李剑欣
- 作品数：5 被引量：108H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 大肠杆菌色氨酸生物合成途径关键酶的调控研究被引量：6
- 2008年
- 为了通过基因工程手段提高大肠杆菌色氨酸产量,对色氨酸生物合成途径中的关键基因trpR、tnaA、aroG和trpED进行了改造。首先通过敲除trpR基因解除了基因组上色氨酸合成和转运关键酶受到的反馈阻遏调控,进而又敲除了tnaA基因,阻断了色氨酸的分解代谢。然后,将色氨酸合成途径的关键酶aroGfbr和trpEDfbr基因串联表达,以去除色氨酸生物合成途径的瓶颈。与对照MG1655相比,trpR基因单敲菌色氨酸浓度提高了10倍,双敲菌色氨酸浓度提高了约20倍。pZE12-trpEDfbr转入双敲菌后色氨酸浓度提高到168mg/L,而将aroGfbr和trpEDfbr转入双敲菌后,色氨酸浓度提高到820mg/L。为构建色氨酸高产菌奠定了基础。
- 于金龙王静李剑欣郭长江黄英武徐琪寿
- 关键词：色氨酸
- 大肠杆菌色氨酸生物合成分支途径调控研究
- 色氨酸作为动物体内必需的氨基酸成分，对于人和动物的生长发育及其新陈代谢都有着重要的意义。目前，色氨酸在制药、饲料和食品行业都有广阔的应用空间，国内国际市场对色氨酸的需求量也在不断增加。但是一直以来，由于色氨酸的生物合成途...
- 李剑欣
- 关键词：大肠杆菌色氨酸生物合成基因工程菌
- 文献传递
- 大肠杆菌邻氨基苯甲酸合成酶编码基因trpED的克隆与表达被引量：3
- 2007年
- 目的:通过基因重组的方法获得在体外具有邻氨基苯甲酸合成酶活性的基因trpED,为进一步解除反馈抑制的基因改造寻找靶标。方法:分别构建重组质粒pBV220-trpE和pBV220-trpD;由于trpE和trpD存在翻译偶联现象,将其自大肠杆菌基因组中经PCR扩增得到,构建新的表达质粒pBV220-trpED。结果:SDS-PAGE显示,包含质粒pBV220-trpED的重组菌在相对分子质量约53000(trpE基因表达)和56000(trpD基因表达)处的蛋白表达量明显增多,且邻氨基苯甲酸合成酶活性是对照的3倍。结论:翻译偶联的存在直接影响蛋白活性的发挥;重组质粒pBV220-trpED的获得为进一步的基因改造,以提高色氨酸产量奠定了研究基础。
- 李剑欣郭长江刘云林维平张绪梅徐琪寿
- 关键词：色氨酸生物合成
- 基因工程在L-色氨酸生产中的应用研究进展被引量：8
- 2005年
- 尽管L-色氨酸的生产已取得诸多进展,但由于其合成代谢途径长、调控复杂,故一直未能达到工业化生产的要求。本文主要概述近年来通过构建色氨酸合成酶和色氨酸酶基因工程菌株与酶法相结合来生产L-色氨酸方面的进展及其局限性,并从增加前体物质代谢流、限速酶量和消除途径抑制因素等方面着重论述第三代基因工程———代谢工程在L-色氨酸生产方面的研究状况,指出代谢工程育种为今后色氨酸育种的主要方向。
- 张绪梅郭长江李剑欣徐琪寿
- 关键词：L-色氨酸基因工程代谢工程
- 色氨酸的生理生化作用及其应用被引量：96
- 2005年
- 主要介绍了色氨酸在人体内的生理作用、代谢途径及其在医学和工业领域的应用。
- 李剑欣张绪梅徐琪寿
- 关键词：色氨酸生理功能代谢
