朱祯平
- 作品数：46 被引量：102H指数：6
- 供职机构：中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家攀登计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达被引量：19
- 2003年
- 构建和表达抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用亲和层析法纯化该产物 ,并用Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明 :抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体已构建成功 ,表达可溶性产物的产量达 2mg L以上 ,纯化产物中二聚体的比例达 90 % ,具有与Jurkat(CD3 + )和K5 62 A0 2细胞 (Pgp+ )结合的活性 ,与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并获得高效表达 。
- 高瀛岱熊冬生许元富彭晖邵晓枫杨纯正朱祯平
- 关键词：抗CD3双功能抗体肿瘤免疫疗法
- 人4-1BBL胞外区基因的克隆与表达研究被引量：7
- 2005年
- 用RTPCR方法从人单核THP1细胞系克隆人41BBL胞外区基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建成人41BBL胞外区基因表达载体。将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳定表达,表达产物主要以可溶性状态存在;SDSPAGE和Westernblot分析显示,其分子量约为22kD,与预期结果一致。这是首次在大肠杆菌中获得41BBL胞外区可溶性表达。生物学活性检测显示41BBL对于维持T淋巴细胞系因子释放非常有益,同时PI单染表明它能抑制Jurkat细胞的凋亡。这将在抗肿瘤免疫治疗中具有潜在应用前景。
- 姜文国熊冬生邵晓枫王金宏许元富刘芳郭红星朱祯平杨纯正
- 关键词：4-1BBL协同刺激分子原核表达
- 以血管内皮细胞生长因子及其受体为靶点的抗肿瘤药物研究进展被引量：2
- 2000年
- 血管新生是实体瘤生长和转移的必要条件。血管内皮细胞生长因子及其受体在肿瘤新生血管形成中起重要作用 ,成为肿瘤治疗的新靶点。一批新生血管抑制物正处于临床或临床前试验的研究阶段。
- 徐晨朱祯平彭晖
- 关键词：血管内皮细胞抗肿瘤药物
- 双特异性抗体及其在肿瘤临床上的应用被引量：7
- 2000年
- 双特异抗体(bispecific antibody, BsAb)具有两条抗原结合臂, 能分别与靶细胞和效应细胞结合, 引导效应细胞靶向杀灭肿瘤细胞. BsAb的研制经历了鼠源性单克隆抗体的化学偶联、双杂交瘤和基因工程BsAb 3个发展阶段, 其中, 基因工程BsAb与以往鼠源性BsAb相比具有较低的免疫源性和较好的组织穿透能力. 目前已有一些F(ab′)2和diabody等类型BsAb进入了临床Ⅰ/Ⅱ试验, 其中以抗CD3/抗肿瘤BsAb最为常见. 一些临床试验结果表明抗CD3/抗肿瘤 BsAb在治疗一些肿瘤时, 特别是治疗那些对常规治疗方案不起作用的晚期肿瘤以及清除患者体内微小肿瘤细胞转移灶时, 产生了较好的疗效. knobs into holes 技术是基因工程BsAb研制过程中出现的一种新技术, 该技术路线能引导异源二聚体的配对, 提高BsAb的产量和质量.
- 许元富朱祯平杨纯正
- 关键词：双特异抗体基因工程肿瘤治疗
- 嵌合抗CD_(20)抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定被引量：6
- 2000年
- 目的 :构建抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达。方法 :利用PCR方法从抗CD2 0 单链抗体 (ScFv)表达载体上扩增抗CD2 0 抗体轻链可变区基因 (VL)、重链可变区基因 (VH) ,然后将VH、VL 基因重组到Fab表达载体pYZF中 ,构建抗CD2 0 Fab表达载体pYZF1cd2 0 ,并在 2 7C7菌中高效表这。结果 :经Fab表达载体转化的 2 7C7菌株 ,进行表达培养 ,经分离纯化获得具有CD2 0 特异结合活性的Fab片段 ,竞争性免疫荧光抑制实验表明 ,表达产物Fab片段能竞争性抑制鼠源性抗CD2 0 抗体HI47和CD2 0 表达细胞Raji细胞结合。结论 :在大肠杆菌中高效可溶性分泌表达有活性的抗CD2 0 嵌合抗体Fab片段。
- 赖增祖熊冬生范冬梅彭辉许元富朱祯平杨纯正
- 关键词：单克隆抗体CD20大肠杆菌
- 抗CD3单克隆抗体重链和轻链可变区基因及其应用
- 本发明公开了抗CD3单克隆抗体重链和轻链可变区基因,由所述基因编码的多肽,含有所述基因的载体及所述的基因和多肽在制备诊断和治疗肿瘤的药物及在器官移植中抑制免疫排斥反应的药物中的应用。
- 杨纯正朱祯平熊冬生许元富彭晖赖增祖邵晓枫范冬梅徐晨
- 文献传递
- 抗CD3和抗CD20双功能抗体的研制
- 杨纯正朱祯平熊冬生许元富彭晖刘汉芝邵晓枫范冬梅
- 主要内容：克隆了抗CD3和抗CD20单抗的轻、重链可变区基因，完成了抗CD3 DNA序列改造。构建了抗CD3和抗CD20单链抗体ScFv和Fab’抗体片段以及抗CD3和抗CD20双功能基因工程抗体，并获得高效可溶性表达，...
- 关键词：
- 关键词：基因工程药基因构建抗体双功能抗体抗癌药
- 抗CD3单克隆抗体重链和轻链可变区基因及其应用
- 本发明公开了抗CD3单克隆抗体重链和轻链可变区基因，由所述基因编码的多肽，含有所述基因的载体及所述的基因和多肽在制备诊断和治疗肿瘤的药物及在器官移植中抑制免疫排斥反应的药物中的应用。
- 杨纯正朱祯平熊冬生许元富彭晖赖增祖邵晓枫范冬梅徐晨
- 文献传递
- 抗CD<Sub>20</Sub>单克隆抗体的重链和轻链可变区基因及其应用
- 本发明公开了抗CD<Sub>20</Sub>单克隆抗体HI<Sub>47</Sub>重链和轻链可变区基因,由所述基因编码的多肽,含有所述基因的载体及所述的基因和多肽在制备用于B淋巴细胞瘤的治疗和诊断的药物中的应用。
- 杨纯正朱祯平熊冬生许元富彭晖赖增祖邵晓枫范冬梅徐晨
- 文献传递
- 抗CD_3/抗CD_(20)微型双功能抗体裸鼠体内分布研究被引量：3
- 2001年
- 目的：建立裸鼠皮下人Ｂ－淋巴细胞移植瘤模型，研究抗ＣＤ３／ＣＤ２０。微型双功能抗体在裸鼠体内的分布。方法：采用亲和层析分离纯化本室构建的抗 ＣＤ３／抗 ＣＤ２０微型双功能抗体可溶性表达产物，并用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、分子排阻层析和 ＦＡＣＳ鉴定纯化产物；采用５周龄左右的雌性 ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ，经４Ｇｙ照射、皮下接种 Ｒａｊｉ细胞建立裸鼠皮下人Ｂ－淋巴细胞移植瘤模型，并于眼底静脉丛注射１２５Ｉ标记的抗ＣＤ３／抗ＣＤ２０微型双功能抗体，测定各组织中１２５Ｉ的分布。结果：雌性ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ经照射、皮下接种１×１０～７～３×１０～７Ｒａｊｉ细胞／只，６～１４天均开始出现移植瘤，移植瘤细胞膜表面标记与 Ｒａｊｉ相同，且在２４小时时肿瘤部位１２５ Ｉ的分布明显低于心、肝、肾、脾，其比值分别为０．０８、０．１９、０．０６和０．５１，而 ７２小时时肿瘤部位１２５Ｉ的分布则高于心、肝、肾、脾，其比值分别为 ２．３２、９．４６、８．２４和９．５０。结论：抗ＣＤ３／抗ＣＤ２０微型双功能抗体能在裸鼠皮下人Ｂ－淋巴细胞移植瘤部位富集，是一个有望用于Ｂ细胞恶性肿瘤临床治疗的双特异性抗体。
- 熊冬生刘汉芝杨纯正许元富邵晓枫彭晖赖增祖朱祯平
- 关键词：裸鼠移植瘤CD3CD20双功能抗体
