冯琮
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:华南理工大学更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的毕赤酵母的发酵优化
- 酵母表面展示技术(Yeast surface display technology)作为真核展示系统,已逐渐成为现代生命科学领域一种十分有效的展示技术。近十几年来,随着酵母表面展示技术的不断改进和完善,该技术在许多领域都...
- 冯琮
- 关键词:发酵优化酵母表面展示
- 文献传递
- 表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的重组毕赤酵母高密度发酵条件优化被引量:3
- 2010年
- 以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticlipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40g/L、硫酸铵4g/L、PTM14mL/L和CaSO410mmol/L;然后利用多功能补料摇床确定了菌株最适生长和产酶的pH分别为5.5和7.0,最适生长和产酶温度为30℃;再在2L发酵罐上放大,并对甘油流加模式和甲醇流加模式进行了优化筛选,确定了以9.6mL/(L.h)的流速流加甘油12h能有效提高菌体密度;以6.4mL/(L.h)的流速恒速流加甲醇比恒定溶氧流加甲醇诱导产酶更佳。最终单位菌体酶活力可达348.4U/g,比甘油含量40g/L、硫酸铵10g/L、PTM14.35mL/L、CaSO40.93g/L,以6.4mL/(L.h)的流速流加甘油4h和以恒定溶氧流加甲醇的未优化条件下提高34.8%。最后通过细胞表面荧光强度检测和全细胞催化合成活力对比,发现优化后单位菌体展示的蛋白表达量得到提高。
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- 关键词:发酵优化酵母表面展示