王东
- 作品数：131 被引量：250H指数：9
- 供职机构：四川省农业科学院更多>>
- 发文基金：四川省农业科学院青年基金四川省财政基因工程青年基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程理学更多>>
- 含有gat‑tpinⅡ结构转基因植物实时PCR精准检测的引物和探针及方法
- 本发明属于生物技术领域，涉及基因的定量分析方法，具体是指含有gat‑tpin Ⅱ结构转基因植物实时PCR精准检测方法。本发明采用设计的特异性上游引物序列、下游引物序列、荧光探针序列、DNA稀释液以及Taqman Mast...
- 张富丽常丽娟尹全宋君王东郭灵安雷绍荣
- 无标记基因抗虫水稻外源基因向常规栽培水稻漂移研究(英文)被引量：1
- 2012年
- [目的]该试验旨在研究外源基因向非转基因常规栽培稻漂移频率,评估无标记基因抗虫水稻对农业生态环境的潜在风险。[方法]该试验以抗虫转基因水稻华恢1号为研究对象,将几种非转基因常规栽培水稻种植在其周围,按不同距离收集F1代非转基因水稻种子。采用PCR技术对各点收集的水稻种子进行转基因杂种鉴定,统计并分析抗虫转基因水稻中外源基因向非转基因常规栽培水稻漂移的频率。[结果]外源Bt基因向P13381和春江063水稻平均漂移频率皆为0。而抗虫转基因水稻华恢1号与非转基因水稻合系22-2、天香、明恢63和P1157几个品种不同程度地发生了转基因漂移,平均漂移频率最高为0.875%,并且漂移频率随着距离加大而逐渐降低,而在7m以外的所有采样点平均转基因漂移频率为0。[结论]该研究表明抗虫水稻华恢1号外源基因的基因漂移频率非常低,其对生态环境的在风险很小,通过田间合理布局进行物理隔离,保持合适距离,以及科学安排农时,错开花期等方式,能有效控制转基因水稻外源基因漂移和降低因转基因逃逸带来生态风险。
- 张富丽刘勇宋君雷绍荣尹全王东常丽娟陶李刘文娟
- 关键词：转基因水稻抗虫性基因漂移生态风险
- 转基因玉米的多重PCR筛查检测引物及检测方法
- 本发明公开了一种转基因玉米的多重PCR筛查检测引物及检测方法，所述引物具有较强的特异性，能够用于多重PCR筛查检测分析。所述检测方法提供了一种操作简便、扩展性能好、灵敏度高的转基因玉米筛查检测方法，实现了转基因玉米的多靶...
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- 文献传递
- 转基因水稻外源基因NOS终止子定量测定的不确定度分析被引量：2
- 2013年
- 为了把测试分析误差控制在允许范围内,保证测试结果有一定的精密度和准确度,使分析数据在给定的置信水平内达到要求的质量,根据JJF 1059─1999《测量不确定度评定与表示》技术规范,估算了转基因水稻外源成分NOS终止子含量测定结果的不确定度。A类评估结果为uA=0.001,B类评估结果为uB=0.008,合成不确定度为uC=0.008,置信水平为95%的扩展不确定度为U95=0.016,NOS终止子含量测量结果为0.1124±0.016。本实验测量结果不确定度分析表明,转基因水稻外源基因NOS终止子含量测定的不确定度主要来自于实验操作中的随机效应、微量移液器转移液体的误差、Ct值与lgA值的线性偏离。因此,在转基因生物安全定量分析中应重点注意上述不确定度来源对测量结果的影响。
- 王东宋君雍彬叶先林常丽娟尹全张富丽刘文娟雷绍荣
- 关键词：水稻转基因
- 转基因玉米MON88017构建特异定量PCR精准检测的引物组和探针及其方法
- 本发明提供了转基因玉米MON88017构建特异定量PCR精准检测的引物组和探针及其检测方法。上游引物序列：5'‑GGGCTTAGATGAGAAACTTCACGAT‑3'；下游引物序列：5'‑CCGACTCTCTTCTCA...
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- PCR方法在抗虫转基因水稻外源基因漂移风险研究中的应用被引量：1
- 2016年
- 本试验以抗虫转基因水稻华恢1号为研究对象,将几种非转基因常规栽培水稻种植在其周围,采用PCR检测方法对不同距离收集的F_1代水稻种子进行转基因杂种鉴定,统计并分析外源基因漂移的频率,评估无标记基因抗虫水稻基因漂移风险。结果显示,外源bt基因向P13381和春江063水稻平均漂移频率皆为零。而抗虫转基因水稻华恢1号与非转基因水稻合系22-2、天香、明恢63、P1157几个品种不同程度地发生了转基因漂移,平均漂移频率最高为0.88%,并且漂移频率随着距离加大而逐渐降低,在7 m以外的所有采样点平均转基因漂移频率为零。采用合理田间布局、物理隔离、保持合适距离,以及科学安排农时、错开花期等方式,可有效减小转基因水稻外源基因漂移风险。本试验表明,采用PCR法可以准确地进行转基因杂种的鉴定,但缺点是工作量很大,耗时较长,需进一步寻求更简便高效的方法用于检测无标记基因的转基因漂移频率。
- 张富丽牛蓓常丽娟宋君王东尹全刘文娟
- 关键词：转基因水稻抗虫性基因漂移环境安全PCR方法
- 转基因玉米MON88017品系特异定量PCR精准检测的引物和探针及方法
- 本发明属于生物技术领域，涉及基因的定量分析方法，具体是指转基因玉米MON88017品系特异定量PCR精准检测方法。本发明采用设计的特异性上游引物序列Event MON88017‑Forward、下游引物序列Event M...
- 王东宋君雷绍荣郭灵安刘勇常丽娟张富丽尹全刘文娟
- 文献传递
- 七重PCR快速筛查检测商业化应用转基因油菜的引物及检测方法
- 本发明公开了一种快速筛查检测商业化应用的转基因油菜外源基因至少两次的多重PCR检测方法，所述引物具有较强的特异性，能够用于多重PCR筛查检测分析。所述检测方法提供了一种检测快速、操作简便、扩增性能好、灵敏度高的转基因筛查...
- 尹全李忆宋君张富丽刘勇雷绍荣郭灵安王东刘文娟常丽娟
- 文献传递
- GTS40-3-2大豆转化体特异性的定性PCR检测被引量：1
- 2012年
- 为了建立转基因大豆GTS40-3-2转化体特异性定性PCR检测方法,本研究根据已公布的转基因大豆GTS40-3-2的旁侧序列信息,用Primer 5.0软件在左右边界的结合位点处设计了5对引物组合,选取扩增片段为370 bp最佳引物组合后,优化了反应体系中引物浓度和退火温度。以Lectin为内标基因,验证检测引物的特异性及灵敏度,建立了转基因大豆GTS40-3-2转化体特异性定性PCR检测方法。结果表明,该方法成本低、效率高,具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点,已通过全国六家实验室的循环验证,能特异地检测大豆样品中GTS40-3-2转化体,最低限可达0.05%。研究表明,该方法满足我国转基因生物安全管理过程中对GTS40-3-2大豆的检测需求,具有良好的应用前景。
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- 关键词：转基因大豆PCR检测耐除草剂
- 四种转基因玉米多重PCR检测方法的建立被引量：7
- 2016年
- 为建立能同时检测4种转化体的多重PCR方法,选择进口转基因玉米最为常见的4种转化体Bt11、Bt176、MON810和MON863,利用国家标准中现行有效的转化体检测引物作为多重PCR检测体系引物,对多重PCR退火温度和引物浓度等进行优化。结果表明,多重PCR方法的适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol/L)配比为0.4∶0.4∶0.4∶0.4,通过建立快速、准确、高效的多重PCR为进口转基因玉米检测提供有价值的参考。
- 尹全李忆宋君王东张富丽刘文娟常丽娟雷绍荣刘勇
- 关键词：转基因玉米多重PCR
