张彩荣
- 作品数：4 被引量：10H指数：3
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 表达HIV-1gag蛋白重组乳酸乳球菌株的建立及其在小鼠体内定植的研究被引量：3
- 2013年
- 目的构建表达HIV-1gag的重组乳酸乳球菌，并分析重组菌在小鼠体内的定植情况。方法将HIV-1gag克隆至原核表达质粒pMG36e，重组质粒pMG36e-gag电转乳酸乳球菌，SDS-PAGE和Western blot法检测其在乳酸乳球菌中的表达。以10^9个重组菌给小鼠口服，对照组口服PBS。口服后第1、3、5、7、9、11天分别取小鼠的胃、小肠和大肠，采用稀释滴种法测定小鼠胃、肠道内重组菌的数量。结果酶切和DNA测序表明gag已克隆人pMG36e。SDS—PAGE在预期位置检测到蛋白条带，Western blot分析证实其为gag蛋白。重组菌定植实验表明，第1、3天在胃肠均有一定量重组菌，且大肠中重组菌数量多于胃和小肠，随后胃肠中重组菌均迅速减少，仅在大肠中仍有一定量的重组菌，第11天时胃肠仅分离到极少量的重组菌。结论本研究获得胞内表达HIV-1gag前体蛋白Pr55的重组乳酸乳球菌，其可在胃肠中短期存活，可作为预防HIV-1感染的候选疫苗。
- 张彩荣吴玲玲侯向前马正海
- 关键词：乳酸乳球菌HIV-1GAG定植黏膜免疫
- 表达HIV-1 gag蛋白的重组乳酸乳球菌诱导小鼠产生体液免疫应答被引量：3
- 2014年
- 目的分析表达HIV-1 gag蛋白的重组乳酸乳球菌通过口服、滴鼻、皮下注射以及上述3种方式联合免疫小鼠诱导的体液免疫反应。方法将50只BALB/c小鼠随机分成5组,每组10只。表达gag的重组乳酸乳球菌分别通过口服、滴鼻、皮下注射以及上述3种方式联合免疫小鼠,对照组口服含PMG36e空载体的乳酸乳球菌,接种菌量均为109菌落形成单位(CFU),连续免疫3次,每次间隔2周,其中口服和滴鼻每次连续免疫3 d。采集免疫前和每次免疫后2周小鼠的血清,ELISA检测gag特异性的IgG水平。结果表达gag的重组乳酸乳球菌经口服、滴鼻、皮下注射以及3种方式联合免疫均诱导小鼠产生了gag特异性IgG,且联合免疫组gag IgG水平显著高于其他各实验组(P<0.01)。初次免疫后6周,口服和皮下注射免疫组gag IgG水平显著高于滴鼻免疫组(P<0.01)。免疫3次后各组血清中gag抗体的阳性率:口服免疫组分别为40%、40%、90%;滴鼻免疫组分别为10%、20%、20%;皮下免疫组分别为10%、60%、90%;联合免疫组的阳性率在初次免疫后2周已达到100%。结论表达HIV-1 gag的重组乳酸乳球菌载体疫苗经口服、滴鼻、皮下注射及3种方式联合免疫均能诱导小鼠产生特异性的体液免疫反应,多种途径联合免疫可增强乳酸乳球菌载体疫苗的免疫效果。
- 赵晓飞张彩荣刘晓娟马正海
- 关键词：乳酸乳球菌HIV-1GAG免疫途径
- 采用报告基因检测HSV-1潜伏相关启动子在神经细胞的特异性激活
- 2011年
- 1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)潜伏相关转录本启动子(latencyassociated transcripts promoter,LATP)在病毒于神经组织中潜伏感染期间保持活性.本研究利用PCR技术扩增获得HSV-1的LATP,并将LATP分别插入增强型绿色荧光蛋白(enhanced greenfluorescent protein,EGFP)基因和荧光素酶基因前,获得真核表达质粒pcDNA/LATP/EGFP和pGL3/LATP/Luc.pcDNA/LATP/EGFP转染293T细胞后,检测到绿色荧光蛋白基因的表达,表明LATP具有启动子活性,其活性低于PCMV.继而以pcDNA/LATP/EGFP和pGL3/LATP/Luc分别转染HeLa细胞、Eca109细胞、U251细胞和SK-N-SH细胞.结果表明,绿色荧光蛋白基因和荧光素酶基因在U251和SK-N-SH两种神经细胞中表达水平极显著(P<0.01),高于其在HeLa和Eca109两种非神经细胞中的表达.说明LATP能够驱动基因在神经组织细胞中高效表达,可作为神经组织特异性表达元件.
- 郭景霞李永鑫朱慧史茜张彩荣朱红娟马正海
- 关键词：1型单纯疱疹病毒启动子神经组织
- 携载人IL－12的重组1型单纯疱疹病毒溶瘤特性的观察被引量：5
- 2017年
- 目的构建删除ICP47并携载人IL－12的重组HSV－1，并在体外培养细胞和荷瘤小鼠体内研究其溶瘤特性。方法利用细菌人工染色体技术获得删除ICP47的重组HSV－1 MH1005及其携载人IL－12的重组HSV－1 MH1006。检测HSV－wt、MH1005和MH1006感染多种神经肿瘤细胞时的复制水平和抑瘤效果。在小鼠背部两侧皮下注射Neuro－2a细胞建立荷瘤小鼠模型，分别于0、3和6 d在一侧瘤内注射2×106 PFU HSV－wt、MH1001（删除IR的重组HSV－1）、MH1005、MH1006和病毒储液（Mock），观察肿瘤大小和小鼠生存时间。结果MH1005、MH1006和HSV－wt在293FT细胞中的复制能力差异均无统计学意义（均P〉0.05）；重组HSV－1在G422和Neuro－2a细胞中的复制能力高于SK－N－SH细胞；重组HSV－1可显著抑杀神经肿瘤细胞。荷瘤小鼠治疗15 d时，HSV－wt、MH1001、MH1005和MH1006治疗组病毒注射侧肿瘤体积依次为（6 267±484）、（5 730±1 071）、（4 537±538）和（4 150±476） mm3，显著〈Mock组肿瘤体积（6 957±722） mm3（P〈0.01）；未注射侧肿瘤中，MH1005[（5 952±607） mm3]和MH1006[（5 473±661） mm3]治疗组肿瘤体积显著〈HSV－wt组[（6 785±1 063） mm3]、MH1001[（6 774±808） mm3]和Mock组[（6 957±190） mm3]（均P〈0.05）；小鼠治疗35 d时MH1005（100%）和MH1006组（100%）生存率显著高于MH1001组（67%）、HSV－wt治疗组（50%）和Mock组（33%）（均P〈0.05）。结论MH1005和MH1006可感染神经肿瘤细胞并高效复制，其直接抑杀肿瘤细胞的同时还可诱导小鼠对肿瘤细胞的免疫排斥，并延长荷瘤小鼠生存期。
- 刘晓娟王雪莹郭景霞朱红娟张彩荣马正海
- 关键词：白细胞介素12神经胶质瘤
