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奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定与DGGE追溯: 2014年; 通过对隐性乳房炎病原菌的分离鉴定和药敏试验，以及对治疗前的奶样进行DGGE追溯性分析，研究乳房炎奶样中微生物区系结构对乳房炎的治疗和复发的影响。结果显示，引起奶牛隐性乳房炎的主要病原菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、表皮葡萄球菌以及克雷伯菌。通过对大肠杆菌性乳房炎奶样进行DGGE追溯性分析，发现乳房炎奶样中除大肠杆菌外，还有假单胞菌、芽孢杆菌、链球菌、沙雷氏菌等其他的致病菌，并且奶样中微生物区系结构与奶牛乳房炎的治愈时间和乳房炎复发有着紧密的联系，区系结构越复杂，治愈的时间越长，越容易复发，引起后期乳房炎复发的病原菌包含在治疗前的奶样中。; 高潮刘国庆连英琪; 关键词：奶牛隐性乳房炎 DGGE 病原菌大肠杆菌性无乳链球菌区系结构

SELEX技术体外筛选单增李斯特菌适配子及其荧光快速检测方法的建立: 目的：本文采用SELEX技术，以单核细胞增生李斯特菌为靶目标，筛选得到一组拥有高亲和力和高特异性的寡核苷酸适配子，并初步建立单核细胞增生李斯特菌的荧光快速检测方法。　　方法：　　1.以单核细胞增生李斯特菌为靶目标，人工合...; 连英琪; 关键词：SELEX技术李斯特菌; 文献传递

奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定与DGGE追溯被引量：10: 2013年; 通过对隐性乳房炎病原菌的分离鉴定和药敏试验,以及对治疗前的奶样进行DGGE追溯性分析,研究乳房炎奶样中微生物区系结构对乳房炎的治疗和复发的影响。结果显示,引起奶牛隐性乳房炎的主要病原菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、表皮葡萄球菌以及克雷伯菌。通过对大肠杆菌性乳房炎奶样进行DGGE追溯性分析,发现乳房炎奶样中除大肠杆菌外,还有假单胞菌、芽孢杆菌、链球菌、沙雷氏菌等其他的致病菌,并且奶样中微生物区系结构与奶牛乳房炎的治愈时间和乳房炎复发有着紧密的联系,区系结构越复杂,治愈的时间越长,越容易复发,引起后期乳房炎复发的病原菌包含在治疗前的奶样中。; 高潮刘国庆连英琪朱明余晓峰张克春; 关键词：牛奶乳房炎 DGGE

传统分离培养结合PCR-DGGE技术分析广式腊肠中优势菌被引量：21: 2013年; 采用传统培养方法结合聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)指纹技术对广式腊肠中微生物种群结构进行研究,分析广式腊肠发酵过程的优势微生物群落。结果表明:在传统分离培养中共得到葡萄球菌19株,乳酸菌12株,通过生理生化鉴定得到4株葡萄球菌(P1～P4)和2株乳酸菌(L1、L2)。DGGE指纹图谱显示广式腊肠混合菌群中有3条条带无对应的纯菌株而纯菌株中有1株在混合菌群的图谱上没有相应的条带。进一步的序列分析和相似性比较得出,P1、P4为木糖葡萄球菌,P2、P3、L1、L2分别为孔氏葡萄球菌、阿尔莱特葡萄球菌、格氏乳球菌、乳杆菌属。确定广式腊肠细菌菌群方面的主要优势菌为腐生葡萄球菌、乳杆菌属、木糖葡萄球菌。传统分离法与PCR-DGGE技术结合能够更有效、更全面地分析广式腊肠中微生物群落结构及优势菌。; 谢科余晓峰郑海松宗凯连英琪刘国庆; 关键词：广式腊肠优势菌

猪肉中AMP脱氨酶的分离纯化及其特性研究被引量：2: 2013年; 从生鲜猪肉中分离提纯AMP脱氨酶（AMPD）,并对其性质进行了研究。将猪肉AMP脱氨酶的初提物经磷酸纤维素层析、Q-Sepharose Fast Flow层析及5’-AMP琼脂糖层析等纯化步骤,得到经聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一蛋白质区带的酶液。提纯倍数为133.68,酶液比活力2.5U/mg。利用凝胶过滤法测定酶的相对分子量为178ku,SDS-PAGE测定酶的亚基相对分子量为87ku。酶的等电点为6.81。酶催化AMP脱氨反应的最适pH为5.9,pH在5.2~6.4的范围内稳定。最适温度为37℃,高于42℃时不稳定。不同来源的AMP脱氨酶其激活剂及抑制剂基本一致。; 朱明刘国庆连英琪高潮杨俊周伟伟; 关键词：鲜猪肉分离纯化

急性热应激对肉鸡肉品质及热休克蛋白108mRNA表达的影响被引量：5: 2011年; 研究不同强度热应激对肉鸡感官性状、血液生化指标和热休克蛋白(Hsp)108mRNA表达的影响,将80只30日龄的AA肉鸡随机分为4组,每组20只,对照组环境温度为(25±1)℃,其他3组受试鸡的环境温度迅速上升至(33±1)℃、(37±1)℃、(41±1)℃,并分别持续4h的热应激处理。宰杀后测定鸡胸肉的pH值、滴水损失、肉色和剪切力,利用临床血液病理学和荧光定量PCR的方法,检测宰前不同强度热应激对肉鸡血液生化指标及肌肉、心脏和肝脏中hsp108mRNA表达水平的影响。结果显示,宰前热应激明显降低宰后肉鸡胸肉的pH30min、pH24h和a*值,明显提高宰后肉鸡滴水损失、L*值和剪切力;随热应激温度升高,血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)活性逐渐升高,碱性磷酸酶(AKP)活性逐渐降低;hsp108mRNA表达水平大部分呈现下降的趋势,除了心脏33℃组表达量明显增高,其他应激组表达量均有所降低。建立的荧光定量PCR体系特异性好,灵敏度高,符合检测热休克蛋白mRNA转录水平的要求,表明热休克蛋白可作为热应激的一个敏感指标。; 杨小娇郑海松余晓峰严伟明连英琪刘国庆; 关键词：热应激肉鸡感官性状血液生化指标

上海地区奶牛隐性乳房炎真菌感染情况及其群落结构分析: 2014年; 通过传统分离鉴定技术调查上海地区某奶牛场隐性乳房炎奶样真菌感染情况，并利用DGGE技术对真菌群落结构进行分析，研究真菌在隐性乳房炎奶样中的分布情况。结果表明，隐性乳房炎奶样病原菌阳性率为90.80％，其中，混合感染率为22.78％，霉菌感染率8.05％，酵母菌感染率2.30％。对真菌感染奶样中真菌群落结构的分析显示，病原真菌包括曲霉属、酵母菌以及青霉属3大类，每份奶样含有2-8种真菌不等，烟曲霉、黑曲霉和斜卧青霉普遍存在。; 高潮连英琪刘国庆; 关键词：奶牛隐性乳房炎真菌感染群落结构 DGGE技术感染率

上海地区奶牛隐性乳房炎真菌感染情况及其群落结构分析: 2013年; 通过传统分离鉴定技术调查上海地区某奶牛场隐性乳房炎奶样真菌感染情况,并利用DGGE技术对真菌群落结构进行分析,研究真菌在隐性乳房炎奶样中的分布情况。结果表明,隐性乳房炎奶样病原菌阳性率为90.80%,其中混合感染率为22.78%,霉菌感染率8.05%,酵母菌感染率2.30%。对真菌感染奶样中真菌群落结构的分析显示,病原真菌包括曲霉属、酵母菌以及青霉属3大类,每份奶样含有2～8种真菌不等,烟曲霉、黑曲霉和斜卧青霉普遍存在。; 高潮连英琪刘国庆张峥臻张克春; 关键词：DGGE 真菌乳房炎奶牛

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连英琪