薛晓阳
- 作品数：11 被引量：25H指数：3
- 供职机构：内蒙古民族大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌表面蛋白nEBPS抗体的制备和纯化被引量：2
- 2015年
- 为了在原核细胞中表达金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白(EBPS),制备多克隆抗体,将构建的p ET30a-n EBPS重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,亲和层析法纯化重组蛋白,以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,ELISA方法检侧抗体滴度,亲和层析法纯化兔抗n EBPS多克隆抗体。结果显示,利用p ET30a-n EBPS重组质粒,经原核表达和亲和层析获得了n EBPS蛋白;利用n EBPS蛋白质制备多克隆抗体,间接ELISA检测的纯化抗体效价可达0.686(OD450值),P/N值达6.7。
- 锡林高娃薛晓阳吴金花布日额
- 关键词：多克隆抗体纯化
- 禽流感病毒A/duck/Fujian/31/2007(H5N1)株M1基质蛋白的原核表达与免疫原性鉴定被引量：1
- 2012年
- 经生物学软件DNAStar分析,参照已发表的禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)(H5N1)基因组序列,设计合成1对特异性引物,RT-PCR扩增了长约750bp的M1基因片段,将目的片段定向克隆至pET30a表达载体,经酶切及测序鉴定正确后转化BL21表达菌,经IPTG诱导获得以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后,BCA法测定纯化蛋白的浓度为0.656mg/mL,免疫印迹检测结果表明,纯化的重组蛋白具有良好的反应活性。将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测结果表明,重组蛋白可产生抗M1蛋白特异性抗体,具有良好的免疫原性。本研究成功表达了流感病毒H5N1的基质蛋白M1,且重组蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研制H5N1亚型流感病毒诊断试剂及基因工程疫苗奠定基础。
- 布日额吴金花孙立杰李明刚刘洋刘洋
- 关键词：原核表达
- 牛乳中致病性金黄色葡萄球菌nEBPS基因的克隆与原核表达产物抗原性研究
- 目的构建牛乳源性金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白(N-terminalelastinbindingproteinsofS.aureus，nEBPS)原核表达系统，并对其表达蛋白进行抗原性研究。 方法提取金黄色葡萄...
- 薛晓阳
- 关键词：间接ELISA原生质体
- 牛乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素A基因的克隆及序列分析被引量：4
- 2011年
- 根据GenBank上公布的金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcus enterotoxin A,SEA)基因的全序列,设计一对特异性引物扩增内蒙古分离株的SEA基因序列。经基因克隆和序列测定,表明扩增的基因片段长度为582 bp,与标准菌株ATCC13565的SEA基因片段序列相似性为100%,与GenBank上公布的金黄色葡萄球菌菌株(EF520720.1)SEA基因相似性达到99.14%。本研究结果为进一步研究建立牛乳中SEA分子检测技术奠定了实验基础。
- 唐吉思吴金花布日额张海宝薛晓阳刘洋张忠祥
- 关键词：金黄色葡萄球菌克隆
- 内蒙古中东部地区乳源性大肠埃希菌PCR检测及其耐药性分析
- 2012年
- 目的分离牛乳源性大肠埃希菌(E.coli)并进行PCR检测及耐药性分析。方法根据GenBank上公布的牛源致病性大肠埃希菌基因序列,利用Primer5.0和DNAMAN生物信息学软件,根据该致病菌基因组序列16S～23SrRNA间隔区保守序列设计并合成1对引物,对牛乳中分离的大肠埃希菌进行基因扩增和序列测定,同时利用琼脂平板扩散方法分析阳性菌株的耐药状况。结果大肠埃希菌基因PCR扩增产物为396bp,与预期片段大小相符;测序结果与GenBank上公布的牛源大肠埃希菌(X80731.1)基因序列相似性为97.22%,与标准菌株大肠埃希菌(CVCC247)基因序列相似性为100%。分离菌株普遍对卡那霉素、氧氟沙星、氟哌酸高度敏感,对四环素、氨苄青霉素高度耐药。结论成功分离出牛乳源大肠埃希菌菌株,该组分离菌对四环素和氨苄青霉素高度耐药,为进一步建立牛乳中致病性大肠埃希菌的分子检测方法及指导临床用药提供了依据。
- 刘洋刘洋布日额吴金花郭闯锡林高娃刘燕
- 关键词：大肠埃希菌药物敏感性
- 鹅大肠杆菌性腹泻的研究进展被引量：3
- 2013年
- 大肠杆菌在自然界中广泛分布,本属于人类和大多数温血动物肠道中的正常菌群,但是近年来,发现许多菌株可引起腹泻,甚至死亡.在鹅群中,腹泻性大肠杆菌是急性接触性传染,各种年龄的鹅均能感染,对种鹅的危害尤其严重,可使母鹅产蛋量下降甚至死亡,是严重威胁到养鹅业发展.本文针对鹅致腹泻性大肠杆菌存在现状、毒力病原学特点、流行病学、临床特征等方面的综合比较,进行分析说明,提出合理有效的防御措施,并且对快速检测和治疗鹅腹泻性大肠杆菌进展进行总结,强调在禽类养殖过程中重视对大肠杆菌病的防治.
- 刘洋任晓峰吴金花布日额薛晓阳
- 荧光定量PCR检测牛乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A基因方法的建立被引量：13
- 2012年
- 为建立检测牛乳中金黄色葡萄球菌(S.aureus)肠毒素A基因(SEA)定性定量的检测方法,本研究针对S.aureus SEA基因片段设计1对引物,将构建的重组质粒作为阳性对照,建立了S.aureus SEA DNA的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法。结果显示,特异性产物Tm值为78.2℃～78.5℃,最低可检测到49.5 fg/μL(16.5拷贝)的阳性质粒。标准曲线的相关系数为0.99。与其他常见的产SEB的S.aureus、产SEC的S.aureus、无乳链球菌、大肠杆菌、嗜热链球菌、伤寒沙门氏菌、大肠杆菌DH5α及JM109均无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和敏感性,为牛乳中S.aureus的快速检测提供了新的技术手段。
- 唐吉思布日额吴金花孙立杰薛晓阳刘洋丁铲
- 关键词：牛乳金黄色葡萄球菌肠毒素A荧光定量PCR
- 牛乳腺炎金黄葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2012年
- 目的克隆牛乳腺炎金黄葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白基因,并进行序列分析。方法根据Gen-Bank上公布的金黄葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白(nEBPS)基因的全序列,利用生物学软件Primer5.0和Oligo6.0设计了1对特异性引物,采用PCR方法扩增临床分离株nEBPS基因片段。结果扩增的基因片段长度为720bp,与标准菌株(CMCC26074)的nEBPS基因片段序列相似性为100%,与GenBank上公布的金黄葡萄球菌菌株(U48826.2)nEBPS基因相似性为97.36%,核苷酸序列共有19处出现碱基突变。结论成功克隆出牛乳腺炎金黄葡萄球菌SEB基因,为建立快速检测牛乳中金黄葡萄球菌的PCR检测方法奠定了基础。
- 薛晓阳吴金花布日额王学理刘洋刘洋刘洋刘燕锡林高娃孙立杰
- 关键词：金黄葡萄球菌克隆
- 牛乳腺炎无乳链球菌细胞表面菌毛岛屿辅助蛋白AP1基因编码抗原表位截短序列表达产物抗原性鉴定
- 目的 本实验通过克隆与高效表达无乳链球菌细胞表面菌毛岛屿辅助蛋白AP1基因编码蛋白抗原优势区,并进行抗原性分析及鉴定.方法 根据GENBANK上公布的牛乳腺炎无乳链球菌辅助蛋白AP1(EU929387.1)基因序列,...
- 刘洋吴金花布日额刘燕锡林高娃王学理薛晓阳
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- 牛乳腺炎金黄葡萄球菌肠毒素B基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2011年
- 目的克隆牛乳腺炎金黄葡萄球菌B(SEB)基因,并进行序列分析。方法根据GenBank公布的金黄葡萄球菌基因的全序列,利用生物学软件Primer5.0和Oligo 6.0设计1对特异性引物,扩增临床分离菌株的SEB基因片段。结果扩增的基因片序列长度为466bp,与标准菌株(CMCC26074)的SEB基因片段序列相似性为100%,与GenBank公布的金黄葡萄球菌菌株(AB479118.1)SEB基因序列相似性为99.93%。结论成功克隆出牛乳腺炎金黄葡萄球菌SEB基因,为建立相应的PCR快速检测牛乳SEB基因方法奠定了基础。
- 薛晓阳布日额吴金花刘洋
- 关键词：金黄葡萄球菌克隆
