孙英民
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：河北农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划河北省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 家禽血液基因组DNA的快速提取被引量：4
- 2010年
- [目的]建立一种应用硅胶膜提取禽血DNA的新方法。[方法]应用硅胶膜法和传统的酚/氯仿法提取抗凝禽血基因组DNA,设计合成了一对2.7 kb的鸡卵清蛋白基因的引物,检测这2种方法提取的基因组DNA模板对聚合酶链式反应(PCR)扩增效率的影响。[结果]用硅胶膜法提取的基因组DNA产量和质量均比传统的酚/氯仿法高,将该法提取的基因组DNA作为模板能够消除抗凝剂对后续PCR反应的影响。[结论]硅胶膜法为快速提取高质量的禽血基因组DNA奠定了基础。
- 孙朕孙英民郑素月樊宝良
- 关键词：聚合酶链式反应
- 人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA克隆及测序
- 2011年
- 试验利用PCR技术扩增并获得了人IL-3、GM-CSF和人溶菌酶(human lysozyme,Hly)基因组基因编码区序列,人IL-3和GM-CSF基因PCR产物与pMD19-T连接,Hly基因PCR产物同pEASY-Blunt载体连接,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,蓝白斑筛选后经PCR及酶切鉴定,选取测序正确的克隆连接到pIRESneo载体中构建相关真核表达载体,分别用这些基因的表达载体转染PK15细胞,48 h后提取转染细胞的总RNA,并采用RT-PCR方法获得了人IL-3、GM-CSF和Hly基因的cDNA,结果发现,所获得的cDNA序列同NCBI登录的序列完全同源。
- 孙英民孙朕樊宝良
- 关键词：GM-CSF基因CDNA克隆测序
- 人IL-3、GM-CSF及溶菌酶基因cDNA的克隆
- 本研究旨在先从人的血液中直接提取基因组DNA，通过PCR扩增人的基因，再利用瞬时转染和RT PCR获得人cDNA序列的方法。这种方法的优势在于不但可以满足慢病毒载体携带外源DNA长度限制的需要，而且还可以避免采集人的相关...
- 孙英民孙朕樊宝良
- 关键词：GM-CSF基因溶菌酶基因
- 文献传递
