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启发式思考题对医学本科分子生物学实验教学的促进作用被引量：4: 2015年; 目的:通过自行设计的启发式思考题,让问题式学习伴随医学生分子生物学实验教学全程,利用实验课的教学互动环节发挥学生学习的主观能动性。方法:借鉴启发式教学经验和问题式教学方法,在实验的平时考核中增加了启发式思考题,针对教学内容设置拓展性问题,以开卷回答的方式引导学生通过自学寻找操作实践及其理论基础中潜在的知识内涵和科学规律。结果:思考题的引入在强化学生自主学习,锻炼思考和解决问题能力的同时也显示出了良好的区分度。思考题成绩以及以此为基础的平时成绩与实验理论考核成绩之间显示出了显著的相关性。结论:贯穿于实验课教学活动中的启发式思考题在拓展思维、提升学生自主学习能力的同时促进了实验课的教学效果。; 王立锋吴有盛王健路凡赵晶; 关键词：问题式分子生物学实验教学

人源抗肝癌单链抗体scFv-CD3ζ基因真核载体的构建: 2004年; 目的克隆正常人T细胞CD3ζ的胞内区、跨膜区基因,将其与二硫键稳定的人源化抗肝癌的单链抗体scFv的基因克隆入真核表达载体,为制备肝癌靶向性嵌合锚定T细胞奠定基础,并探讨其对肝癌的杀伤活性。方法应用PCR法将二硫键稳定的人源化的单链抗体scFv的基因克隆入真核细胞表达载体pcDNA3,在5'端及3'端分别引入相应酶切位点;用RT-PCR法从正常外周血人T细胞扩增出CD3ζ的胞内区、跨膜区基因,然后将其克隆于scFv的下游,并在5'端及3'端引入相应的酶切位点。结果二硫键稳定的人源化抗肝癌的单链抗体scFv的cDNA片段为735bp,与已知的序列相符;CD3ζ的胞内区、跨膜区的cDNA片段为294bp,与GeneBank公布的序列一致。重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳及测序加以证实。结论完成了二硫键稳定的人源化抗肝癌的单链抗体scFv及CD3ζ的胞内区、跨膜区融合基因真核表达载体pcDNA3-scFv-CD3ζ的构建,为制备肝癌靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础。; 王健李锴男孙妍琳刘彦仿付勇刁建升屈晓杰; 关键词：单链抗体共刺激信号

人NDRG2基因截短体在pEGFP-C2真核表达载体中的表达和鉴定被引量：1: 2009年; 目的:在pEGFP-C2真核表达载体中表达人NDRG2基因的截短部分并进行鉴定。方法:以含有人NDRG2基因的pGKBT7质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得截短的人NDRG2基因,然后克隆入表达载体pEGFP-C2;以荧光显微镜观察和WesternBlotting方法对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中在分子量67kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带,该条带可被Ndrg2单克隆抗体特异性识别。结论:构建了截短的人NDRG2基因真核表达载体,并在真核细胞中(HEK-293)获得成功表达。; 王健吴琳张健刘学武张璟沈岚刘新平; 关键词：NDRG2 基因 PCR

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王健