张鹤龄
- 作品数：95 被引量：473H指数：15
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金香港王宽诚教育基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 分子生物技术在马铃薯抗病毒育种中的应用被引量：4
- 1998年
- 分子生物技术在马铃薯抗病毒育种中的应用赵福宽，张鹤龄，郑用琏，刘纪麟马铃薯病毒病害每年都给世界马铃薯生产造成巨大损失，严重阻碍了马铃薯生产的发展，解决这一问题的根本途径是培育高度抗病毒的优良品种。近年来应用分子生物技术进行马铃薯抗病毒的研究在国内外都...
- 赵福宽张鹤龄郑用琏郑用琏
- 关键词：马铃薯抗病毒育种分子生物技术
- 抗卷叶病毒（PLRV）转基因马铃薯栽培种及其抗病性研究被引量：41
- 1995年
- 应用本室合成、克隆的马铃薯卷叶病毒（Ｐｏｔａｔｏｌｅａｆｒｏｌｌｖｉｒｕｓ，ＰＬＲＶ）中国分离株的外壳蛋白（ＣＰ）基因，通过致瘤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）介导，以马铃薯叶园片为转化材料，转化了马铃薯Ｄｅｓｉｒｅｅ、Ｆａｖｏｒｉｔａ、虎头和乌盟６０１，并获得了上述四个栽培种的转基因植株，成功地建立了一种简单、快速和效率高的转化体系，卡那霉素抗性、ＰＣＲ扩增目的基因、Ｓｏｕｔｈｅｍ和Ｎｏｒｔｈｅｍｂｌｏｔ分析证明，ＰＬＲＶ外壳蛋白基因已经稳定整合进入转基因马铃薯的染色体组中，并在转录水平上得到表达。窄缝转移分析（Ｓｌｏｔｂｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓ）表明，每个转化体四倍体基因组中含有１－５个ＣＰ基因拷贝。转基因植物的接种试验证明，转基因工程植株中的ＰＬＲＶ滴度比未转基因的对照植株显著低。蚜虫传播试验证明，转基因植株可减少蚜虫在田间传播ＰＬＲＶ的效率，限制了ＰＬＲＶ的传播，减少田间植物发病的机会。
- 张鹤龄李天然哈斯阿古拉额尔敦张彤孙燕庞瑞杰
- 关键词：基因工程马铃薯马铃薯卷叶病毒抗病性
- 抗马铃薯X病毒单克隆抗体的制备被引量：1
- 1990年
- 用提纯的PVX病毒免疫Balb/C小鼠,取其脾细胞和骨髓瘤细胞SP_2/O融合,经过两次克隆化获得B_5和D_3两个能持续分泌抗体的杂交瘤细胞株。B_5和D_3杂交瘤的细胞分泌的免疫球蛋白亚类分别为IgG_1和IgG_3,只有D_3可诱发高滴度腹水。
- 郭素华关兵杜强根张鹤龄
- 关键词：马铃薯病毒单克隆抗体
- 病毒外壳蛋白基因在马铃薯基因组中的整合与转录表达被引量：10
- 1999年
- 以表达马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因的转基因马铃薯植株为供试材料，在接种病毒后续发感染条件下提取转基因植株ＤＮＡ和ＲＮＡ，用克隆的病毒ＣＰ基因ｃＤＮＡ为探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，结果表明，外源ＣＰ基因稳定整合于马铃薯基因组内，并在转录水平上高效表达．
- 赵福宽张鹤龄李天然李天然郑用琏哈斯阿古拉
- 关键词：外壳蛋白基因转录转基因马铃薯马铃薯病毒病
- 日本脑炎病毒(JEV)内蒙古分离株M73-1E基因的5′端克隆及部分序列分析
- 2000年
- 根据国外报道的 JEV( Japanese encephalitis virus)基因组全序列 ,针对 JEV E基因 5′端设计合成一对特异引物 ,以日本脑炎病毒内蒙古分离株 M73-1 RNA为模板 ,经 RT-PCR扩增 ,获得 366bp的 JEV E基因 c DNA片段 .将此片段重组于质粒 p UC1 9中 ,并转化大肠杆菌DH5α.经 PCR扩增 ,酶切及序列分析 ,结果表明 JEV M73-1 5′端 1 2 6个核苷酸序列与 JEV日本 Nakayama株和 Ja OAr S982株的同源性分别为 96.8%和 96.8% ,氨基酸序列同源性均为 99.2 % .通过对病毒基因组结构分析从分子水平上进一步证实了 1 973年在呼和浩特市流行的脑炎是由 JEV引起的流乙脑炎 .E基因编码 JEV的囊膜糖蛋白 ,是其重要表面抗原 .JEV M73-1 E基因 5′端克隆和部分序列分析对 JEV的分子生物学研究。
- 张彤秦毅强张鹤龄张丽英郭志荣
- 关键词：日本脑炎病毒E基因克隆
- 二价核酶基因构建及对PLRV负链靶序列的体外切割研究被引量：1
- 2012年
- 根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)中国分离株(PLRV-Ch)复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR;同时将包含核酶切割识别位点的PLRV-Ch复制酶基因cDNA近5'端的874 bp片段反向插入到pGEM-4Z中,构建了体外转录载体pGEM-4ZR5。以线性化的重组质粒pGEM-4ZDR和pGEM-4ZR5为模板,在T7 RNA聚合酶的作用下,分别转录获得核酶RNA和PLRV-Ch复制酶基因5'端负链RNA底物片段。将以上2种RNA转录物混合并经37℃保温后,检测结果表明,所得核酶RNA对PLRV-Ch复制酶基因负链RNA在体外具有较强的特异切割活性。
- 张剑峰张鹤龄于嘉林迟胜起贺秀芳郝文胜杨静华
- 关键词：马铃薯卷叶病毒复制酶基因体外切割
- 用^（32）P标记cDNA探针进行核酸斑点杂交检测马铃薯卷叶病毒（PLRV）被引量：10
- 1995年
- 利用克隆的马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因测ｃＤＮＡ，用切口平移法制成￣（３２）Ｐ标记探针，通过核酸斑点杂交，对马铃薯卷叶病毒ＲＮＡ，提纯的马铃薯卷叶病毒和感染ＰＬＲＶ的马铃薯茎、叶、块茎及带毒桃蚜进行了检测。结果表明：ＰＬＲＶ－ＣＰ基因的ｃＤＮＡ探针特异性强，灵敏度高。可测出提纯的ＰＬＲＶ－ＲＮＡ的最低量为４０ｐｇ，感病马铃薯植株茎叶提取液的最高稀度为１：７５。探针只与ＰＬＲＶ及其ＲＮＡ反应，而不与ＰＶＹ、ＰＶＳ等病毒及其ＲＮＡ反应。从而为马铃薯卷叶病毒的有效诊断，建立了一项比血清学更为可靠、灵敏、特异性强，同时又适于大量样品检测的分子生物学方法。
- 扈惠平哈斯阿古拉张鹤龄
- 关键词：马铃薯卷叶病毒核酸斑点杂交CDNA探针
- 我国马铃薯抗病毒基因工程研究进展
- 本文概述了我国90年代马铃薯抗病毒基因工程研究进展。10年来我国已合成克隆了 PVX,PVY,PLRV 的外壳蛋白基因,复制酶基因,蛋白酶基因,基因调控序列,核酶 cDNA 及其他各种基因并进行了序列分析。建立并完善了致...
- 张鹤龄
- 关键词：抗病毒基因工程转基因马铃薯
- 文献传递
- 马铃薯干腐病镰刀菌初步研究
- 镰刀菌是引起多种农作物腐烂病的重要致病菌之一，其寄主广泛，还可以引起许多木材等经济作物的腐烂，而且部分镰刀菌还会产生毒素，对生产生活及人们的健康造成了极大的危害。本文着重介绍引起马铃薯块茎干腐病的镰刀菌的生物学特征及相关...
- 杜密茹张鹤龄
- 关键词：马铃薯干腐病镰刀菌生物学特征
- 文献传递
- RNA干扰技术及其应用
- RNA干扰(RNA Interfering，RNAi)是一种由双链RNA引起的序列特异性基因沉默，介导对内外源性病理性核苷酸及侵入微生物的抵抗，并在染色质水平、转录水平、转录后水平和翻译水平层次上参与基因表达的调控。这种...
- 赵海明张鹤龄
- 关键词：RNA干扰双链RNA基因沉默
- 文献传递
