卢洋
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人IL-12 cDNA的克隆被引量：1
- 1999年
- 目的：克隆人ＩＬ－１２的ｃＤＮＡ。方法：利用ＲＴ－ＰＣＲ从人ＮＣ３７淋巴母细胞中克隆出ＩＬ－１２中两个亚基ｐ３５和ｐ４０的ｃＤＮＡ并进行序列测定。结果：从ＮＣ３７细胞中克隆的ｐ３５ｃＤＮＡ序列（ＧｅｎＢａｎｋ登录号为ＡＦ１０１０６２）与先前登录在Ｇｅｎ－Ｂａｎｋ上的Ｍ６５２７１（ＮＣ３７细胞来源）和Ｍ６５２９１（ＲＰＭＩ８８６６细胞来源，美国专利号：５６４８４６７）的ｐ３５ｃＤＮＡ序列分别有２处和１处碱基不同：编码第４４位氨基酸残基密码子的第３个碱基Ｍ６５２９１是Ｃ，而Ｍ６５２７１和本研究ＡＦ１０１０６２的相应序列２是Ｇ；编码第２４４氨基酸残基密码子的第３个碱基，Ｍ６５２７１序列是Ｃ，而Ｍ６５２９１和ＡＦ１０１０６２的相应序列是Ｔ；编码第２４７氨基酸残基密码子的第２个碱基Ｍ６５２７１序列是Ｃ，而Ｍ６５２９１和ＡＦ１０１０６２的相应序列是Ｔ。此外，本研究克隆的ｐ４０ｃＤＮＡ序列与登录在ＧｅｎＢａｎｋ的ｐ４０ｃＤＮＡ（Ｍ３８４４４）序列完全相同。结论：尽管本研究克隆的ｐ３５ｃＤＮＡ序列与已知的两种ｐ３５ｃＤＮＡ序列分别有２处和１处碱基不同，但其编码的氨基酸序列却与专利登记的ｐ３５ｃＤＮＡ（Ｍ６５２９１）编码的氨?
- 刘彦君王华菁刘小萍周倩卢洋王皓卫立辛郭亚军
- 关键词：CDNA聚合酶链反应白细胞介素12克隆
- pGFP-FL质粒的构建及其在FL基因修饰性肿瘤疫苗中的应用被引量：1
- 2002年
- 目的 构建一个含有绿色荧光蛋白（GFP）报告基因,并能够用于Ⅲ型酪氨酸激酶受体Flt3的配体（FL）基因修饰性肿瘤疫苗研究的质粒载体。方法 利用常规分子生物学方法设计并构建含有一个FL基因和一个GFP基因的pGFP-FL质粒。在该质粒中,以CMV启动子驱动FL基因,同时以肽链延长因子（EF-1α）启动子驱动GFP基因,并引入原核和真核选择基因KanR/neo。对所获得的pGFP-FL质粒以限制性内切酶酶切鉴定后,再将其导入Hepa1-6细胞内,直接在荧光显微镜下观察GFP基因的表达情况,同时以RT-PCR和PCR产物测序的方法对GFP阳性细胞内FL基因的表达进行检测。结果 质粒的酶切鉴定结果表明所构建的pGFP-FL与预期的结构一致,FL和GFP两者能同时在Hepa1-6细胞内表达。结论 本研究构建了一种新型的FL基因修饰肿瘤疫苗研究载体,位于该载体上的GFP的表达能够反映FL基因的转录表达情况,可以作为FL基因表达的报告基因。
- 卢洋钱卫珠王皓吴孟超郭亚军薛琪
- 关键词：肿瘤疫苗分子生物学质粒载体
