- SH_2A基因对细胞信号转导的影响及其亚细胞定位被引量：5
- 2003年
- 目的 研究 Src同源域 2 (src homology2 ,SH2 ) A基因在细胞信号转导中的作用并进行亚细胞定位。方法 通过 RT- PCR方法扩增 SH2 A c DNA编码序列 ,构建真核重组表达载体 pc DNA3.1-SH2 A,利用脂质体转染肝癌 Bel74 0 2细胞、COS7细胞 ,检测蛋白酶 C(protein kinase C,PKC)、酪氨酸蛋白激酶 (tyrosine protein kinase,TPK)、丝裂原激活蛋白激酶 (mitogen activated protein kinase,MAPK)活性的改变 ;另构建 p EGEP- SH2 A,转染同前 ,荧光显微镜观察荧光定位。结果 测序结果显示真核重组表达载体 pc DNA3.1- SH2 A及 p EGFP- SH2 A中均含有 SH2 Ac DNA编码序列 ;肝癌 Bel74 0 2细胞、COS7细胞转染pc DNA3.1- SH2 A后 ,胞浆 PKC的活性下降了 4 0 %左右 ,MAPK和 TPK活性未见明显改变。荧光显微镜观察发现 SH2 A基因在细胞质中表达。结论 SH2 A基因编码蛋白在 PKC信号转导通路中起抑制作用 ;SH2 A基因编码蛋白定位于细胞质。
- 丁茜赵彦艳孙志军于大海
- 关键词：细胞信号转导亚细胞定位蛋白激酶C肿瘤
