李惠贞
- 作品数：9 被引量：55H指数：5
- 供职机构：深圳市中医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 苦参碱诱导淋巴细胞白血病L1210细胞凋亡的实验研究被引量：10
- 2010年
- 目的在体外培养条件下,观察苦参碱对L1210细胞的损伤效应,探讨苦参碱的作用机制,期待为临床白血病治疗提供新的思路。方法取对数期生长的L1210细胞,在细胞培养板每孔接种1×105/孔,培养24 h后,加入终浓度为0.5 g/L、1.0 g/L、2.0 g/L的苦参碱,对照组加入等体积的培养液。收集24 h、48 h和72 h的L1210细胞标本,台盼蓝染色观察直接损伤的作用,TUNNEL法观察诱导细胞凋亡的情况。结果苦参碱浓度越高,作用时间越长,L1210细胞台盼蓝拒染率越低,与对照组相比有显著性差异。高浓度的苦参碱(>0.5 g/L)对L1210细胞细胞凋亡才会有显著的影响(P<0.05),随着时间的延长,较高浓度的苦参碱也会显著影响L1210细胞的凋亡。结论苦参碱有杀伤白血病L1210细胞的作用,其机制可能是诱导细胞凋亡和直接损伤细胞膜。
- 张春雷周小梅吕琪张书楠陈桂冰李惠贞
- 关键词：苦参碱白血病细胞凋亡
- 泌尿系统疾病诊断和治疗操作对血清前列腺特异抗原检测的影响被引量：6
- 2016年
- 目的评估泌尿系统疾病诊断和治疗操作对血清前列腺特异抗原（PSA）检测的影响。方法将80例在深圳市中医院泌尿外科住院的男性患者纳入该研究,其中进行了直肠指检（DRE）的为13例,导尿术10例,硬式膀胱镜12例,前列腺活检术17例,经尿道前列腺切除术（TURP）28例。80例患者分别于泌尿系统疾病诊断和治疗操作前及操作后24h、3d、7d、14d采集血液标本进行血清总前列腺特异抗原（TPSA）和游离前列腺特异抗原（FPSA）测定。结果 DRE操作对TPSA和FPSA水平没影响,操作前后TPSA、FPSA水平差异均无统计学意义（P〉0.05）;导尿术和膀胱镜检查均能使血清TPSA和FPSA水平升高,操作前后比较差异有统计学意义（P〈0.05）,且持续时间较长（7~14d）。活检术和TURP术后24h血清TPSA和FPSA水平明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）,第3天开始降低,第14天血清TPSA和FPSA水平降至基线。结论 DRE对血清TPSA和FPSA检测没影响,而导尿术、膀胱镜、活检术和TURP等可使血清TPSA和FPSA水平不同程度地升高,但维持时间长短不同。
- 李惠贞余文辉温志鹏莫其农宋林立李春花周丹袁瑞罗胜华
- 关键词：泌尿系统前列腺特异抗原
- 实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值分析被引量：9
- 2015年
- 目的:探讨实时荧光PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值。方法:选取笔者所在医院妇产科2013年4月-2014年4月收治的102例感染人乳头瘤病毒患者作为研究对象,使用对照性试验的方案对检验结果进行分析,分别使用实时PCR与第二代杂交式捕获法HCⅡ检测102例患者的取样标本,结合患者的病理资料及两种检测的结果对检测的准确性和特异性进行对比。结果:实时荧光PCR与HCⅡ关于CIN-HPV的阳性检出率分别为91.7%和86.1%,对鳞状上皮病变和慢性宫颈炎阳性的检出率分别为58.8%和35.3%,在对此项的阳性检出率上,实时荧光PCR明显优于HCⅡ,差异有统计学意义(P<0.05),实时荧光PCR的阳性检出率为71.6%,HCⅡ的为62.7%,两组患者的检出率进行比较,实时PCR患者明显优于HCⅡ组患者,差异有统计意义(P<0.05),经过统计,两种方法的总符合率是81.0%,两种方法在CINⅡ及CINⅢ程度的宫颈病变具有较好相关性,同时发现实时荧光PCR的特异性与灵敏性均明显优于HCⅡ,差异均有统计意义(P<0.05)。结论:第二代杂交捕获法和实时荧光PCR技术均为临床上比较有效的检测人乳头瘤病毒的手段,这两种方法对HPV的诊断结果具有较高的相关性,然而,实时PCR技术相较HCⅡ有更好的特异性和灵敏性。
- 李惠贞
- 关键词：第二代杂交捕获法高危型人乳头瘤病毒
- PCR-反向点杂交法在结核杆菌耐药突变基因检测中的应用被引量：2
- 2013年
- 目的了解深圳结核病患者结核杆菌耐药基因突变和耐药情况,评价PCR-反向点杂交法检测结核杆菌耐药基因突变的方法学性能。方法采用PCR-反向点杂交法检测264例(初治患者141例,复治患者123例)临床分离结核杆菌菌株或经抗酸染色镜检为阳性的痰标本中结核杆菌13个耐药基因突变位点。以DNA测序法为金标准,评价PCR-反向点杂交法检测结核杆菌耐药基因突变的方法学性能。结果 264例结核病患者对4种常用抗结核药物中1种或以上耐药者90例,耐药率34.09%,其中耐多药率19.32%。141例初治患者耐药率为17.73%,耐多药率为4.96%。123例复治患者耐药率为52.85%,耐多药率35.77%。对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇的耐药率分别为22.73%、20.45%、15.91%和6.82%,相应最常见突变位点分别为315M、S531L、43M和306M2。突变位点检出率超过5%的为315M(28.74%)、43M(20.69%)、S531L(15.52%)、15M(8.62%)、306M2(6.90%)和H526Y(5.17%)。PCR-反向点杂交法检测结核杆菌耐药基因突变的敏感度为94.74%、特异度为100%、准确度为98.11%,Kappa值为0.958 4(95%CI:0.837 9～1.078 9)。结论深圳结核病患者对抗结核药物耐药率和耐多药率均较高,复治患者耐药率和耐多药率分别比初治患者高2倍和6倍,对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇的耐药性依次降低,相应最常见耐药基因突变位点分别为315M、S531L、43M和306M2。PCR-反向点杂交法检测结核杆菌耐药基因突变的敏感度、特异度和准确度均能满足临床要求,适合临床实验室使用。
- 何进才周丹劳诗欣李惠贞黄涛单万水
- 关键词：结核杆菌聚合酶链反应反向点杂交
- 实时荧光核酸恒温扩增技术在临床诊断女性生殖道感染中的应用价值被引量：2
- 2021年
- 目的探究实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)在临床诊断女性生殖道感染中的应用价值。方法收集2019年1月至2020年2月深圳市中医院就诊的生殖道感染女性患者的宫颈分泌物或尿液标本共95份。采取SAT对以上标本进行沙眼衣原体(CT)-RNA、淋病奈瑟菌(NG)-RNA、生殖支原体(MG)-RNA、解脲脲原体(UU)-RNA检测。观察以上4种病原体阳性检出率及其混合感染率,并分析比较不同临床诊断及不同年龄段患者中各病原体检出率结果差异。结果95例患者中,4种病原体均有阳性检出,单纯1种病原体感染64例(67.37%),其中UU29例(30.53%),CT16例(16.84%),NG11例(11.58%),MG8例(8.42%);2种或3种病原体混合感染有31例(32.63%),其中CT+UU混合感染占比最高,共计14例(14.74%);在不同临床诊断中,诊断为阴道炎患者中UU检出率显著高于宫颈炎及盆腔炎,差异具有统计学意义(P<0.05),MG、NG及CT检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);在不同年龄段中,年龄段在36~45岁之间女性生殖道感染者中UU阳性检出率显著高于其他年龄段(P<0.05),CT、NG及MG检出率比较无明显差异(P>0.05)。结论SAT在检测女性生殖道感染中灵敏度较高,其中UU是女性生殖道感染的主要病原体。
- 周丹李惠贞黄涛张德明谷大伟
- 关键词：女性生殖道感染检出率
- 新型冠状病毒核酸检测的性能验证及评价被引量：4
- 2022年
- 目的验证实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)检测系统的主要性能。方法参考《医学实验室质量和能力的要求》第1部分通用要求GB/T22576.1-2018和第10部分分子生物检验学领域的要求GB/T22576.10-2018对该实验室RT-qPCR检测SARS-CoV-2核酸的检测系统的符合率、重复性、检出限、抗干扰能力、交叉反应等性能特征进行验证及评价。结果该实验室与国家卫生健康委临床检验中心2020年第1、2次SARS-CoV-2室间质评标本的阳性符合率为92%,阴性符合率为100%,总符合率为95%,其中有1例阳性标本未检出阳性,系标本浓度低于最低检测限;弱阳性标本检测的靶基因ORF-1ab和N的Ct值的批内变异系数(CV)分别为1.38%和1.16%,批间CV分别为1.84%和1.72%,均小于5%;检测限浓度(500 copies/mL)标本5次重复检测SARS-CoV-2核酸结果均为阳性;在加入严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、磷酸盐缓冲液(PBS)、人冠状病毒NL63(NL63)、人冠状病毒HKU1(HKU1)、人冠状病毒229E(229E)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、人冠状病毒OC43(OC43)等标本检测中,SARS-CoV-2核酸检测结果均为阴性;在混有血液≤50%、黏蛋白≤0.9 mg/mL等内源性干扰物质的弱阳性标本检测中,SARS-CoV-2核酸检测结果均为阳性。结论RT-qPCR检测SARS-CoV-2核酸的检测系统的各项性能特征与厂家声明相符,可满足预期用途,适用于SARS-CoV-2的临床常规筛查检测。
- 周丹何进才李惠贞黄涛谷大伟张德明罗胜华
- 关键词：新型冠状病毒核酸检测聚合酶链反应
- 1844例新型冠状病毒核酸检测及生物安全防护实践被引量：13
- 2020年
- 目的通过新型冠状病毒核酸检测实践,探讨实时荧光定量RT-PCR检测新型冠状病毒的质量管理和生物安全防护。方法采集2020年1月30日-2020年2月28日就诊于深圳中医院发热门诊的患者(包括发热患者、湖北旅居者以及密切接触者、外地返深人员)的咽拭子、痰液、肺泡灌洗液、肛拭子等样本,共1844例,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测新型冠状病毒开放读码框1ab(ORF1ab)、核衣壳蛋白(N)基因。结果1844例样本中,检测出阳性病例2例。结论严格的质量控制和有效的生物安全防护保证了新冠核酸检测安全高效的开展,及时准确的检测结果为新冠肺炎的早发现、早诊断、早治疗提供精准依据。
- 周丹何进才黄涛李惠贞张德明谷大伟罗胜华
- 关键词：新型冠状病毒核酸检测生物安全防护
- 基因分型同耐药位点突变在乙型肝炎的相关性探讨
- 2015年
- 目的分析探讨基因分型同耐药位点突变在乙型肝炎的相关性。方法选取我院2010年2月-2014年2月收治的慢性乙型肝炎患者350例,采取聚合酶链反应-反向点杂交方法检测患者耐药位点和基因分型,收集患者性别、年龄、血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量、ALT指标、核苷酸类似物用药时间以及HBe Ag指标等临床资料进行统计学分析。结果 350例患者标本均成功扩增阳性条带,肝炎病毒基因分型如下:B型261例,C型80例,D型9例;应用核苷酸类似物的310例患者中265例均为完全野生型,其余45例耐药突变点主要以204,204/180位点为主,未用核苷酸类似物的40例患者未见耐药点突变现象。耐药突变和患者年龄、性别、HBV DNA载量、ALT指标、HBe Ag等无明显相关性(P>0.05),与患者应用核苷酸类似物有关,且时间越长,突变概率越大(P<0.05)。结论 HBV基因分型主要以B型为主,PCR-反向点杂交方法可有效的对突变位点和基因分型进行检测,突变位点与核苷酸类似物有关,对临床上患者用药具有重要的指导意义。
- 李惠贞李秀玉黄涛
- 关键词：乙型肝炎基因分型
- 荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒核酸的性能验证及评价被引量：9
- 2019年
- 目的荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的性能验证及评价。方法参考ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则(2012年)》,以及美国临床和实验室标准化协会(CLSL)EP系列文件的相关要求对实验室HBV DNA荧光定量PCR检测系统的精密度、正确度、可报告范围、抗干扰能力进行验证及评价。结果精密度:HBV DNA定量检测高浓度(106 IU/mL)和低浓度(103 IU/mL)标本的对数值批内变异系数分别为0.67%和3.65%,批间变异系数分别为1.72%和4.52%;正确度:标准物质标本检测结果的对数值与厂商给定靶值浓度的对数值差值在±0.4个Log值内;可报告范围:试验试剂在(2.22×10)～(2.22×108)IU/mL范围内具有良好的线性,线性回归方程为Y=1.027 X-0.408,R2=0.995,≥0.95;抗干扰能力:说明书浓度的干扰物质(血红蛋白、三酰甘油、胆红素)标本结果与不含干扰物质标本比较,其浓度的对数值偏倚CV<7.5%,对数值差值在±0.4个Log值内。结论荧光定量PCR仪检测HBV DNA试剂的各项性能特征与厂家声明相符,满足预期用途,适用于临床常规检测。
- 周丹何进才李惠贞黄涛罗胜华张德明
- 关键词：乙型肝炎病毒荧光定量聚合酶链反应
