李亮
- 作品数:119 被引量:274H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学一般工业技术机械工程更多>>
- 转基因水稻科丰2号外源基因纯合/杂合状态的PCR检测引物、检测方法及试剂盒
- 本发明公开了转基因水稻科丰2号外源基因纯合/杂合状态的PCR检测引物、检测方法及试剂盒。所述检测方法包括:(1)提取待检测水稻样品的DNA;(2)以SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所...
- 宛煜嵩梁利霞张秀杰朱祯金芜军苗朝华李亮高进
- 文献传递
- 一种生物技术产品DNA含量估计方法
- 本发明公开了一种生物技术产品DNA含量估计方法,可得到DNA的相对百分含量。所述估计方法从实时荧光定量PCR或数字PCR的样品中获得DNA的百分含量需要两次测试。一次用来检测外源插入基因的DNA拷贝数,称之为X,另一测用...
- 李亮金芜军宛煜嵩刘卫晓兰青阔温洪涛柳方方
- 文献传递
- 定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器
- 本公开涉及一种定量检测核酸的方法及表面等离子共振生物传感器。本公开的无标样定量检测核酸的方法基于表面等离子共振原理和分析物的扩散性与分析物绝对浓度之间的关系,实现了特异性定量检测核酸,克服了传统实时荧光定量PCR方法的耗...
- 李亮金芜军安娜宛煜嵩刘卫晓郑子繁
- 文献传递
- 转基因水稻TT51—1标准物质的研制被引量:9
- 2012年
- 将筛选后的转基因水稻qT51—1和非转基因水稻明恢63种子分别冷冻研磨成粉末,采用重量法配置了5个不同水平的标准物质。经检验该标准物质的均匀性良好,可在4℃保存条件下存储1年。标准物质采用重量法的质量分数作为标准值,数字PCR测定拷贝数分数作为参考值,通过转基因水稻与非转基因水稻种子粉末提取效率比值校准的数字PCR定值结果与重量法质量分数定值结果之间具有等效一致性,该标准物质可用于转基因水稻TT51—1的定量PCR检测及其特异性检测方法的评价。
- 隋志伟余笑波王晶李亮傅博强臧超董莲华米薇杨立桃
- 关键词:计量学转基因水稻标准物质核酸
- 转基因玉米Bt11品系特异性荧光RPA检测被引量:6
- 2017年
- 重组酶聚合酶介导的等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种新型等温扩增技术,具有反应时间短、灵敏度高、特异性强等特点,在转基因检测领域得到了广泛关注。本研究针对转基因玉米Bt11外源插入链接区域设计筛选了特异性引物和探针,建立了快速准确的荧光RPA检测方法,在39℃条件下,20 min内完成扩增并且能够实时监测,可以准确有效地检测到50个拷贝的靶标片段。而且,对于背景复杂的植物基因组DNA能够得到准确的扩增曲线。本研究不仅可以满足常规实验室检测,通过RPA便携式仪器,还可以满足转基因植物现场检测,具有广阔的应用前景。
- 李凯金芜军李亮李亮刘卫晓苗朝华
- 关键词:转基因检测
- 一种快速检测抗草甘膦G2-EPSPS蛋白的金标试剂盒
- 本实用新型涉及一种快速检测抗草甘膦G2-EPSPS蛋白的金标试剂盒,包括盒体、测试带和上盖,盒体盖入上盖后组成试剂盒,其特征在于所述测试带置于所述盒体内表面,所述上盖设置有一个观测窗和一个加样孔。本试剂盒可为快速检测植物...
- 张维郑建李亮刘奇陆伟林敏
- 文献传递
- 基于表面等离子体共振和电化学联用的DNA传感器研究进展被引量:1
- 2019年
- 表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术旨在检测物体表面附近折射率的变化,其特点是无标记、实时、灵敏和快速,该技术多用于研究分子的相互作用,包括动力学、效率常数和大分子构象变化等。电化学(electrochemical,EC)技术是一项用于定性定量研究电子转移、物质氧化还原、界面吸附等过程的成熟技术,具有简单、低成本和设备小型化的优点。现有的DNA杂交技术,例如光学、电化学或压电转导技术,主要关注于提高DNA杂交检测系统的选择性和灵敏度。传统的SPR在DNA分析方面,由于无法测量折射率的极小变化而在超灵敏检测中的应用受到限制。因此,随着纳米材料的研发和联用技术的飞速发展,SPR与EC联用的生物传感器研究越来越成为人们关注的热点。近年来,关于SPR和EC联用在DNA检测方面的综述鲜有报道。对SPR和EC检测DNA的技术原理、联用方法、应用进展等方面作出了简要的介绍,以期为表面等离子共振和电化学联用的DNA传感器相关研究提供参考。
- 张玉昆安娜刘卫晓宛煜嵩金芜军李亮张晓
- 关键词:表面等离子体共振电化学生物传感器DNA
- 一种快速有效油用亚麻转基因体系的建立
- 2021年
- 油用亚麻(俗称胡麻)是我国重要的油料作物之一,也是干旱和半干旱地区的主要经济作物。近年来随着国家经济的发展和人们生活质量的提高,人们对油用亚麻的需求逐渐提升。建立一种快速高效便捷的油用亚麻遗传转化体系对油用亚麻分子育种具有重要意义。本实验以油用亚麻子叶节作为遗传转化的外植体,以草铵膦作为转基因植株筛选剂,通过农杆菌介导法转化油用亚麻,通过对各生长时期生长调节剂的配比筛选,优化出一套转化体系。该体系与传统的以下胚轴为外植体的转化方法相比,成苗时间能缩短至两个月,且阳性植株鉴定方法简便高效。该体系的开发为加快油用亚麻的分子育种与基因相关研究提供了有利条件。
- 迟会张天豹刘彩月李亮裴新梧袁潜华龙艳
- 关键词:油用亚麻转基因农杆菌介导法子叶节植物生长调节剂
- TaqmanMGB探针冻融稳定性研究
- 2011年
- TaqmanMGB探针的稳定性是实时荧光定量PCR准确定量的关键因素之一。然而在实验过程中,常常因为运输、实验室保存或使用条件的变化,造成探针的反复冻融,影响实验结果。采用高效液相色谱技术定量研究了反复冻融的MGB探针的稳定性;并比较分析了冻融探针对qPCR的影响程度。结果表明:MGB探针可以耐受30次以内的反复冻融,随着探针浓度的降低,探针反复冻融后qPCR量值波动区间增大,因此,为保证结果稳定性,qPCR实验使用的MGB探针应尽量减少反复冻融次数。
- 臧超王晶李亮隋志伟余笑波黎朋
- 关键词:计量学高效液相色谱实时荧光定量PCR
- 转基因水稻克螟稻标准物质的初制备被引量:4
- 2011年
- 建立了转基因水稻克螟稻基体标准物质的初制备体系。按照0.5%、1%、2%、5%的质量比分别加入阳性粉末和阴性粉末,配制成4个水平的基体标准物质。实验结果表明,所选的阳性粉末和阴性粉末的水分分别为3.288%和4.039%,粒径均小于200斗m。从标识“金粉”的检测结果也可以看出,4个水平的基体标准物质均具有较好的均匀性。克螟稻基体标准物质的前期制备符合转基因基体标准物质的要求,可为后期进一步考察其稳定性和定值等参数提供基础。
- 余笑波叶子弘隋志伟李亮臧超王晶
- 关键词:计量学标准物质转基因水稻克螟稻