郭新
- 作品数：50 被引量：55H指数：4
- 供职机构：北京大学深圳医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞生殖细胞分化相关基因表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)分化形成拟胚体(embry-oid bodies,EBs)后生殖细胞分化相关基因表达的影响及机制。方法:mESCs分化形成EBs 3 d后接种于不同基质蛋白包被的培养皿中,包括人工基底膜(matrigel,M组)、纤维连接蛋白(fibronectin,F组)、层粘蛋白(laminin,L组)、胶原(collagen,C组)和非生物活性底物琼脂糖(agarose,A组),同时设不加任何基质蛋白的空白对照组(B组)。RT-PCR检测EBs在不同基质蛋白上d1～d4期间生殖细胞分化相关基因的表达,以及mESCs内源性基质蛋白FN(fibronectin)、LN(laminin)以及整合素受体β1基因的表达。结果:L组和F组EBs易贴壁分化,RT-PCR结果也证实原始生殖细胞(PGCs)分化基因Blimp-1、Stella、Mvh和减数分裂启动基因Stra8在L组和F组表达总体趋势为逐渐增强;M组和C组的表达趋势不明显;A组基因表达水平整体偏低;空白对照B组基因表达水平整体偏高但均呈下降趋势。L组和空白对照组细胞表达内源性基质蛋白FN、LN以及整合素受体β1。结论:层粘蛋白/β1信号途径可能对mESCs向PGCs分化具有指导作用,外源性层粘蛋白可能通过其受体β1亚单位传递诱导信号,调节mESCs来源的EBs向PGCs分化,FN可能通过其他整合素受体亚单位发挥作用。无任何外源性基质蛋白时,自身分泌的内源性基质蛋白也促进细胞分化。
- 郭新漆正宇秦洁崔光辉桂耀庭蔡志明
- 关键词：基质蛋白小鼠胚胎干细胞拟胚体原始生殖细胞
- PigM基因在小鼠中的表达及其在精子发生中的功能探讨被引量：4
- 2006年
- 目的筛选与精子发生相关的基因。方法将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出差异表达的基因。利用网络信息资源对该基因进行生物学信息分析。RT-PCR分析该基因在小鼠不同发育阶段睾丸及小鼠不同组织中的表达。结果通过4、91、8、35、54、日龄和6月龄小鼠睾丸的芯片信号比较筛选出一个差异表达杂交点(GenBank登录号:NM-026234),生物信息学分析发现该基因全长3 979 bp,含有1 272 bp的完整ORF,编码一个有423个氨基酸、分子量为49.788的蛋白质。PigM蛋白与大鼠同源基因PigM蛋白有96%的同源性,与人PigM蛋白有89%的同源性,显示该基因在哺乳动物中高度保守。RT-PCR分析表明PigM基因特异性表达于睾丸组织及18日龄后的小鼠睾丸中。结论PigM基因的表达与小鼠精子发生的过程一致,显示其可能在精子发生中起着重要作用。解释该基因的生物学功能,可对揭示人类无精、弱精和少精引起的男性不育的病因,治疗和预防男不育及寻找新的男子避孕药的靶位点具有重要意义。
- 唐爱发余振东桂耀庭郭新张立兵张键荣刘春霖蔡志明
- 关键词：基因芯片精子发生
- 精子发生相关基因的筛选和功能研究
- 桂耀庭唐爱发蔡志明余振东郭新张立兵张键荣李贤新石敏李世勤朱辉于洁房家智
- 该课题筛选出小鼠睾丸组织年龄依赖性表达基因2058个，鉴定8个人体睾丸特异性表达新基因，对8个功能未知的睾丸特异性表达新基因和5个已知基因进行深入研究，确定了它们在小鼠和人体睾丸组织的表达特征。发现同源盒基因-A10，表...
- 关键词：
- 关键词：精子发生基因筛选
- 小鼠和人生精特异性新基因TSCPA的表达分析
- 目的:筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因。
方法:将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出特异表达的基因。用生物学信息软件对该基因进行生物...
- 余振东蔡志明吴波唐爱发陈静郭新秦洁桂耀庭
- 关键词：精子发生睾丸组织RT-PCR分析
- 文献传递
- Lin28调节小鼠胚胎干细胞向原始生殖细胞分化
- 2011年
- 目的探讨小鼠胚胎干细胞（mouse embryonic stem cells，mESCs）向原始生殖细胞（primordial germcells，PGCs）分化过程中特异基因表达变化及可能机制。方法mESCs分化形成拟胚体（embryoid bodies，EBS），不同浓度atRA（1uM，2uM，5uM）持续诱导EBS16h、2d和5d，RT—PCR、和免疫荧光分别检测Lin28和Blimpl以及相应蛋白的表达变化。结果atRA诱导16h的EBs其Lin28mRNA表达量较高，随着诱导时间延长而逐渐降低，Blimpl则无明显变化。WB结果显示EBs的Lin28蛋白表达随诱导时间延长逐渐减弱，而Blimpl蛋白表达逐渐增强。免疫荧光显示Lin28和Blimpl阳性信号均定位于细胞胞浆，其变化特点与WB结果相一致。结论EBs经atRA诱导后可影响Lin28的表达，Lin28和Blimpl的变化并不协调，其蛋白表达随着诱导会随之发生变化。atRA诱导可能使PGCs分化的Lin28低水平表达时期提前出现。
- 郭新张艳敏漆正宇秦洁崔光辉桂耀庭蔡志明
- 关键词：小鼠胚胎干细胞生殖细胞
- SPACA4基因在人和小鼠的表达及其生物信息学分析被引量：1
- 2007年
- 目的 分析SPACA4在小鼠和人的表达特性.方法 本研究通过对小鼠SPACA4基因（mSPACA4）在4、9、18、35、54d和6月龄小鼠睾丸中的Affymetrix芯片杂交,结合RT-PCR实验和生物信息学软件,分析mSPACA4及其同源基因hSPACA4的表达特性.结果 芯片杂交结果显示,mSPACA4基因在小鼠35d睾丸中开始表达,半定量RT-PCR结果与之完全一致.RT-PCR结果还显示,mSPACA4和hSPACA4分别在8种小鼠组织和10种人组织中呈现睾丸特异性表达.生物信息学分析显示,亚细胞定位预测该基因是跨膜蛋白（34.8%）或质膜上（34.8%）表达.mSPACA4蛋白的信号肽剪切位点在第19～20个氨基酸之间,跨膜区在第2～20及101～126个氨基酸之间.结论 mSPACA4和hSPACA4均为睾丸特异性表达基因,mSPACA4特异性地在35d龄后的小鼠睾丸中表达,SPACA4具有作为男子避孕药的靶点进行研究的潜在价值.
- 唐爱发余振东桂耀庭郭新龙云李贤新周锦堂朱辉高新蔡志明
- 关键词：基因芯片精子发生
- 精子发生相关基因的筛选与鉴定
- 目的：分析睾丸基因表达谱,筛选和鉴定精子发生过程中起重要作用的睾丸特异性基因。方法：本研究采用美国 Affymetrix 公司小鼠全基因组表达谱芯片(GeneChip Mouse Genome430 2．0),比较出生后...
- 桂耀庭唐爱发余振东郭新龙云李贤新周锦堂朱辉叶炯贤蔡志明
- 文献传递
- Stra8基因启动子逆转录病毒包装细胞株的建立
- 2011年
- 目的建立小鼠Stra8基因启动子控制绿色荧光蛋白EGFP表达（Pstra8-EGFP）的逆转录病毒包装细胞株，以方便地将Pstra8-EGFP转导到目的细胞，为生殖细胞鉴定分选提供基础。方法PCR扩增小鼠基因组DNA中的Stra8基因启动子片段，构建Stra8基因启动子控制表达的EGFP报告基因逆转录病毒质粒。将质粒脂质体法转染PT67病毒包装细胞，G418抗性筛选后，梯度稀释法将包装细胞单克隆化并扩增成多个细胞株。以包装细胞培养上清液感染NIH3T3细胞的所形成的G418抗性阳性细胞数定义病毒滴度，确定高滴度病毒包装细胞株。通过染毒小鼠骨髓间充质干细胞（mouse bone marrow mesenchymal stemcells，MSCs）验证该细胞株的Pstras8-EGFP转导效果。结果所建立的病毒包装细胞株培养上清液滴度达到1．3×10^6 cfu／ml。MSC经包装细胞培养上清液感染后，在（retinoicacid，RA）诱导下能表达EGFP蛋白。结论成功构建了将Pstras．EGFP转导到目的细胞的PT67逆转录病毒包装细胞株。
- 漆正宇崔光辉郭新秦洁张艳敏桂耀庭蔡志明
- 关键词：视黄酸间充质干细胞生殖细胞
- miR-216b在肾癌中表达及临床意义研究
- 余祖虎陈独群张强任瑞池泽湃王亚东李彩玲秦洁郭新崔光辉周亮桂耀庭来永庆
- 小鼠和人生精特异性新基因TSCPA的表达分析
- 目的:筛选与精子发生相关的睾丸特异性新基因。方法:将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,通过杂交信号的比较,筛选出差异表达的基因。用生物学信息软件对该基因进行生物学信息分析。...
- 余振东吴波唐爱发陈静郭新秦洁
- 关键词：精子发生隐睾
- 文献传递
