许元富
- 作品数：121 被引量：382H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 抗人乳腺癌细胞膜表面角蛋白CK8的单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的:建立针对多药耐药人乳腺癌细胞膜表面差异抗原的抗体库,并鉴定抗角蛋白CK8特异性的单克隆抗体。方法:采用细胞免疫和杂交瘤技术制备单克隆抗体库,经免疫沉淀得到抗原-抗体复合物,SDS-PAGE分离目的抗原,质谱测序,Western blot验证及激光共聚焦显微镜观察抗原分子的细胞膜定位。结果:成功筛选到稳定分泌抗CK8分子的单克隆抗体的杂交瘤细胞株(7F9)。结论:文中所研制的单克隆抗体具有与乳腺癌细胞膜表面CK8分子特异结合的活性,在上皮来源肿瘤标志物CK8的临床检测及CK8相关生物学活性研究中具有广泛应用前景。
- 刘芳邵晓枫王金宏范冬梅许元富杨铭杨纯正熊冬生
- 关键词：膜蛋白单克隆抗体
- 抑制肿瘤血管的新生药物被引量：2
- 2009年
- 血管新生在肿瘤的生长和侵袭过程中起着关键作用，随着肿瘤血管新生机制研究的深入及以肿瘤血管为靶点的药物在临床治疗肿瘤时取得较好的疗效，证实了通过抑制肿瘤血管新生来抑制肿瘤生长的理念。目前，抗血管新生药物基础和临床研究取得了新的进展，详细了解肿瘤血管新生的分子机制和抗血管新生药物的作用机制将有助于肿瘤的治疗，并为开发新型抗肿瘤药物提供科学依据。
- 谢印良许元富
- 关键词：血管新生抑制剂新生血管化病理性内皮生长因子基质金属蛋白酶类
- 抗Pgp基因工程抗体ScFv的构建、表达及其活性测定被引量：3
- 2004年
- 目的 :构建表达抗PgpScFv,进行体外活性的测定。方法 :利用RT PCR方法 ,克隆抗Pgp杂交瘤细胞PHMAO2的重链可变区基因 (VH) ,轻链可变区基因 (VL) ,拼接为单链抗体 (ScFv) ,再克隆到具有强启动子的PET2 8a(+)载体上进行表达 ,并进行了表达产物体外活性的测定。结果 :构建了表达质粒PET2 8a(+) ScFvPGP。表达产物可与表达Pgp抗原的K5 6 2 A0 2细胞特异性结合 ,并不抑制Pgp外排泵的功能。结论 :构建表达的抗PgpScFv只有针对Pgp抗原的识别功能 ,并无抑制作用 ,因此应用于人体后不会干扰正常细胞的排泄分泌功能 ,无论是作为靶向诊断治疗的载体还是作为双功能抗体的一臂 ,均具有广泛的应用前景。
- 高瀛岱熊冬生彭晖许元富邵晓枫范冬梅杨纯正
- 关键词：单克隆抗体SCFVP糖蛋白
- 抗P-gp单克隆抗体的制备和鉴定被引量：7
- 1999年
- ｍｄｒ１基因的表达产物Ｐ糖蛋白（Ｐ１７０，Ｐｇｐ）作为一种外排泵，在ＡＴＰ的参与下，可将细胞内的药物运到细胞外，从而使细胞产生多药耐药（ＭＤＲ）。我们利用杂交瘤技术制备了一株抗Ｐｇｐ单抗，并初步探讨了其在临床上的应用前景。材料和方法１细胞系ＨＬ...
- 熊冬生杨纯正邵晓枫许元富许立忠许立忠栾凤君
- 关键词：单克隆抗体
- CD20F(ab′)_2抗体的发酵与纯化被引量：2
- 2004年
- 转化了质粒PYZcpp3的 16C9大肠杆菌可高水平地分泌表达可溶性CD2 0F(ab′) 2 抗体 ;采用经优化的培养条件 ,在发酵罐上进行高密度培养OD550 值达 14 0 ;每升湿菌菌重 2 0 0g ;抗体的产量每升为 2 4 1mg ,其中F(ab′) 2 片段达 5 0 % ,F(ab′) 2 可以特异性的识别CD2 0 + 细胞并与CD2 0相结合 ;F(ab′) 2 对Raji细胞的IC50 值为 2 2 8μg mL ;而Fab′对Raji细胞的IC50 值为 4 5 9μg mL。
- 王金宏纪庆熊冬生许元生杨纯正王彩云许元富郑梦杰
- 关键词：CD抗体
- 抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达被引量：19
- 2003年
- 构建和表达抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用亲和层析法纯化该产物 ,并用Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明 :抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体已构建成功 ,表达可溶性产物的产量达 2mg L以上 ,纯化产物中二聚体的比例达 90 % ,具有与Jurkat(CD3 + )和K5 62 A0 2细胞 (Pgp+ )结合的活性 ,与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并获得高效表达 。
- 高瀛岱熊冬生许元富彭晖邵晓枫杨纯正朱祯平
- 关键词：抗CD3双功能抗体肿瘤免疫疗法
- 蛋白激酶C在K562/AO2细胞多药耐药中作用的初步研究被引量：7
- 1998年
- 蛋白激酶Ｃ在Ｋ５６２／ＡＯ２细胞多药耐药中作用的初步研究赵春亭杨纯正邵晓枫熊冬生许元富齐静杨天楹多药耐药（ＭＤＲ）的产生与多种因素有关，有关蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）是否在ＭＤＲ中起作用国内未见报道，国外尚存在争议，ＰＫＣ分布...
- 赵春亭杨纯正邵晓枫熊冬生许元富齐静杨天楹
- 关键词：白血病多药抗药蛋白激酶C
- 人4-1BBL胞外区基因的克隆与表达研究被引量：7
- 2005年
- 用RTPCR方法从人单核THP1细胞系克隆人41BBL胞外区基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建成人41BBL胞外区基因表达载体。将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳定表达,表达产物主要以可溶性状态存在;SDSPAGE和Westernblot分析显示,其分子量约为22kD,与预期结果一致。这是首次在大肠杆菌中获得41BBL胞外区可溶性表达。生物学活性检测显示41BBL对于维持T淋巴细胞系因子释放非常有益,同时PI单染表明它能抑制Jurkat细胞的凋亡。这将在抗肿瘤免疫治疗中具有潜在应用前景。
- 姜文国熊冬生邵晓枫王金宏许元富刘芳郭红星朱祯平杨纯正
- 关键词：4-1BBL协同刺激分子原核表达
- Gleevec耐药的分子机制研究及其耐药性的克服
- 慢性粒细胞白血病(Chronic myelogenous leukemia，CML)是目前唯一确认的由单机制导致的恶性疾病，95％的CML患者表达BCR-ABL融合蛋白，该蛋白来自于c-Bcr的第2或3外显子和Abl的第...
- 齐静许元富杨铭彭晖纪庆王金宏王彩云熊冬生杨纯正
- 关键词：慢性粒细胞白血病耐药机制分子靶点酪氨酸激酶抑制剂
- 拮抗型抗hTNF-α单克隆抗体的筛选和活性鉴定
- 2010年
- 目的制备和筛选拮抗型人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)单克隆抗体(McAb)并检测其活性,为临床靶向治疗提供理论依据。方法用经典免疫方法获得抗hTNF-αMcAb,经接种于小鼠腹腔后获得腹水,采用硫酸铵沉淀和蛋白G亲和层析法纯化得到纯度>95%的抗hTNF-αMcAb,采用ELISA方法测定效价、抗体亚型和亲和力,MTT法测定抗体阻断hTNF-α对L929细胞的细胞毒作用和筛选拮抗型抗hTNF-αMcAb,流式细胞仪法测定抗体阻断hTNF-α诱导L929细胞凋亡的作用。结果获得1株能稳定分泌抗hTNF-αMcAb的杂交瘤细胞株XB10,分泌的抗体亚型为IgG2b;该抗体能高亲和性与hTNF-α结合,特异性阻断hTNF-α对L929细胞的细胞毒作用和抑制细胞凋亡,并呈一定剂量依赖性。结论成功制备能稳定分泌拮抗型抗hTNF-α的McAb的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体对hTNF-α有特异性拮抗作用,为今后研制临床治疗型抗hTNF-α的基因工程抗体奠定了实验基础。
- 黄蕊马莉谷岳谢印良佘鸣邵晓枫熊冬生刘汉芝许元富
- 关键词：人肿瘤坏死因子-Α单克隆抗体拮抗剂
