赵晶
- 作品数：104 被引量：270H指数：8
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 活性型粒酶B基因的异位表达导致多核巨细胞产生
- 2004年
- 粒酶B (granzymeB ,GrB)是一种重要的丝氨酸蛋白酶参与细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)和自然杀伤细胞(NK)介导的细胞杀伤过程 .为研究粒酶B在肿瘤细胞中异位表达后能否诱导细胞死亡 ,将构建的活性型粒酶B(GrBa)基因及其酶活性中心突变型 (mGrBa)基因的真核表达载体 ,以脂质体法瞬时转染HeLa细胞 ,通过绿色荧光蛋白 (GFP)共表达、间接免疫荧光、细胞计数、MTT等方法 ,观察到GrBa蛋白的异位表达引起多核巨细胞形态异常 ,并且表达细胞的生长受到抑制 .Percoll分离多核巨细胞后 ,观察到其生长状态较差 ,是导致生长抑制的直接原因 .细胞骨架破坏和具有多极纺锤体的异常有丝分裂 ,推测是多核巨细胞不断产生的根源 .
- 赵晶陈蕾许彦鸣张淼丽温伟红王成济杨安钢
- 关键词：异位表达多核巨细胞
- 启发式思考题对医学本科分子生物学实验教学的促进作用被引量：4
- 2015年
- 目的:通过自行设计的启发式思考题,让问题式学习伴随医学生分子生物学实验教学全程,利用实验课的教学互动环节发挥学生学习的主观能动性。方法:借鉴启发式教学经验和问题式教学方法,在实验的平时考核中增加了启发式思考题,针对教学内容设置拓展性问题,以开卷回答的方式引导学生通过自学寻找操作实践及其理论基础中潜在的知识内涵和科学规律。结果:思考题的引入在强化学生自主学习,锻炼思考和解决问题能力的同时也显示出了良好的区分度。思考题成绩以及以此为基础的平时成绩与实验理论考核成绩之间显示出了显著的相关性。结论:贯穿于实验课教学活动中的启发式思考题在拓展思维、提升学生自主学习能力的同时促进了实验课的教学效果。
- 王立锋吴有盛王健路凡赵晶
- 关键词：问题式分子生物学实验教学
- 紫参片的HPLC指纹图谱研究及5个成分含量测定被引量：6
- 2012年
- 目的:研究建立紫参片的HPLC法指纹图谱分析方法,并测定该制剂中藁苯内酯、正丁烯基苯酞、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的含量,为其质量控制提供依据。方法:利用HPLC法,采用UltimateXB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),使用乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,以260 nm为检测波长。在紫参片样品的HPLC图中,以丹参酮ⅡA为对照参比物,对各色谱峰与丹参酮ⅡA色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD进行分析,运用中国药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"对10批紫参片的图谱进行相似度评价。采用外标法,利用藁苯内酯、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA的混合对照品测定其在10批该制剂中的含量。结果:在选定的条件下确定32个峰构成紫参片的指纹特征,各批次样品均具有上述特征,且特征峰的相对含量分布基本一致;各批次样品中丹参酮ⅡA色谱峰所对应的保留时间一致;每批样品的各色谱峰与丹参酮ⅡA色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD均符合指纹图谱的检测要求,10个批次样品的指纹图谱相似度均大于0.940,5个物质在10批该制剂中的含量基本一致。结论:HPLC指纹图谱方法与5个物质的含量测定方法准确、稳定、简便,均可用于紫参片的质量控制。
- 肖会敏何悦王四旺谢艳华赵晶
- 关键词：高效液相色谱指纹图谱藁苯内酯隐丹参酮
- 不同结构形式的HBX蛋白对其在肝细胞癌HepG2中分布的影响被引量：7
- 2011年
- 目的:本研究选用不同的真核表达载体,分别克隆并构建了包含HBX基因或其与GFP以不同方式融合表达的重组质粒,探究不同结构的HBX蛋白对其在细胞内定位的影响。方法:以本实验室构建好的pcDNA3.0-HBX质粒为摸板,采用PCR方法扩增Flag-HBX,克隆至pMD-18T载体中,测序正确后,分别亚克隆至不同载体,构建重组质粒pFlag-HBX-IRES2-EGFP,pEGFP-C3-Flag-HBX,pFlag-HBX-EGFP-N3,鉴定正确后瞬时转染肝癌HepG2细胞,通过间接免疫荧光染色显示HBX蛋白的细胞内定位和分布。结果:成功构建出三种Flag-HBX的真核重组质粒;不同重组质粒转染HepG2细胞后,间接免疫荧光显示与GFP不同融合形式的HBX蛋白在细胞内存在不同的分布特征。结论:为研究HBX在肝癌发生发展中的作用提供了有意义的实验依据,尤其是对体外细胞转染结果的解释提供了借鉴。
- 彭亮张瑞赵晶闵婕蒲长宇周后龙杨安钢冯英明
- 关键词：HBX肝癌HEPG2细胞间接免疫荧光
- HER2阳性乳腺癌转移患者最佳治疗方案的研究进展被引量：3
- 2015年
- 针对人表皮生长因子受体HER2的靶向制剂曲妥珠单抗,显著改善了HER2阳性乳腺癌转移患者疾病的发展状况,提高了患者的总体生存期(OS),然而耐药现象时有发生。其它靶向制剂如帕妥珠单抗,酪氨酸激酶受体抑制剂拉帕替尼和ado-transtusumab emtansine等克服了其耐药性,为治疗提供了更多选择。这些HER2靶向制剂单用或联用已显示出良好的临床功效,但最佳治疗次序依然未知。随着新型靶向制剂的出现,最佳治疗方案的研究成为热点。本篇综述重点阐述了目前HER2阳性乳腺癌转移患者最佳治疗方案的研究进展,以及新型靶向制剂的现有状况。
- 席宇菁才延辉晋毅曹钟元相庚柴丽清赵晶阎爱荣
- 关键词：表皮生长因子受体乳腺癌转移靶向治疗最佳治疗方案
- 氧化损伤诱导的人晶状体上皮细胞系基因表达谱的差异和表型改变
- 2016年
- 目的:探讨人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)氧化刺激后基因表达谱的差异以及相应的表型改变。方法:培养人晶状体上皮细胞系HLE-B3并给予H_2O_2刺激。24h后,提取细胞总RNA进行基因表达谱芯片检测,并采用生物信息学数据库DAVID对氧化刺激组相比对照组显著上调的基因进行Gene Ontology(GO)功能富集分析。RT-q PCR对上调的基因进行验证。通过MTT和流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果:表达谱芯片结果显示,氧化刺激造成HLEC中367个基因上调,GO分析表明这些基因富集于310个功能类别中,主要包括p53信号通路、细胞凋亡通路、细胞程序性死亡通路等。RT-q PCR结果证实,6个主要参与促凋亡或抗凋亡调节的基因,包括BCL2A1、TP53I3、FAS、ZMAT3、DDB2和BCL2L1,在氧化刺激后表达水平明显上升。MTT实验和流式细胞仪检测结果显示,H_2O_2刺激后HLEC凋亡逐渐上升,是细胞氧化损伤的主要表现。结论:氧化刺激可同时诱导HLEC中促凋亡基因和抗凋亡基因表达水平上调,但最终仍然导致了细胞凋亡。
- 梅林王嵩闫博杨安钢赵晶严宏
- 关键词：人晶状体上皮细胞表达谱芯片细胞凋亡
- 生物化学教学中学习能力的培养被引量：3
- 2004年
- 生物化学课堂教学中,培养学生的学习能力至关重要.它有助于充分发挥学生的主观能动性,提高教学效果.文章介绍了几种有效的课堂教学方法,包括引导学生掌握知识框架、运用联想和比喻、将规律转化为直观的图示、比较异同、鼓励学生积极参与交流、准确地用语言表述、触类旁通地进行学习.
- 赵晶杨安钢王成济
- 关键词：生物化学课堂教学教学效果教学方法
- 短发卡状PTI-1(PC-3)基因特异性RNA干扰表达载体对PC-3细胞的体外效应被引量：1
- 2005年
- 目的:通过基因克隆技术构建人前列腺癌PC3细胞系PTI1(PC3)基因[prostatecarcinomatumor inducinggene1(PC3)]的特异性短发卡shRNA(short hairpinRNA)真核表达载体,采用RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术,体外观察对PC3细胞系PTI1(PC3)基因的沉默作用以及干扰后对PC3细胞的体外效应.方法:采用基因克隆技术,将合成的短发卡样特异性PTI1(PC3)RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体pEGFP/U6,构建PTI1(PC3)shRNA的真核表达载体,体外转染人前列腺癌PC3细胞,48h后观察细胞生物学变化;提取转染细胞总RNA及总蛋白,行RT PCR以及West ernblot观测胞内PTI1(PC3)mRNA及蛋白水平.结果:①成功构建短发卡样PTI1(PC3)shRNA真核表达载体pEGFP/U6mPs;②转染(脂质体法)PC3细胞,48h后细胞大部分死亡;③转染48h后细胞内PTI1(PC3)mRNA水平下降;④转染48h后下调胞内PTI1(PC3)蛋白水平.结论:本实验成功构建的shRNA真核表达载体通过RNA干扰,能够干扰人前列腺癌PC3细胞内PTI1(PC3)基因的表达,抑制PTI1(PC3)蛋白的表达,降低了由PTI1蛋白可能发挥的“翻译失真性”作用,促进癌细胞的死亡,进一步揭示了PTI1在前列腺癌发生、发展过程中的显性癌基因作用.由于RNA干扰的特异性从而为临床上前列腺癌的基因治疗提供了新的可能的方法.
- 宋斌王禾赵晶秦卫军杨安钢
- 关键词：PC-3细胞特异性RNA干扰体外效应PEGFP体外观察脂质体法
- 二苯乙烯苷调节ROS相关JNK通路对LPC诱导HUVECs损伤的作用被引量：5
- 2015年
- 目的探讨从何首乌提取的二苯乙烯苷(TSG)对溶血卵磷脂(LPC)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响及其可能机制。方法体外培养HUVECs,筛选溶血卵磷脂损伤内皮细胞的最适药物浓度,采用CCK-8检测细胞活力,透射电镜观察细胞形态,激光共聚焦显微镜检测和观察活性氧(ROS)水平,Western blot检测p-JNK蛋白的水平。结果 LPC能引起细胞损伤,并随质量浓度增加,细胞活力降低,其中10μg/mL LPC作用细胞后,与正常组比较细胞活力明显降低,细胞内空泡增多,线粒体肿胀,产生ROS的水平增高,p-JNK蛋白表达水平显著上调。经二苯乙烯苷预处理1 h后,二苯乙烯苷1.0μmol/L和10μmol/L组与溶血卵磷脂组比较,细胞活力增强,细胞内空泡减少,线粒体较完整,产生ROS水平降低,p-JNK蛋白表达量显著下调(P<0.05)。结论二苯乙烯苷具有降低溶血卵磷脂所致HUVECs的细胞损伤作用,其机制可能与调节ROS相关JNK通路有关。
- 赵晶徐守竹宋凡年伦周暄宣王四旺
- 关键词：二苯乙烯苷ROSP-JNK
- 抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达
- 2004年
- 目的 获得鼠抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法 从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA ,用逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)克隆Fd段和κ链基因 ;构建到噬粒pComb3中 ;并用ELISA、Westernblotting和免疫细胞化学分析证明表达的Fab段特异性结合人精浆蛋白。结果 从分泌抗人精浆蛋白的鼠单克隆抗体杂交瘤细胞系E4B7中克隆出了重链Fd段和κ链基因 ,经序列测定表明 ,Vκ 属于鼠免疫球蛋白ⅩⅢ家族 ,VH与鼠免疫球蛋白MUSIGHAEI同源性最高。将该Fd和κ链基因克隆到表达载体pComb3中 ,在大肠杆菌中获得了表达。结论 ELISA、Westernblotting和免疫细胞化学分析表明 。
- 杨洁郝晓柯孙脊峰赵晶于翠娟许彦鸣金明王成济杨安钢
- 关键词：单克隆抗体FAB段基因表达
