郝志宏
- 作品数:122 被引量:276H指数:9
- 供职机构:广州市第一人民医院更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生环境科学与工程交通运输工程化学工程更多>>
- 基于siRNA技术的TRPC6基因沉默对血管紧张素Ⅱ诱导的足细胞自噬和凋亡的影响被引量:2
- 2017年
- 目的采用小分子干扰RNA(siRNA)干扰技术沉默足细胞相关分子瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的自噬和凋亡的影响。方法设计、构建siRNA,转染足细胞,使TRPC6基因沉默,采用流式细胞术、激光共聚焦、透射电镜及Western Blot技术检测不同浓度siRNA转染后TRPC6基因表达,优化获得TRPC6基因沉默最佳效果的条件。体外培养小鼠肾小球足细胞,设立对照组、AngⅡ组、空载体组、沉默TRPC6基因组和AngⅡ+沉默TRPC6基因组。对照组用含0.02%DMSO的RPMI 1640培养液培养;AngⅡ组加入AngⅡ(10^(-8)M)刺激足细胞;空载体组加入空载体至足细胞;沉默TRPC6基因组运用siRNA干扰技术沉默TRPC6基因;AngⅡ+沉默TRPC6基因组同时加入AngⅡ(10^(-8)M)及沉默TRPC6基因。处理12、24 h和48 h后分别收集细胞,采用流式细胞仪检测足细胞凋亡率,Western Blot检测TRPC6及自噬相关蛋白的表达,透射电镜及激光共聚焦电子显微镜观察自噬相关蛋白的分布。结果自噬在正常足细胞的表达量很微弱,AngⅡ组足细胞凋亡率明显升高,沉默TRPC6使足细胞凋亡率明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜下AngⅡ组示足细胞超微结构发生改变,自噬表达增加,胞质中出现独立双层膜结构,胞质成分及溶酶体等细胞器形成双层及多层膜结构的自噬体。沉默TRPC6使自噬表达下降,与AngⅡ组比较差异有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦检测AngⅡ组LC3-Ⅱ的表达增加,沉默TRPC6使LC3-Ⅱ表达趋于稳定,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ促进足细胞的凋亡,沉默TRPC6基因能有效保护AngⅡ诱导的肾小球足细胞损伤,发挥保护足细胞的作用。
- 于生友于力郝志宏张瑶
- 关键词:足细胞瞬时受体电位通道自噬
- 他克莫司与环磷酰胺治疗儿童激素依赖/频复发型肾病综合征的疗效评价
- 张瑶郝志宏于力
- 血浆置换治疗儿童肺出血-肾炎综合征(Goodpasture病)的体会
- 郝志宏于力王丽娜
- 儿童肾病综合征血小板参数与肾损害的分析被引量:2
- 2016年
- 目的探讨儿童肾病综合征(NS)的血小板相关参数与。肾功能损害的关系。方法选择168例NS患者作为观察组,根据估算肾小球滤过率(eGFR)分期分为3组,选健康儿童100例为对照组。检测各组血常规、肝肾功能等,采用SPSS21.0软件进行统计分析。结果①观察组患儿与对照组比较,血小板总数(PLT)f(407.38±114.53)×10^9/L:(312.44±120.98)×10^9/L升高,血小板平均容积(MPV)[(9.36±0.83)fl:(9.62±0.88)f1]降低,差异有统计学意义(P〈0.05);②PLT、MPV、血小板分布宽度(PDW)在肾功能3个分期比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论儿童NS患者的PLT、MPV较健康儿童升高。
- 刘元春郝志宏于力
- 关键词:肾病综合征血小板总数血小板平均体积儿童
- 甘草甜素对肾脏转化生长因子β1作用的实验研究被引量:1
- 2009年
- 目的:探讨甘草甜素对肾小球硬化模型中转化生长因子β1(TGFβ1)作用。方法:采用尾静脉注射阿霉素方法建立大鼠肾小球硬化模型。实验随机分为模型组、治疗组和对照组。检测各组第4和8周各项指标的变化。包括①24h尿蛋白定量,血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胆固醇(Cho)和白蛋白(Alb)。②各组肾皮质进行光镜等病理学检测。③应用免疫组织化学方法检测肾组织内转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白质的表达。④采用标准曲线法进行荧光定量PCR检测肾组织内TGFβ1mRNA的表达。结果:①治疗组与模型组相比较,24h尿蛋白定量、BUN、Scr、Cho和Alb均有不同程度改善(p<0.05)。②肾皮质病理学改变肾小球硬化程度治疗组明显轻于模型组。③肾组织内TGFβ1蛋白和mRNA表达治疗组与模型组比较表达峰值均有不同程度降低(p<0.05)。结论:从蛋白和mRNA水平同时证实甘草甜素对TGFβ1蛋白和mRNA的表达有明显的抑制作用,对大鼠肾小球硬化有早期保护作用,为临床应用提供了依据。
- 黄逸辉于力张蕾郝志宏王丽娜邓颖
- 关键词:甘草甜素肾小球硬化转化生长因子Β1
- 肾病综合征激素耐药型与激素敏感型患儿CLNS1A基因的差异表达分析
- 目的探讨原发性肾病综合征激素耐药型(steroid-resistant nephrotic syndrome,SRNS)和激素敏感型(steroid- sensitive nephrotic syndrome,SSNS)...
- 陈蓉燕于力郝志宏王丽娜温跃强
- 文献传递
- ACEI对肾小球系膜细胞分泌细胞外基质及TIMP-1的影响
- 目的:观察血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)-福辛普利(FOS)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)分泌细胞外基质(ECM)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,ECM 包括:纤维连接蛋白(F...
- 于力郝志宏王丽娜翁志媛张蕾赵丹张又祥
- 文献传递
- 福辛普利对肾小球系膜细胞层粘连蛋白及mRNA表达的影响被引量:1
- 2006年
- 目的观察新一代血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)福辛普利(FOS)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)产生的细胞外基质(ECM)成分层粘连蛋白(LN)的影响及FOS防治肾小球硬化的机制。方法按经典方法体外培养大鼠GMC,转种培养后分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS+FOS组。采用ELISA法测定GMC培养上清液LN含量,荧光半定量PCR方法检测LNmRNA的表达。结果LPS组GMC分泌LN蛋白及mRNA的表达明显高于对照组(P<0·05),LPS+FOS组GMC分泌LN蛋白及mRNA的表达较LPS组明显下降(P<0·05)。结论FOS从蛋白和mRNA两个水平对体外培养大鼠GMC产生的LN有明显的抑制作用,提示FOS抑制GMC产生ECM可能是延缓肾小球硬化的重要作用机制之一。
- 王丽娜于力郝志宏翁志媛
- 关键词:血管紧张素转化酶抑制药福辛普利层粘连蛋白
- 血管紧张素转换酶抑制剂与激素联合治疗婴幼儿肾病综合征的疗效评价
- 目的评价血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)与激素联合应用治疗婴幼儿肾病综合征(Ns)的临床疗效。方法选择住院患儿初次确诊为婴幼儿NS42例,其中男26例,女16例。肾炎性肾病30例,单纯性肾病12例。随机分为两组,观察组...
- 于力王丽娜郝志宏
- 儿童肾病综合征细胞免疫功能检测的临床意义被引量:1
- 2004年
- 目的 探讨儿童原发性肾病综合征 (NS)淋巴细胞免疫功能的动态变化 ,检测可溶性白介素 2受体 (sIL - 2R)和T细胞亚群 ,阐明其临床意义。方法 应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法对 2 5例NS活动期和 2 0例缓解期患儿的血清和尿液检测sIL - 2R浓度。应用流式细胞仪检测T细胞亚群的变化。结果 ①NS活动期组血清和尿液sIL - 2R浓度分别高于缓解期组 (P <0 .0 1 )和对照组 (P<0 .0 1 ) ;②NS活动期组CD3+ 、CD4+ 、CD4+ /CD8+ 比值、NK[CD(1 6 +56) ] + 细胞均明显低于缓解期组 (P <0 .0 1 )和对照组 (P <0 .0 1 )。结论 NS细胞免疫功能减低 ,血和尿中sIL - 2R浓度的变化可作为肾病综合征活动指标之一。
- 钟志敏翁志媛王丽娜郝志宏于力
- 关键词:儿童肾病综合征细胞免疫功能