潘滨
- 作品数：2 被引量：21H指数：1
- 供职机构：浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 烟草曲茎病毒复制相关蛋白基因原核表达条件优化被引量：21
- 2007年
- 为了提高烟草曲茎病毒(Tobacco curly shoot virus,TbCSV)复制相关蛋白(replication-associated protein,Rep)基因在大肠杆菌中表达量,研究了大肠杆菌菌株、温度、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对GST-Rep融合蛋白表达量的影响.结果表明,大肠杆菌菌株Rosetta在37℃培养3h后,使用终浓度为0.5mmol·L-1的IPTG在28℃诱导培养4h时,GST-Rep融合蛋白表达量最高,表达的GST-Rep融合蛋白可占细菌总蛋白的42%以上.用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST-Rep融合蛋白进行纯化,SDS-PAGE表明GST-Rep融合蛋白大小约为66kD,与预计的分子量大小一致,Western blot分析表明其能与GST多克隆抗体起特异性反应.Rep基因的优化表达为研究该基因的作用机理打下了基础.
- 潘滨吴建祥李桂新周雪平
- 关键词：原核表达
- 烟草曲茎病毒复制相关蛋白基因原核表达条件优化及核酸结合特性的初步研究
- 双生病毒是一类世界范围内广泛发生的单链环状DNA病毒,主要以滚环复制的方式进行病毒基因组的复制。与此类病毒致病性紧密相关的新型卫星分子DNAβ依赖病毒DNA-A进行复制。为了进一步了解DNAβ复制的机制,本论文对烟草曲茎...
- 潘滨
- 关键词：烟草曲茎病毒原核表达
- 文献传递
