臧超
- 作品数：21 被引量：92H指数：5
- 供职机构：中国计量科学研究院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
- 相关领域：一般工业技术机械工程农业科学生物学更多>>
- 转基因水稻TT51-1核酸定量检测试剂盒
- 本发明涉及一种转基因水稻TT51-1核酸定量检测方法和检测试剂盒。本发明筛选出了效果最好的适合转基因水稻TT51-1检测的内标准基因RBE4；通过对实时荧光定量PCR体系的优化，找到了适合转基因水稻TT51-1或其制品定...
- 王晶隋志伟李亮余笑波臧超董莲华
- 文献传递
- 转基因玉米pUC57-BT11质粒标准分子的构建与适用性研究被引量：5
- 2011年
- 构建了含有转化体特异性片段（BT11-93bp）和玉米的内标准基因片段（zSSIIb-151bp）的质粒分子pUC57-BT11，经酶切和测序验证后，对其特异性进行检查。采用测序和荧光定量PCR法对该质粒分子进行定值，结果为1．01±0．叭（k=2）。通过质粒分子和基因组DNA产生的内源和外源基因比较，发现两者标准曲线斜率无显著差异，线性相关系数均〉10．99。利用pUC57-BT11质粒分子对已知含量的转基因基体标准物质进行转基因含量测定，结果发现采用pUC57．BT11质粒分子对标准物质的测定结果与其标准值-致，表明pUC57-BT11质粒分子可作为转基因玉米BT11转化体特异性的定性和定量检测用标准物质。
- 董莲华李亮王晶赵正宜臧超
- 关键词：计量学转基因玉米标准物质
- 转基因水稻TT51-1质粒分子纯化技术及准确测量方法研究
- 转基因作物核酸的定量检测缺乏精确的方法和需要满足计量要求的标准物质。质粒分子作为理想的标准物质候选物，其分离纯化制备、定性定量分析等关键研制技术已成为转基因检测标准物质研制的突破方向。本工作以转基因水稻TT51-1定量检...
- 臧超
- 关键词：转基因水稻纯化技术标准物质
- 数字PCR测定DNA含量及测量结果不确定度评定被引量：11
- 2013年
- 数字PCR是一项不依赖校准物的DNA绝对定量技术,将含有DNA模板的反应溶液分配到大量独立的微室中并且进行扩增反应,通过统计反应室中的阳性信号来定量DNA的拷贝数。采用数字PCR技术对噬菌体λDNA的含量进行测定,并对测定结果进行不确定度评定。结果显示,由数字PCR测得的λDNA的含量为(2.43±0.35)μg/管(k=2),该结果与同位素稀释质谱法测量结果相吻合。
- 柳方方张玲王晶陈大舟臧超于笑波秦培勇
- 关键词：DNA含量不确定度
- 转基因水稻种子核酸提取方法的比较研究被引量：2
- 2011年
- 以转基因水稻克螟稻2号及其受体水稻秀水11的种子为试验材料,将水稻种子脱壳磨成粉末后,称取100mg粉末分别用传统CTAB法和5种核酸提取试剂盒进行水稻基因组DNA的提取,其中试剂盒A和试剂盒B为磁珠法,其余为硅胶过柱法,将提取的基因组DNA通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、荧光定量PCR等3种检测方法比较其提取效果,并结合提取时间和提取成本的比较,以期找到性价比最佳的提取方法。结果表明,试剂盒A和试剂盒B提取的基因组DNA完整性最好、纯度和提取效率最高,综合提取效果、耗时及成本等因素考虑,试剂盒B的性价比最佳。本研究为转基因水稻种子的检测和研究奠定了基础。
- 隋志伟余笑波王晶李亮臧超叶子弘
- 关键词：转基因水稻基因组DNA
- 一种检测转基因水稻克螟稻2号的质粒标准分子及构建
- 本发明构建了一种用于检测转基因水稻克螟稻2号的质粒标准分子。该质粒标准分子含克螟稻2号构建特异性基因片段和水稻内标准基因片段。经实时荧光定量PCR扩增实验证实，本发明提供的质粒标准分子可替代转基因水稻克螟稻2号基因组DN...
- 王晶李亮隋志伟臧超余笑波董莲华
- 文献传递
- 转基因水稻TT51—1标准物质的研制被引量：9
- 2012年
- 将筛选后的转基因水稻qT51—1和非转基因水稻明恢63种子分别冷冻研磨成粉末，采用重量法配置了5个不同水平的标准物质。经检验该标准物质的均匀性良好，可在4℃保存条件下存储1年。标准物质采用重量法的质量分数作为标准值，数字PCR测定拷贝数分数作为参考值，通过转基因水稻与非转基因水稻种子粉末提取效率比值校准的数字PCR定值结果与重量法质量分数定值结果之间具有等效一致性，该标准物质可用于转基因水稻TT51—1的定量PCR检测及其特异性检测方法的评价。
- 隋志伟余笑波王晶李亮傅博强臧超董莲华米薇杨立桃
- 关键词：计量学转基因水稻标准物质核酸
- TaqmanMGB探针冻融稳定性研究
- 2011年
- TaqmanMGB探针的稳定性是实时荧光定量PCR准确定量的关键因素之一。然而在实验过程中，常常因为运输、实验室保存或使用条件的变化，造成探针的反复冻融，影响实验结果。采用高效液相色谱技术定量研究了反复冻融的MGB探针的稳定性；并比较分析了冻融探针对qPCR的影响程度。结果表明：MGB探针可以耐受30次以内的反复冻融，随着探针浓度的降低，探针反复冻融后qPCR量值波动区间增大，因此，为保证结果稳定性，qPCR实验使用的MGB探针应尽量减少反复冻融次数。
- 臧超王晶李亮隋志伟余笑波黎朋
- 关键词：计量学高效液相色谱实时荧光定量PCR
- 转基因水稻克螟稻标准物质的初制备被引量：4
- 2011年
- 建立了转基因水稻克螟稻基体标准物质的初制备体系。按照0．5％、1％、2％、5％的质量比分别加入阳性粉末和阴性粉末，配制成4个水平的基体标准物质。实验结果表明，所选的阳性粉末和阴性粉末的水分分别为3．288％和4．039％，粒径均小于200斗m。从标识“金粉”的检测结果也可以看出，4个水平的基体标准物质均具有较好的均匀性。克螟稻基体标准物质的前期制备符合转基因基体标准物质的要求，可为后期进一步考察其稳定性和定值等参数提供基础。
- 余笑波叶子弘隋志伟李亮臧超王晶
- 关键词：计量学标准物质转基因水稻克螟稻
- 转基因玉米TC1507基体标准物质协同实验及不确定度评定被引量：1
- 2011年
- 7家实验室共同采用实时荧光定量PCR方法，对转基因玉米TC1507基体标准物质A、B、c3种含量水平的量值，进行了协同实验研究，并对得到的参考值进行了不确定度分析。实时荧光定量PCR方法协同实验结果表明，转基因玉米TC1507基体标准物质转基因含量的参考值分别为0．41％±0．22％、1．1％±0．4％、4．5％±1．2％（k=2）。
- 臧超傅博强宋贵文孟亚男王晶董莲华余笑波隋志伟李亮杨立桃
- 关键词：计量学基体标准物质实时荧光定量PCR
