泰国芭堤雅市召开，来自亚太地区26个国家的特邀嘉宾和389名代表出席了本次会议。大会的主题为“儿童内分泌学：面向未来”，会议设主题讲座报告3个，分别为1型前驱糖尿病的鉴别与管理、非生长激素缺乏性身材矮小的评价与处理以及性分化的机制。7个专题研讨会分别为糖尿病、区域性挑战、热点激素、生长、女童高雄激素血症、肾上腺和临床热点问题。大会论文专题发言7场，内容涉及糖脂代谢、生长激素一胰岛素样生长因子1（GH—IGF-1）轴、肾上腺、性成熟性分化以及甲状腺和骨代谢等相关疾病。另有12个专题的墙报交流和2个生长发育相关的卫星会议。其中儿童肥胖与代谢综合征、糖尿病、GH—IGF-1轴相关疾病、性发育性分化异常和垂体-肾上腺轴疾病为本次大会的热点，现就主要内容简介如下。
- 应艳琴罗小平
- 关键词：儿童肥胖内分泌学垂体-肾上腺轴生长激素缺乏胰岛素样生长因子
