杨卉娟
- 作品数：29 被引量：73H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法
- 本发明提供一种IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法，选择猪龄为3-5个月、体重为10-20kg的属于华南型猪种的云南版纳小耳猪，随机分组，分别进行第一次无针皮内注射IPV疫苗免疫，免疫后30天采血，分离血清，再分...
- 廖国阳孙明波马磊寸怡娜蔡玮周健杨卉娟刘婧张新文戴忠祥代小虎胡文柱姜述德
- 文献传递
- 一株引起无菌性脑膜脑炎柯萨奇B组3型病毒的分离和VP1基因分析被引量：1
- 2011年
- 摘要目的对一株从无菌性脑膜脑炎患者中分离到的柯萨奇B组3型病毒（coxsackievirusB3，CVB3）分离株KMA103-09进行VP1区的基因特征分析。方法采用Hep-2、RD细胞对患者粪便标本进行病毒分离，肠道病毒组合血清进行鉴别，反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增病毒目的片段，测序后进行VP1基因分析，用Mega4．1等软件分析处理。结果肠道病毒组合血清鉴别为柯萨奇病毒B组3型（Cox．B3），从病毒性脑膜脑炎患者粪便标本中，分离到CVB3，其VPl区的核苷酸长度为849bp，未发现核苷酸插入与丢失。与山东04433／SD／CHN／2004／CB3株、山东05280／SD／CHN／2005／CB3株及山东YZ127／SD／CHN／2005／CB3株氨基酸同源，与其余国内分离株同源性高于为99．29％，与国外毒株的同源性为95．41％-96．47％。在进化树上与AM06HZ／SD／CHN／2006／CB3株显示在同一个分支上。结论分离的肠道病毒为柯萨奇病毒B组3型（Cox．B3），分离株（KMA103—09）VP1区变异较小。
- 李华杨卉娟柯华昕陈俊英施海晶孙强明马绍辉
- 关键词：无菌性脑膜脑炎VP1基因
- 乙型脑炎Vero细胞灭活疫苗毒株的遗传稳定性被引量：2
- 2014年
- 目的 研究流行性乙型脑炎Vero细胞灭活疫苗毒种（P3毒株）在生产过程中的遗传稳定性,为疫苗的安全性和免疫原性评价提供依据.方法 检测P3毒株鼠脑传代一代毒株、主种子、工作种子、疫苗及疫苗续传5代后病毒E蛋白基因核苷酸及氨基酸序列,并与GenBank中乙脑病毒P3株（AF036919）进行比对分析,同时比较主种子、工作种子、疫苗及疫苗续传5代后毒株的病毒滴度、抗原含量及效价.结果 以上5代次病毒的E蛋白基因核苷酸及蛋白质序列完全相同,同源性均为100％,与GenBank中乙脑病毒P3株（AF036919）比较显示：核苷酸序列中第E9、E10、E324、E330、E1223、E1338基因位点存在差异,同源性为99.73％,其中只有E1223突变引起相应氨基酸aE408突变（L→S）,同源性为99.80％,但该位点为非毒力相关位点,而其他位点均为沉默突变.4个代次疫苗毒株病毒滴度均≥8.0 lgLD50/ml,且各代次抗原含量及效价较为相似.结论 在生产乙型脑炎灭活疫苗（P3株）过程中建立的以Vero细胞为基质的乙脑毒种库具有良好的遗传稳定性.
- 张海燕曹晗王俊荣张名梁疆莉马艳顾琴杨卉娟孙明波
- 狂犬病毒aG株糖蛋白在CHO细胞中的表达被引量：5
- 2005年
- 目的克隆狂犬病毒aG株糖蛋白(Glycoprotein)基因,构建重组真核表达载体,在CHO细胞中表达aG株糖蛋白。方法采用RTPCR,从狂犬病毒aG株基因组RNA中扩增GP基因,并将该基因克隆至真核表达载体pCIdhfr上,以脂质体介导法转染CHOdhfr-细胞。用MTX筛选的抗性克隆经ELISA、免疫荧光及Westernblot检测GP蛋白的表达。结果克隆到狂犬病毒aG株糖蛋白全长基因,并在CHO细胞中进行表达。结论成功地在CHO细胞中表达了狂犬病毒aG株的糖蛋白,为进一步开发狂犬病毒基因工程疫苗打下基础。
- 钱源孙明波张鸣杨卉娟蒋燕军姜述德廖国阳李卫东
- 关键词：CHO细胞狂犬病毒糖蛋白AGWESTERN-BLOT全长基因
- 狂犬病毒aG株核蛋白和糖蛋白双表达质粒的构建及其在真核细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 目的构建狂犬病毒aG株核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)双表达重组质粒,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中表达核蛋白和糖蛋白。方法提取狂犬病毒RNA,应用RT-PCR方法扩增NP和GP基因,分别将其克隆到pIRES载体上,获得同时含有NP和GP基因的双顺反子重组质粒pING,并以脂质体介导法转染CHO-K1细胞,G418筛选,用ELISA和IFA检测NP和GP的表达。结果限制性内切酶分析表明重组质粒pING含有NP和GP基因片段,长度分别为1353bp和1575bp。应用ELISA和IFA方法,在转染细胞中均检测到NP和GP的表达。结论重组双表达质粒可在CHO细胞中同时表达NP和GP,为进一步开发重组狂犬病疫苗奠定了基础。
- 杨卉娟陈俊英孙明波张新文钱源段骞王东宝姜述德廖国阳李卫东
- 关键词：狂犬病毒糖蛋白核蛋白真核细胞
- Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗毒种的遗传稳定性被引量：4
- 2016年
- 目的分析Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（inactivated poliomyelitis vaccine,sabin strain,s IPV）毒种（亚主种子、工作种子）及疫苗代次病毒（SO＋4）的遗传稳定性。方法比较疫苗株SabinⅠ、Ⅱ型及PfizerⅢ型亚主种子、工作种子及疫苗代次病毒的感染性滴度及D抗原含量的变化情况,并对上述病毒进行全基因组测序。结果各代次Sabin株病毒滴度均维持在7.62-8.62 lg CCID50/ml,D抗原含量均维持在30-128 DU/ml。与Gen Bank上登录的SabinⅠ（AY184219.1）、Ⅱ（AY184220.1）、Ⅲ型（AY184221.1）减毒株原始种子（SO）基因序列相比,Sabin株亚主种子（SO＋2）、工作种子（SO＋3）及疫苗代次病毒（SO＋4）均未出现碱基突变。结论 s IPV毒种及疫苗代次病毒的全基因序列与原始种子相比,均未发生变化,毒力均一,遗传性状方面保持了较好的稳定性。
- 邓燕朱云梁海孝杨璐洁罗娜王虓宇王海杨卉娟徐明珏杨净思孙明波
- 关键词：脊髓灰质炎灭活疫苗全基因组测序
- 一株柯萨奇病毒B组5型(Cox.B5)病毒的分离及VP1基因分析被引量：5
- 2011年
- 目的研究2009年昆明市无菌性脑膜炎的病原柯萨奇B5(coxsackie virus B5,CVB5)分离株(KMA193-09)的VP1基因特征。方法采用RD细胞、Hep-2细胞对患者粪便标本进行病毒分离,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒VP1基因并进行序列测定,用Mega 4.0等软件分析处理。结果从无菌性脑膜炎患者粪便标本中,分离到CVB5,其VP1区的核苷酸长度均为831bp,未发现核苷酸插入与丢失。与浙江COXB5/ZHEJIANG/12/02(CFS)株、山东02336/SD/CHN/2002/CB5株及浙江COXB5/ZHEJIANG/13/02株氨基酸同源性最高为98.19%,与国外毒株的同源性为95.67%～97.83%。在进化树上与YZ081/SD/CHN/2005/CB5株显示在同一个分支上。结论分离的肠道病毒为柯萨奇病毒B组5型(CVB5),分离株(KMA193-09)VP1区变异较小。
- 李华杨卉娟柯华昕陈俊英潘玥赵玉娇孙强明马绍辉
- 关键词：无菌性脑膜炎VP1基因
- 粪便中脊髓灰质炎病毒IgA的ELISA检测方法比较
- 2010年
- 脊髓灰质炎是由脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型引起的传播广泛且危害极大的急性传染病。黏膜免疫在抗脊髓灰质炎免疫应答过程中颇为重要。局部黏膜分泌物（如唾液、肠液）中特异性IgA是机体接种口服脊髓灰质炎减毒活疫苗（OPV）或者自然暴露于脊灰病毒的一种重要免疫标志，同时也可作为评价黏膜免疫应答的主要指标。
- 杨卉娟马绍辉陈俊英施海晶孙强明李琦涵
- 关键词：脊髓灰质炎病毒ELISA检测口服脊髓灰质炎减毒活疫苗黏膜免疫应答粪便
- Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗
- 廖国阳孙明波李琦涵姜述德褚嘉祐谢忠平杨净思蔡玮衡燮周健杨卉娟车艳春杨晓蕾陈洪波李卫东易力洪超张新文俞詠霆姜莉宋霞张丽旌
- 脊髓灰质炎(以下简称脊灰)是由脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型引起肢体松弛性麻痹的急性传染病，常引起终身残疾，给患者及其家庭造成严重摧残。脊灰灭活疫苗(IPV)和口服脊灰减毒活疫苗(OPV)在全球广泛的使用，脊灰得到有效控制。198...
- 关键词：
- 关键词：脊髓灰质炎灭活疫苗传染病
- Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗对大鼠的免疫效果被引量：1
- 2007年
- 目的比较不同浓度Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin IPV)3针免疫大鼠的中和抗体效价,为确定Sabin IPV的最佳免疫方案提供参考。方法用不同浓度的Sabin IPV对52只Wistar大鼠进行3针免疫,每针间隔1个月,每次免疫后30d采血并分离血清,采用微量中和试验测定血清中抗脊髓灰质炎病毒3个型的中和抗体效价。结果大鼠经3针Sabin IPV免疫后,其Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体的几何平均滴度均显著上升,2针免疫后抗体阳转率已经达到100%,且原倍疫苗与稀释疫苗免疫大鼠后,产生的中和抗体水平差异有显著意义。结论Sabin IPV在大鼠中有良好的免疫效果,经3针免疫可产生高水平的中和抗体。
- 邱丰李映波丁士磊罗振武宋霞杨卉娟张新文陈俊英姜述德廖国阳
- 关键词：脊髓灰质炎灭活疫苗免疫效果阳转率中和抗体
