胡利霞
- 作品数：5 被引量：16H指数：1
- 供职机构：新乡市中心医院更多>>
- 发文基金：广西科技厅资助项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰腺干细胞体外培养扩增的方法被引量：1
- 2011年
- 背景:胰腺干细胞在体外培养时极易分化,很难获得足够数量的胰腺干细胞。目的:探讨一种简便易行的胰腺干细胞体外扩增培养方法。方法:分离新生昆明小鼠胰腺,原代培养三四天,成纤维细胞中出现呈集落生长的胰腺干细胞后,以0.02%EDTA消减成纤维细胞的数量,降低其比例后继续培养,待细胞铺满培养瓶底的80%时,重复三四次,逐渐提高胰腺干细胞的数量。检测胰腺干细胞特异性标志Nestin。尼克酰胺诱导胰腺干细胞分化;双硫腙染色对胰岛样细胞团进行检测。结果与结论:消减胰腺成纤维细胞的数量及比例后,胰腺干细胞可持续表现出活跃的分裂增殖能力,胰腺干细胞的数量显著增加;细胞保持球形、单个大核、细胞质折光性强、表达(Nestin)。扩增的胰腺干细胞,以尼克酰胺诱导后分化为胰岛样细胞团,双硫腙染色阳性。提示,减少共培养中成纤维细胞的比例和数量,有利于胰腺干细胞的增殖,获得较多数量的胰腺干细胞。扩增后的胰腺干细胞仍保持未分化状态,在适当的体外诱导条件下能分化为胰岛样结构,具有一定的分化潜能。
- 寇亚丽胡利霞李琴赵文婧陈维平
- 关键词：胰腺干细胞扩增NESTIN胰岛样细胞团体外诱导
- 胰腺干细胞的分子标志物的研究现状与展望
- 2010年
- 胰腺干细胞分子标志对基础和临床研究均有重要意义。通过识别胰腺干细胞表面特异的分子标志,可以从众多其他细胞中鉴定、分离及纯化出胰腺干细胞。对胰腺干细胞分子标志物的掌握是胰腺干细胞治疗研究的基础和重点,但目前缺乏唯一的干细胞标志物和可信的评价指标。此文将介绍目前已知的胰腺干细胞分子标志物及其现状。
- 胡利霞寇亚丽李琴陈维平
- 关键词：胰腺干细胞分子标志物
- 新生昆明小鼠胰腺巢蛋白阳性细胞的自然分化被引量：1
- 2009年
- 背景:胰腺干细胞在常规培养条件下易于分化,难以获得足够数量的种子细胞。目的:探讨体外培养条件下小鼠胰腺内、外分泌部的巢蛋白阳性细胞的分化情况。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-08/2007-08在广西医科大学基础医学院中心实验室完成。材料:SPF级新生昆明系小鼠25只,由广西医科大学实验动物中心提供。方法:以Ⅳ型胶原酶消化小鼠胰腺组织,采用Percoll不连续密度梯度法分离单个细胞混悬液,分别从第1界面(磷酸盐缓冲液/1.068g/L Percoll液)、第2界面(1.068g/L Percoll液/1.096g/L Percoll液)、第3界面(1.096g/L Percoll液/1.118g/L Percoll液)收集细胞,添加角质细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的低糖DMEM培养基进行体外连续培养。主要观察指标:双硫腙染色判断各界面细胞的来源,免疫组织化学检测各界面细胞巢蛋白、胰十二指肠同源盒基因蛋白1、角蛋白19的表达。结果:从第1,2界面收集到的细胞80%～90%双硫腙染色后胞质呈铁红色,表明主要来源于胰腺的内分泌部;从第3界面收集到的细胞双硫腙染色后胞质不染色,表明来源于胰腺的外分泌部。从胰腺的内、外分泌部均可分离出大、圆、单个核的细胞,巢蛋白染色呈阳性表达。随着体外培养时间的延长,来源于胰腺内分泌部的巢蛋白阳性细胞形态保持不变,呈集落样生长,表达胰十二指肠同源盒基因蛋白1,有向胰腺内分泌部β-细胞分化的趋势;来源于胰腺外分泌部的巢蛋白阳性细胞呈铺路石样形态,表达细胞角蛋白19,出现向导管上皮细胞分化的趋势。结论:新生昆明小鼠胰腺的内分泌部和外分泌部均存在巢蛋白阳性的细胞,前者具有分化为β-细胞的能力,后者具有分化为导管上皮细胞的能力。
- 叶健何少健刘琼东陈维平莫似恩袁路胡利霞
- 关键词：胰腺巢蛋白分化
- 心肌组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化被引量：14
- 2011年
- 背景:干细胞具有"环境依赖性分化"特性,以心肌组织裂解液模拟心肌微环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞方向分化的研究甚少。目的:观察心肌组织裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞方向分化的影响。方法:选用生长良好的第2代骨髓间充质干细胞,加入诱导液连续培养5周,连续观察细胞形态学特征的变化规律,采用α-Actin进行免疫细胞化学染色观察干细胞是否向肌细胞方向分化,收集诱导后的细胞行苏木精-伊红染色观察是否存在闰盘,并通过电镜观察其超微结构。结果与结论:加入诱导液后大部分细胞呈"竹节样",α-Actin免疫细胞化学染色阳性,表明间充质干细胞向肌细胞方向分化;苏木精-伊红染色可见闰盘,透射电镜下见排列整齐明暗相间的肌丝,扫描电镜下可见胞浆内有纤维状结构,说明"竹节样"细胞具有心肌细胞的典型形态结构特点。连续诱导12d多个区域出现成片的、具有自律性搏动的多核肌管结构。心肌组织裂解液可模拟心肌细胞的微环境,诱导骨髓间充质干细胞分化为具有典型形态结构特征和相应功能活动的心肌样细胞。
- 李琴赵文婧寇亚丽胡利霞陈维平
- 关键词：心肌骨髓间充质干细胞心肌样细胞
- 胰腺干细胞的原位传代扩增培养方法及体内移植的初步探讨
- 目的：优化并稳定胰腺干细胞体外培养条件;比较不同成纤维细胞饲养层对胰腺干细胞扩增培养的效果，探索建立一种能够获得数量较多、富集度较高的胰腺干细胞的体外扩增培养方法;进行昆明小鼠体内移植实验，检测胰腺干细胞体内存活情况。 ...
- 胡利霞
- 关键词：胰腺干细胞体外培养
- 文献传递
