苏国栋
- 作品数：12 被引量：22H指数：3
- 供职机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 南极假丝酵母脂肪酶B基因及其在酵母展示中的应用
- 本发明南极假丝酵母脂肪酶B基因及其在酵母展示中的应用。改良的南极假丝酵母B其编码的蛋白与野生型南极假丝酵母脂肪酶蛋白在氨基酸水平具有相同的功能，其酶的耐热能力为50－80℃，半衰期为3h－24h，核苷酸序列在中度严谨条件...
- 林影韩双艳苏国栋郑穗平黄登峰
- 文献传递
- 南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因在毕赤酵母中的展示表达
- 通过基因组扩增得到南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因,插入到构建的重组质粒pPIC9K—Folp将得到的重组质粒pPIC9K-Folp-CALB用电转移的方法转入毕氏酵母Gs115。用含不同G418浓度的YPD平板筛选...
- 苏国栋韩振林韩双艳林影
- 南极假丝酵母脂肪酶B基因及其在酵母展示中的应用
- 本发明南极假丝酵母脂肪酶B基因及其在酵母展示中的应用。改良的南极假丝酵母B其编码的蛋白与野生型南极假丝酵母脂肪酶蛋白在氨基酸水平具有相同的功能，其酶的耐热能力为50-80℃，半衰期为3h-24h，核苷酸序列在中度严谨条件...
- 林影韩双艳苏国栋郑穗平黄登峰
- 文献传递
- 表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的重组毕赤酵母高密度发酵条件优化被引量：3
- 2010年
- 以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticlipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40g/L、硫酸铵4g/L、PTM14mL/L和CaSO410mmol/L;然后利用多功能补料摇床确定了菌株最适生长和产酶的pH分别为5.5和7.0,最适生长和产酶温度为30℃;再在2L发酵罐上放大,并对甘油流加模式和甲醇流加模式进行了优化筛选,确定了以9.6mL/(L.h)的流速流加甘油12h能有效提高菌体密度;以6.4mL/(L.h)的流速恒速流加甲醇比恒定溶氧流加甲醇诱导产酶更佳。最终单位菌体酶活力可达348.4U/g,比甘油含量40g/L、硫酸铵10g/L、PTM14.35mL/L、CaSO40.93g/L,以6.4mL/(L.h)的流速流加甘油4h和以恒定溶氧流加甲醇的未优化条件下提高34.8%。最后通过细胞表面荧光强度检测和全细胞催化合成活力对比,发现优化后单位菌体展示的蛋白表达量得到提高。
- 冯琮林影梁书利苏国栋韩双艳
- 关键词：发酵优化酵母表面展示
- 重组脂肪酶全细胞催化单糖酯的合成被引量：2
- 2009年
- 利用毕赤酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipaseB,CALB)为全细胞催化剂,以不同单糖(葡萄糖、果糖和甘露糖)为酰基受体,不同脂肪酸(月桂酸、油酸和棕榈酸)为酰基供体,在以不同有机溶剂为介质的非水相体系中催化合成糖酯。探讨全细胞脂肪酶CALB合成糖酯的反应条件,结果表明:毕赤酵母表面展示CALB全细胞催化剂在叔戊醇/二甲基亚砜(4:1,v/v)介质中可以有效的合成糖酯,研究中各种酰基受体和酰基供体在全细胞脂肪酶催化下均能合成糖酯,其中果糖作为酰基受体产物浓度最高。
- 任昌琼郑穗平林影苏国栋韩双艳
- 关键词：酵母全细胞催化糖酯薄层色谱分析
- 毕赤酵母表面展示南极假丝酵母脂肪酶B催化合成葡萄糖酯
- @@糖酯作为一种生物功能分子和化工原料具有重要价值。高级脂肪酸糖脂是一种高效无毒的非离子表面活性剂，它广泛应用于食品，医药，发酵及石油化学工业领域。与传统化学法的高能耗，高三废以及废物难以处理等缺点相比，酶法合成糖酯具有...
- 任昌琼郑穗平韩双艳苏国栋林影
- 关键词：催化合成
- 文献传递
- 展示南极假丝酵母脂肪酶B的毕赤酵母全细胞催化合成短链芳香酯被引量：11
- 2009年
- 展示酶的酵母细胞作为全细胞催化剂,既具有固定化酶的优点,又有制备简单、成本较低的特点。本研究将细胞表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctica lipase B,CALB)的重组毕赤酵母用于非水相中催化合成短链芳香酯,通过滴定和气相色谱的方法测定底物酸的转化率,从底物的碳链长度、醇的结构、酵母冻干粉的添加量、底物浓度及底物的酸醇摩尔比等方面考察了展示CALB的毕赤酵母全细胞催化合成短链芳香酯的特性。研究结果表明:该全细胞催化剂可催化C10以下的酸和醇直接酯化合成多种短链芳香酯,酸的转化率达到90%以上;其中己酸和乙醇为酶的最适底物;酵母冻干粉的添加量20g/L(306.0U/g-drycell)、己酸浓度0.8mol/L、酸醇摩尔比1:1.1是合成己酸乙酯的最佳条件。在此条件下反应1.5h,己酸的转化率达到97.3%。在现有的关于脂肪酶非水相催化合成短链芳香酯的报道中,该全细胞催化剂显示出较好的底物耐受性以及较高的催化反应速率。因此,展示CALB的毕赤酵母全细胞催化剂在合成短链芳香酯方面具有较大的商业化应用潜能。
- 金子林影黄登峰苏国栋韩双艳
- 关键词：酵母表面展示全细胞催化
- 外源脂肪酶在毕氏酵母表面展示及发酵过程分析被引量：4
- 2010年
- 分别考察基于絮凝素和凝集素2种不同展示系统,展示有外源脂肪酶CALB(Candidan Antarctica lipase B)的重组展示酵母的展示酶活、上清酶活,发现毕赤酵母作为宿主在外源脂肪酶展示过程会分泌目的蛋白至上清中,引起"外泄",进一步通过重组展示酵母外源蛋白鉴定、外源蛋白去糖基化、发酵过程中蛋白变化趋势观察,表明基于絮凝素系统的非共价锚定是引起展示过程中蛋白外泄比例过高的主要原因,研究为实现脂肪酶在毕赤酵母细胞的高效展示进而提高展示酶的催化效率提供了理论指导。
- 张溪韩双艳苏国栋郑穗平林影
- 南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母细胞表面高效展示体系的构建与定向进化研究
- 随着基因工程的发展,微生物细胞表面展示系统已发展出噬菌体展示系统、细菌表面展示系统、酵母表面展示系统等,广泛应用在生物学研究的许多领域,例如研究蛋白质-蛋白质之间的相互识别与相互作用、由多肽构象或蛋白质突变库中获取特定功...
- 苏国栋
- 关键词：非水相定向进化
- 文献传递
- 酵母展示脂肪酶发酵生产及应用研究
- 林影韩双艳郑穗平王小宁吴晓英韩振林苏国栋黄登峰金子
- 脂肪酶是重要的工业酶制剂之一，除了可以水解脂肪产生脂肪酸与醇外，在非水相中可催化解脂、酯交换、酯合成等反应，具有良好的化学、立体和对映体的结构选择性，因此在食品、精细化工品和医药化工品制造等领域上有着广阔的应用前景。国外...
- 关键词：
- 关键词：脂肪酶工业酶制剂发酵工艺
