赵成桂 作品数:11 被引量:47 H指数:4 供职机构: 东南大学附属中大医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省中医药管理局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人乳腺珠蛋白mRNA FQ-PCR检测方法的建立及对乳腺癌微小转移的研究 目的:克隆人乳腺珠蛋白(humanmammaglobin,hMaM)基因,建立荧光定量PCR方法,探讨外周血hMaMmRNA的表达作为乳腺癌血行微小转移标志物的可能性.
方法:通过设计特异引物,用RT-PCR方... 吴国球 张臣 孙宏伟 赵成桂 芦惠霞关键词:乳腺珠蛋白 荧光定量PCR 乳腺癌 MRNA表达 文献传递 地龙2号抑制大鼠肝纤维化的研究 被引量:20 2004年 目的 研究地龙2号抑制大鼠肝内纤维组织形成的作用。方法 雄性Wistar大鼠,随机分成6组:正常组:不做药物处理;阴性对照组:皮下注射花生油,单灌蒸水;模型组:皮下注射CCl4,每日单蒸水灌胃;阳性对照组:造模方法同模型组,用秋水仙碱每日0.1 mg/kg灌胃;地龙大剂量组:造模同时用地龙2号每日50mg/kg灌胃;地龙小剂量组:造模同时用地龙2号每日25mg/kg灌胃。于8周末处死大鼠,取血测血清ALT、AST、AST/ALT,放射免疫法检测透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN),取肝组织作HE染色,病理分级。结果 地龙2号组与模型组相比,病理示肝纤维化程度明显减轻(P<0.05),肝细胞损害亦轻(AST/ALT大剂量组P<0.05,小剂量组P<0.01),且反应肝纤维化的指标HA及LN均显著降低(P<0.01)。结论 地龙2号有明显抑制大鼠肝纤维化形成的作用。 陆亚琴 刘顺英 陈洪 张治国 赵成桂关键词:地龙2号 肝纤维化 层黏连蛋白 梅毒不同检测方法的比较 2007年 目的通过与梅毒螺旋体-酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)的比较评价其它不同梅毒检测方法的检测效率。方法用国产TP-ELISA检测试剂盒检测阳性标本44例,分别用梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)对44例患者的血清标本进行检测,并将检测结果与TP-ELISA进行比较。结果TPHA与TP-ELISA符合率为97.73%,两者之间差异无统计学意义(P>0.05);TRUST与TP-ELISA符合率为38.63%,差异有统计学意义(P<0.05);FTA-ABS与TP-ELISA符合率为13.51%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TP-ELISA和TPHA可用来初筛梅毒,TP-ELISA更为简便、经济,便于质控。 赵成桂 吴国球 孙宏伟关键词:梅毒 酶联免疫吸附试验 梅毒螺旋体血凝试验 p[5HRE]AFPp-p53/PEI-Fe_3O_4磁性纳米颗粒联合磁流体热疗对肝癌细胞的抑制作用 被引量:5 2016年 目的:建立p[5HRE]AFPp-p53/PEI-Fe_3O_4磁性纳米颗粒靶向基因治疗和磁流体热疗系统用于肝癌的联合治疗,以提高治疗的安全性和有效性。方法:亚克隆基因重组法构建靶向肝癌的治疗基因p[5HRE]AFPp-p53,并用限制性内切酶凝胶电泳法检测重组质粒是否构建成功;用共沉淀法制备磁性纳米颗粒PEI-Fe_3O_4,利用透射电镜、粒径仪、傅里叶转换红外光谱仪等对PEI-Fe_3O_4进行表征检测。MTT法检测PEI-Fe_3O_4转染p[HRE]AFPp-p53至不同细胞系后的细胞增殖及磁流体热疗和基因治疗联合作用对肝癌细胞Hep G2的增值抑制作用。结果:成功制备载有靶向治疗基因的p[5HRE]AFPp-p53/PEI-Fe_3O_4磁性纳米颗粒,由其介导的基因治疗组与阴性及纳米颗粒对照组相比,明显抑制肝癌Hep G2(AFP阳性)细胞[(0.592±0.041)vs(1.052±0.031)、(1.012±0.021),P<0.01]和SMMC7721(AFP阴性)细胞(0.813±0.042)vs(1.073±0.032)、(1.182±0.052),P<0.01]的增殖活性,但对非肝癌细胞(L929和Lovo)增殖抑制作用无明显影响(P>0.05)。基因治疗和磁流体热疗联合组与单独使用热疗组及基因治疗组相比显著增加Hep G2细胞的增殖抑制率(76.11%vs 35.22%、42.92%,均P<0.01)。结论:p[5HRE]AFPp-p53/PEI-Fe_3O_4磁性纳米颗粒对肝癌细胞具有特异性杀伤作用,并且能与磁流体热疗产生协同效应,是一种选择性高、治疗效果好的肿瘤治疗方法。 赵成桂 袁晨燕 吴国球关键词:HEPG2细胞 SMMC7721细胞 靶向基因治疗 磁性纳米颗粒 磁流体热疗 乳腺珠蛋白基因的克隆及重组蛋白的表达和纯化 目的:克隆人乳腺珠蛋白(hMaM)基因,获得高纯度hMaM重组蛋白.
方法:从人乳腺癌组织提取总RNA,逆转录合成cDNA,设计特异引物,用PCR方法扩增获得目的片段,利用T/A克隆将PCR产物插入pMD-18... 吴国球 张臣 孙宏伟 赵成桂 芦惠霞关键词:乳腺珠蛋白 乳腺癌 基因克隆 基因表达 重组蛋白纯化 文献传递 306份血标本乙肝5项指标定量与定性检测结果分析 被引量:3 2011年 目的:观察乙肝5项指标定量与定性检测结果的差异及临床意义。方法:对306份血标本分别采用ELISA法和化学发光法检测乙肝5项指标,并对结果进行系统分析。结果:ELISA法和化学发光法分别检测出7种和13种模式,两种方法的一致率分别为乙肝病毒表面抗原(HBsAg)98.8%,乙肝病毒表面抗体(HBsAb)82.4%,乙肝病毒e抗原(HBeAg)96.4%,乙肝病毒e抗体(HBeAb)78.2%和乙肝病毒核心抗体(HBcAb)59.2%;化学发光法检测HBeAb和HBcAb的阳性率显著高于ELISA法(P<0.001)。结论:定量检测乙肝5项指标敏感性高于常规定性检测方法;同一份标本用两种方法检测可出现不同的结果模式,应引起临床重视。 赵平 赵成桂 张臣 孙宏伟关键词:乙肝5项指标 miR-143/miR-145簇启动子区rs4705342基因突变与汉族人群前列腺癌发病的相关性研究 被引量:10 2019年 目的:选择miR-143/miR-145基因启动子区rs4705342突变位点,研究其与汉族人群前列腺癌发病率的相关性。方法:156例确诊为前列腺癌的患者为病例组,188例健康男性为对照组,采用TaqMan法对miR-143/miR-145基因启动子区rs4705342进行多态性检测;并针对肿瘤家族史、体质量指数(BMI)、年龄、吸烟及饮酒等进行分层分析。结果:病例组与对照组的年龄(P=0.32),BMI(P=0.79),吸烟(P=0.47)、饮酒(P=0.34)状况未发现有统计学意义,肿瘤家族史比例病例组显著高于对照组(P=0.01)。TT/CT联合基因型与CC基因型分布无统计学意义(P=0.07)。在不吸烟亚组中,CC基因型与TT/CT联合基因型的分布具有统计学意义(P=0.02);在饮酒亚组中,CC基因型与TT/CT联合基因型的分布具有统计学意义(P=0.03);在前列腺癌临床分期中,CC基因型与TT/CT联合基因型的分布未发现明显差异(P=0.81),PSA分层分析中CC基因型与TT/CT联合基因型的分布未发现明显差异(P=0.39)。结论:miR-143/miR-145簇启动子区rs4705342基因突变与汉族人群前列腺癌发病有明显关联。 赵成桂 徐鸿波 许斌关键词:前列腺癌 MIR-143 MIR-145 单核苷酸多态性 基因分型 汉族人群 乳腺珠蛋白基因的克隆及重组蛋白的表达和纯化 2006年 目的克隆人乳腺珠蛋白(hM aM)基因,获得高纯度hM aM重组蛋白。方法从人乳腺癌组织提取总RNA,逆转录合成cDNA,设计特异引物,用PCR方法扩增获得目的片段,利用T/A克隆将PCR产物插入pMD-18T载体。利用BamH I+XhoI双酶切方法将目的基因导入表达载体,阳性质粒转化BL21(DE3)感受态细胞,通过IPTG诱导获得重组蛋白,并用H is-SelectTM和Sephadex-G100进行纯化。结果用RT-PCR方法获得279 bp的片段,克隆至T载体后经DNA测序,结果与预期序列一致。表达质粒转化大肠杆菌后经诱导获得27 kD的目的蛋白,与预期分子质量一致。表达产物最终纯化为一条带。结论成功克隆hM aM基因,并获得高纯度重组蛋白,为hM aM的深入研究打下基础。 吴国球 张臣 孙宏伟 赵成桂 芦慧霞关键词:乳腺珠蛋白 乳腺癌 克隆 建立人乳腺珠蛋白mRNA FQ-PCR方法用于乳腺癌微小转移的诊断 被引量:4 2006年 目的克隆人乳腺珠蛋白(hum an m amm aglob in,hM aM)基因,建立荧光定量PCR方法,探讨外周血hM aM mRNA的表达作为乳腺癌血行微小转移标志物的可能性。方法设计特异引物,用RT-PCR方法从乳腺癌组织扩增获得目的片段,利用T/A克隆将PCR产物插入pMD-18T载体;优化扩增条件,以pMD/M质粒制备标准曲线,建立FQ-PCR方法,对乳腺癌不同分期的患者(n=28),乳腺良性疾病患者(n=15),其他肿瘤患者(n=33)的外周血进行检测。结果成功获得hM aM基因并完成克隆,阳性克隆测序结果与预期序列一致;建立了FQ-PCR检测hM aM mRNA方法;28例乳腺癌病人中9例(32.1%)阳性(Ⅰ期4例,Ⅱ期3例,Ⅲ期1例,Ⅳ期1例),hM aM mRNA的表达与乳腺癌病理分期无关(χ2=0.5936;P>0.05);乳腺良性疾病组,其他肿瘤病人组及对照组外周血中均未检出hM aM mRNA。结论hM aM mRNA是乳腺癌特异性标志物,其外周血的表达可作为乳腺癌血行微小转移的指标。 吴国球 张臣 孙宏伟 赵成桂 芦惠霞关键词:乳腺珠蛋白 荧光定量PCR 胃泌素的胃黏膜保护作用与环氧合酶-2表达 被引量:5 2004年 孙为豪 曹大中 欧希龙 胡家华 俞谦 陈洪 俞婷 赵成桂 孙运良 朱峰关键词:胃泌素 胃黏膜 环氧合酶-2 前列腺素