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秦洁: 作品数：74 被引量：198H指数：7; 供职机构：北京大学深圳医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金深圳市科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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鸡睾丸细胞分离方法与培养的研究被引量：4: 2007年; 吴洪李碧春周冠月孙思宇秦洁; 关键词：睾丸细胞体外培养哺乳类动物啮齿类动物支持细胞精原细胞

鸡胚胎原始生殖细胞的体外培养被引量：10: 2006年; 旨在对影响鸡胚胎原始生殖细胞(PGC s)体外培养、传代过程的各种影响因素进行探讨。将分离到的19期鸡胚胎生殖腺的PGC s在以鸡胚成纤维细胞(CEF)为饲养层,添加细胞因子的培养体系中进行培养、传代。经冷冻保存的PGC s在添加细胞因子的培养体系中能增殖,并具有分化能力。从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定等方面对培养过程中的鸡胚胎PGC s进行检测。结果表明,采用传至3代的CEF为饲养层,多次离散法进行传代所获得的5代鸡胚胎PGC s不但能有效维持PGC s的未分化状态和正常二倍体核型,也具有其作为多能性胚胎干细胞的一系列特征。; 秦洁蔡琳琳李碧春韩威周冠月吴宏孙思宇; 关键词：鸡胚胎体外培养

不同蛋白质水平日粮对仔猪部分生产性能的影响被引量：1: 2003年; 选用三元杂交系[杜×(大×长)]的初生仔猪八窝,根据母猪胎次、泌乳力、产仔数以及仔猪出生日龄、平均出生重相近似的原则随机分成两组,高蛋白组四窝36头,低蛋白组四窝35头。两组仔猪皆于7日龄时分别采用两个粗蛋白水平(21％及17.8％)的粉状料补饲,以研究不同蛋白质水平日粮对仔猪日增重、腹泻等生产性能的影响。试验结果表明,在相同的饲养环境下:1.高蛋白组的平均日增重高于低蛋白组,但差异不显著(p>0.05)。2.高蛋白组的料肉比低于低蛋白组(断奶后1.834:1及1.616:1)。3.高蛋白组的腹泻率高于低蛋白组。; 秦洁; 关键词：日粮仔猪胎次泌乳力

miRNA-138与EZH2在肾透明细胞癌发生发展中作用机制的研究: 2014年; 目的:探讨miRNA-138及其调控靶基因EZH2在肾透明细胞癌(RCC)发生发展中的相关作用机制。方法:利用第二代大规模平行测序技术对10例RCC及对应癌旁组织进行全基因组测序,在肾癌组织中筛选出表达显著上调的miRNA-138;其次在人肾癌细胞株786-O、ACHN、Caki-1、769-P、os-rc-2及对照细胞人胚肾细胞293T中对miRNA-138进行转染,采用划痕实验检测miRNA-138对细胞株侵袭和迁移能力的影响;进而用多种预测软件预测靶基因,对预测的候选靶基因EZH2进行PCR验证。结果:发现miRNA-138在RCC中表达上调,并能够显著促进人肾癌细胞株786-O、ACHN的迁移;而其候选靶基因EZH2的表达在临床组织标本中显著上调;相应蛋白变化需要进一步验证。结论:EZH2表达在RCC中明显高于正常组织,提示EZH2可能是RCC一个敏感的生物学标志。推测miRNA-138与其靶基因EZH2可能参与肿瘤代谢和细胞凋亡等信号通路,在RCC的发生发展中发挥重要作用。; 秦洁李晓庆赵春娟漆正宇郭新龙霞余振东桂耀庭; 关键词：肾透明细胞癌 EZH2

鸡胚原始生殖细胞诱导分化为神经元样细胞的研究被引量：1: 2005年; Primordial germ cells(PGCs) isolated from gonads of stage 19 by Ficoll density gradient centrifugation were cultured in DMEM medium in vitro.Then the second passage PGCs were induced to differentiate into neuron-like cells by different induction media.Specific markers and structures were detected by histochemistry method.The results showed that induction medium RA and IBMX were the best ways to induce PGCs into neuron-like cells,and almost 80%-85% cells exhibited typical neuron-like phenotype after induction.Special Nissl body was found by histochemistry.The effect of induction medium RA+IBMS,RA+BHA+DMSO and RA+BHA+DMSO+IBMX were better than that of induction medium BHA+DMSO.Under the same induction medium,about 80%-85% neuron-like cells could be detected no matter what PGCs were cultured 24 h,48h or 72 h in vitro.; 蔡琳琳秦洁李碧春肖小珺陈国宏吴信生吴圣龙; 关键词：原始生殖细胞分化神经元样细胞

LIN28A和LAMP1在膀胱癌细胞系中的表达及意义被引量：3: 2014年; 目的:探讨LIN28A和LAMP1在膀胱癌细胞系中表达情况,以及两者之间的关系,推测其可能临床意义及对肿瘤进展的影响。方法:采用RT-PCR检测膀胱癌细胞系LIN28A、LIN28B和LAMP1表达,免疫荧光检测LIN28A和LAMP1二者蛋白表达定位;LIN28A敲减后通过qRT-PCR检测LAMP1的mRNA表达变化。结果:5个癌细胞系T24、UM-UC3、J82、5637和SW780和正常移行上皮细胞系SV-HUC-1均表达LIN28A,其中J82也表达LIN28B;5个癌细胞系均表达LAMP1,SV-HUC-1不表达LAMP1;LIN28A和LAMP1蛋白均定位在胞浆;LIN28A敲减后对LAMP1的mRNA表达变化无明显影响,相应蛋白变化需要进一步验证。结论:4个膀胱癌细胞系T24、5637、UM-UC3和SW780可以用于LIN28A与肿瘤相关的机制研究,而J82可用于LIN28B的机制研究。LIN28A对肿瘤细胞和干细胞的调控方面可能具有相似性,敲减后对其靶点mRNA表达量无明显影响,LAMP1蛋白可能对肿瘤细胞侵袭转移具有抑制作用。; 张艳敏秦洁漆正宇龙霞崔光辉郭新; 关键词：膀胱癌

精子介导转基因动物的制备被引量：1: 2005年; 近年来 ,通过显微注射DNA至孵育的卵母细胞原核或外源基因转染后的胚胎干细胞进行转基因动物的生产已取得了令人瞩目的成就。在过去的 1 0年中 ,以精子作载体制备转基因哺乳动物或脊椎动物也取得了一些不同程度的进展。这些技术主要包括 :直接将外源DNA与精子共孵育至成熟 ;提取分离的精子DNA或进行预处理至精子发育成熟 ;以及在辅助受精前分离精子细胞等。此外 ,一些显微注射技术 ,如在输精管内进行体内直接转染雄性生殖细胞 ;将体内转染的雄性生殖细胞植入已分离的雄性生殖细胞 ,再显微注射至受体的睾丸 ,这些技术也逐渐成熟起来。研究表明 ,通过体内、体外转染外源DNA的显微操作技术只需将雄性受体与野生型雌性交配就可产生出转基因的后代个体 ,同时也避免了辅助受精和胚胎操作带来的机械损伤 ,因此具有一定的优势。本文综述了精子介导转基因 (SMGT)技术的发展历程、研究现状及前沿进展。; 秦洁李碧春蔡琳琳季从亮; 关键词：精子转染显微操作转基因外源DNA

生殖细胞分化相关基因在人胚胎干细胞中的表达及其意义: 研究背景和目的:目前已经证明人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hES)能分化为三个胚层来源的细胞,包括神经、肌肉、胰腺、内皮等,但向生殖细胞分化方面报道很少.取得突破性进展是在2003年...; 郭新秦洁唐爱发余振东桂耀庭蔡志明; 关键词：未分化人胚胎干细胞相关基因; 文献传递

小鼠iPS细胞具备诱导性原始生殖细胞分化潜能的研究被引量：2: 2011年; 目的:探讨小鼠诱导性多能干细胞IP14D-1是否具备诱导性原始生殖细胞(induced primordial germcells,iPGCs)分化潜能,以及特异基因表达变化及可能机制。方法:未分化IP14D-1培养扩增,分化形成诱导性拟胚体(induced embryoid bodies,iEBs)。RT-PCR和免疫荧光分别检测4、7、9 d的iEBs中Lin28、Blimp1、Stra8和Mvh的表达变化和蛋白定位情况。结果:未分化IP14D-1同小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)相同,Lin28表达较弱,Blimp1表达相对较强,Mvh和Stra8也在这两种细胞及其相应iEBs和EBs中表达,但均无明显差别。IP14D-1分化形成的iEBs从4 d生长到7 d时,Lin28表达逐渐增强,到9 d时表现为下降,Blimp1表达则随着iEB生长时间延长而逐渐降低。结论:建立了IP14D-1和相应拟胚体(iEBs)的完善、稳定的培养及分化体系;未分化IP14D-1与mESCs在Lin28、Blimp1、Mvh和Stra8表达方面无明显差别;iEB和EBs的Mvh和Stra8表达也无明显差别。IP14D-1及iEBs具有iPGCs分化潜能,且可能是7 d的iEBs内iPGCs分化数量较多,之后进入iPGCs分化的Lin28低表达时期。; 郭新张艳敏漆正宇秦洁崔光辉桂耀庭蔡志明; 关键词：诱导性多能干细胞原始生殖细胞小鼠

鸡胚19期原始生殖细胞慢速冷冻和玻璃化冷冻保存的研究被引量：3: 2007年; 本研究对发育至第19期的鸡胚性腺原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)分离提纯后,在DMEM中添加冷冻保护剂DMSO(二甲基亚砜)、EG(乙二醇)、蔗糖、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)分别组成6种慢速冷冻保护液和6种玻璃化冷冻保护液,进行超低温冷冻保存。复苏后苔盼蓝染色测定细胞存活率,体外接种培养、传代。结果:①慢速冷冻保存中,PGCs在慢速冷冻液V(10%EG+10%FBS+0.1mol/L蔗糖)条件下复苏后存活率最高(92.20%),且与慢速冷冻液I(10%DMSO+10%FBS)存活率之间差异显著(P<0.05)。②玻璃化冷冻保存中,PGCs在玻璃化冷冻液I(10%DMSO+10%EG+20%FBS+10%PVP)条件下复苏后存活率最高(84.15%),且与其余5种玻璃化冷冻液下复苏后存活率之间差异均极显著(P<0.01)。③培养传至第3代的慢速冷冻复苏后PGCs细胞和培养传至第2代的玻璃化冷冻复苏后PGCs细胞,PAS染色、AKP染色呈阳性并保持完整的二倍体核型。; 韩威李碧春朱云芬秦洁周冠月陈国宏张学余; 关键词：原始生殖细胞玻璃化冷冻保存

秦洁

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