李桃 作品数:5 被引量:5 H指数:1 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 发文基金: 湖北省卫生厅科研基金 山西省卫生厅科研基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
靶向EZH2基因的shRNA干扰对人卵巢癌细胞Drosha基因表达的影响 2013年 目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因对卵巢癌细胞株A2780的Drosha基因表达的影响。方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞株A2780-shEZH2,实时定量PCR法(qRT-PCR)和免疫印记法(Western blot)检测转染株的Drosha基因表达。结果:以未转染组A2780细胞Drosha的表达水平为100%,EZH2-shRNA转染组A2780-shEZH2细胞Drosha的mRNA及蛋白水平分别上升(53.02±4.32)%和(51.26±1.35)%,与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论:沉默EZH2基因可以上调Drosha基因的表达。 况燕 蔡晶 曹晋 韩庆 李桃 王泽华关键词:EZH2基因 MICRORNA 卵巢肿瘤 人卵巢癌细胞EZH2基因下调对E-钙粘蛋白表达的影响 被引量:4 2013年 目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)与E-钙粘蛋白(E-cadherin)在卵巢癌中的关系。方法采用短发夹状RNA的真核表达载体稳定转染人卵巢癌细胞C13*,建立稳定沉默EZH2基因的人卵巢癌细胞系shEZH2-C13*,采用Real-time PCR、Western blot和细胞免疫荧光方法检测EZH2下调后E-钙粘蛋白在mRNA水平和蛋白水平表达的变化,了解EZH2对E-钙粘蛋白表达的影响。结果 shEZH2质粒表达载体转染C13*获得的稳定转染细胞株shEZH2-C13*中,相对于未转染组,EZH2的mRNA和蛋白水平分别下降了(67.33±6.43)%和(71.21±5.77)%,差异有统计学意义(均P<0.05)。在稳定沉默EZH2的细胞中,E-钙粘蛋白的mRNA水平和蛋白水平相对于未转染组分别升高(52.33±19.03)%和(60.45±3.28)%,差异有统计学意义(均P<0.05)。细胞免疫荧光检测结果显示,EZH2沉默的细胞中E-钙粘蛋白表达明显高于未转染组,而空载体转染组没有明显变化。结论成功构建EZH2shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的人卵巢癌细胞系shEZH2-C13*,同时发现在卵巢癌细胞中EZH2下调能升高E-钙粘蛋白的表达水平,推测EZH2可能通过催化H3K27三甲基化,介导DNA甲基化或组蛋白甲基化,抑制E-钙粘蛋白转录,进一步触发其下游事件,影响卵巢癌的侵袭和转移。 王俊杰 蔡晶 高艳萍 周隽 丁慧 李桃 王泽华关键词:卵巢癌 EZH2 E-钙粘蛋白 表观遗传学 人卵巢癌顺铂耐药细胞EZH2基因沉默对Drosha基因表达的影响 2012年 目的探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因对卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP的Drosha基因表达的影响。方法获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(shRNA)的人卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP-shEZH2,实时荧光定量PCR法和免疫印记法检测转染株的Drosha基因表达。结果以未转染组A2780/DDP细胞Drosha的表达水平为100.00%,EZH2-shRNA转染组A2780/DDP-shEZH2细胞Drosha的mRNA及蛋白水平分别上升(53.33±9.24)%和(51.28±3.25)%。结论沉默EZH2基因可以上调Drosha基因的表达。 况燕 蔡晶 李桃 李东林 周隽 王泽华关键词:EZH2基因 Drosha基因在人卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达研究 被引量:1 2012年 目的探讨Drosha基因和卵巢癌顺铂耐药的关系。方法分别采用实时定量PCR和免疫印迹法检测Drosha基因mRNA及其蛋白在A2780/DDP及A2780细胞中表达的差异。结果 A2780/DDP细胞中Drosha基因mRNA及其蛋白的表达量分别是A2780细胞表达量的(56.79±1.65)%和(50.16±1.34)%,两者比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 Drosha基因在A2780/DDP细胞中明显下调,提示Drosha基因和卵巢癌顺铂耐药相关。 况燕 蔡晶 李桃 李东林 周隽 王泽华关键词:卵巢肿瘤 耐药性 子宫内膜癌淋巴结转移的术前评估 2014年 子宫内膜癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,据统计2012年美国约有47000个新发病例[1],发病率呈现上升趋势。手术是子宫内膜癌主要的治疗手段,根据2013美国国立综合癌症网络(National Comprehen-sive Cancer Network, NCCN)指南,凡是能进行手术的所有子宫内膜癌患者都应接受全面分期手术,即全子宫切除术+双附件切除术+双侧盆腔淋巴结及腹主动脉旁淋巴结切除术,从而提供准确的分期及预后信息。研究报道[2-4],绝大部分(90%)子宫内膜癌患者出现异常阴道流血,患者在诊断时多数处于早期,淋巴结转移率并不高。Ⅰ期子宫内膜癌患者中约5%~18%出现盆腔淋巴结转移或者宫外受累,其中早期低危型淋巴结转移率更低。系统性淋巴结切除在早期低危型子宫内膜癌患者中一直存在着广泛争议。因此,利用术前检测指标实现对患者淋巴结转移情况的评估具有深远意义。 李桃 蔡晶 王泽华关键词:子宫内膜癌 淋巴结转移 术前评估 肌层浸润 腹主动脉旁淋巴结 附件切除术