张芳
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划国家自然科学基金国家科技部专项基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- H5亚型禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2015年
- 为制备Clade 2.3.2分支H5亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体,以灭活的超速离心浓缩纯化的H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Guangdong/S1322/2010(DK/GD/S1322/2010)免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞,使其与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,通过血凝抑制(HI)和ELISA方法筛选,共获得2株能够稳定分泌HA蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株A4和D11。2株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链均为κ链。经HI检测,A4和D11的细胞培养上清和腹水的抗体效价分别为23、22和211、211。HI和中和试验结果显示,这2株单克隆抗体与Clade 2.3.2.B分支和Clade 2.3.2.C分支的病毒反应性良好,而与Clade 2.3.4和Clade 7分支的病毒均不反应。间接免疫荧光试验结果表明,这2株单克隆抗体能够识别MDCK细胞内感染的H5亚型禽流感病毒DK/GD/S1322/2010。结果表明,本研究制备的2株单克隆抗体为H5亚型禽流感病毒的检测和诊断奠定了物质基础。
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- 关键词：禽流感病毒单克隆抗体血凝素
- 一株野鸟源H9N2亚型禽流感病毒的全基因组序列分析及致病性研究被引量：4
- 2015年
- 为进一步了解2014年分离自我国南方野鸟粪便中的一株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)Wide Bird/Hu N/SC1400/2014(H9N2)(WB/400/14)的生物学特性,本研究对其进行全基因组序列测定、进化分析及SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析显示:该分离株的HA裂解位点基序为333PAASDR↓GL340,其中不存在多个连续的碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒(LPAIV)氨基酸序列特征。该分离株不同基因片段来源较复杂,分别与H9、H6、H4、H1、H11、H10、H3等多种亚型的LPAIV同源性较高,呈现明显的多样性。感染性试验显示,WB/400/14不能够在SPF鸡和小鼠体内有效复制,但病毒感染SPF鸭后能够在部分脏器中检测到病毒的存在,并且感染鸭能通够过咽喉和泄殖腔同时向外排毒,而同居感染鸭仅通过泄殖腔向外排毒,表明分离株在SPF鸭群中具有良好的水平传播能力。本研究为AIV的监测和防控提供实验依据。
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- 关键词：野鸟禽流感病毒H9N2亚型感染性
- 一株鸭源H8N4亚型禽流感病毒分离株的全基因组序列分析及致病性的研究被引量：1
- 2014年
- 本研究对2012年从湖南活禽市场中分离到的一株鸭源H8N4亚型禽流感病毒(AIV)A/duck/Hu N/S3160/2012(H8N4)进行全基因组序列和进化分析,并对其进行SPF鸡、SPF鸭和BALB/c小鼠的致病性试验。序列分析显示:HA裂解位点序列为339PSIEPK↓GLF347,为典型的低致病性AIV特征。内部基因来源较复杂,Hu N/160/12的PB1、NS基因分别与A/spot-billed duck/Xianghai/427/2011(H5N2)和A/wild bird/Korea/A81/2009(H5N2)的同源性最高,其余内部基因同源性最高的病毒株来自H2、H3、H4、H7、H10等亚型分离株,呈现明显的异源性。感染性试验结果显示,病毒在SPF鸭体内可以通过呼吸道和消化道向外排毒,并且能够在气管、肾脏、盲肠扁桃体及法氏囊检测到病毒,而不能在鸡体内有效复制及排毒。对小鼠的感染性试验结果显示,仅在鼻甲和肺检测到病毒存在,其他脏器病毒滴定结果为阴性,体重呈一过性下降,表明该病毒为低致病性AIV。
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- 关键词：禽流感病毒基因组分析
- 2009年-2014年我国H3N2亚型禽流感病毒生物学特性研究
- H3N2亚型流感病毒具有广泛的感染宿主谱,除了可以感染野鸟和家禽外,还可以感染猪、犬、猫、雪貂等多种哺乳动物,而且是造成人的季节性流感最直接的病原之一.近年来的禽流感监测数据显示,H3N2亚型禽流感病毒在水禽中分离率相对...
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- 关键词：禽流感病毒全基因组序列抗原性感染性
- 两株鸭源H3N2亚型禽流感病毒分离株的分离与鉴定被引量：1
- 2014年
- 为了解我国H3亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对鸭体内分离到的两株鸭源H3N2亚型AIV A/Duck/Hubei/S3176/2012(H3N2)(HuB/176/12)和A/Duck/Fujian/S1134/2011(H3N2)(FJ/134/11)进行了全基因组序列测定,并进行了SPF鸡和BALB/c小鼠的致病性试验。序列分析显示:HA裂解位点基序为339PEKQTR↓GLFG348,符合低致病性病毒株氨基酸序列特征。病毒内部基因来源较复杂,分离株与H1、H2、H5、H6、H7、H9、H12等多种亚型的低致病性AIV同源性较高,不同基因片段呈现明显的异源性。动物试验显示,病毒感染SPF鸡后两株病毒的排毒方式呈现明显差异,HuB/176/12仅通过咽喉向外排毒,而FJ/134/11能够通过咽喉和泄殖腔同时向外排毒,并且在鸡群中具有良好的水平传播能力,鸡感染病毒后多处脏器均能检测到病毒的存在。对BALB/c小鼠的致病性试验结果显示,病毒仅能在小鼠呼吸道中复制,不能够造成全身性系统感染。
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- 关键词：禽流感病毒H3N2亚型抗原性分析
- 四株鸭源H3N8亚型禽流感病毒对SPF鸡的感染性分析被引量：4
- 2016年
- 为评价鸭源H3N8亚型禽流感病毒对鸡的感染风险,作者选取了4株HA基因位于不同进化分支的病毒进行了SPF鸡的感染性试验。结果表明,这4株H3N8亚型禽流感病毒不需要提前适应就可以感染鸡,病毒对鸡不同脏器的组织嗜性存在较大差异。鸡感染病毒后未表现出明显的临床症状,大部分感染鸡可以通过呼吸道和消化道向外排毒。此外,DK/ZJ/S4088/2013和DK/GZ/S1245/2013这两株病毒还可以由感染组的鸡传播给接触组的鸡。综上所述,本研究中的4株鸭源H3N8亚型禽流感病毒具有感染鸡并在鸡群间传播的潜在风险,在家禽的饲养和流通环节中应尽量避免鸡群与鸭群的接触。
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- 关键词：禽流感病毒H3N8感染性
- 两株野鸟源H9N2亚型禽流感病毒的进化分析和对小鼠的感染性研究被引量：2
- 2015年
- 为了解2015年分离自我国四川省野鸟粪便中的两株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)Wild Bird/SC/S1264/2015(H9N2)(WB/SC/264/15)和Wild Bird/SC/S1411/2015(H9N2)(WB/SC/411/15)的生物学特性,本研究对其进行了全基因组序列测定和BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析结果显示:两个分离株的HA裂解位点基序均为333PSRSSR↓GL340,符合低致病性AIV(LPAIV)的氨基酸序列特征,HA蛋白受体结合位点处的第226以及228位氨基酸残基分别为谷氨酰胺(Q)和甘氨酸(G),具有结合禽源AIV受体的分子特征。内部基因片段来源复杂,呈现明显的基因多样性。BALB/c小鼠的感染性试验结果显示,这两个分离株只在小鼠的上呼吸道鼻甲中有效复制,小鼠体重变化轻微,未见明显临床症状。
- 肖丽崔鹏飞张芳关立峥施建忠邓国华陈化兰
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型野鸟感染性
- 一株H5N2亚型流感病毒的全基因组序列分析及致病性的研究
- 2014年
- 本研究对2012年从我国南方的鸭群环境水样品中分离到的一株低致病性H5N2亚型流感病毒EN/HuN/S3794/2012（H5N2）进行全基因组序列和进化分析、抗原性差异分析及致病性试验。序列分析显示：其HA片段裂解位点无多个连续碱性氨基酸，具有低致病性流感病毒的特征。该病毒基因组序列与A/DK/HuN /S4120/2011 （H5N2）全基因组核苷酸序列高度同源，同源性在97.4 %～99.3 %之间，抗原性分析结果表明，该分离株与H5亚型流感病毒参考株抗原性差异较大。以106 EID50/100 μL剂量鼻腔感染4周龄SPF鸡及SPF鸭，病毒滴定未检测到病毒存在，表明该病毒不能在SPF鸡和SPF鸭体内有效复制；以106 EID50/50 μL剂量鼻腔感染6周龄BALB/c小鼠，脏器滴定结果显示，仅在肺脏中检测到病毒，小鼠体重无明显变化，表明该病毒分离株对小鼠感染能力弱，呈低致病性。
- 李文辉关立峥张芳王晶卢昆鹏施建忠邓国华陈化兰
- 关键词：H5N2流感病毒进化分析
- 1株H12N7亚型禽流感病毒全基因组测定及遗传演化分析被引量：1
- 2014年
- 2011年冬对湖南环洞庭湖地区散养鸭群进行禽流感病毒(AIV)感染情况调查时从一鸭场环境粪便拭子中分离一株H12N7亚型AIV,命名为A/Environment/Hunan/S4484/2011(H12N7),对其进行全基因序列测定及分析。结果显示该毒株HA基因裂解位点无多个连续的碱性氨基酸(PQAQDR↓GLF),具有低致病性AIV的特征,对其全基因进行遗传进化分析表明8个基因片段来源非常复杂,与周边国家野禽中分离的毒株相似性很高,可能有共同的祖先来源,同时提示该毒株可能是不同亚型禽流感毒株之间基因交换所形成的重组体。
- 谭丹崔鹏飞黄建龙王昌建李文辉范仲鑫张芳何世成唐小明刘道新邓国华
- 关键词：禽流感病毒序列测定与分析
- 我国2009-2013年H3亚型禽流感病毒表面基因分子特征
- 不同亚型间的禽流感病毒的多基因重组增加了我国南方家鸭中循环存在着的流感病毒的遗传多样性,有研究表明,H3 亚型禽流感病毒是家鸭中普遍存在着的流感亚型,而家鸭作为天然基因库与家禽之间的重要桥梁,其存在促进了流感病毒的传播与...
- 关立峥邓国华李文辉谭丹崔鹏飞张曦朱占松王晶张芳陈化兰
- 关键词：禽流感家鸭生物学特性
