杨淑英
- 作品数：15 被引量：95H指数：4
- 供职机构：郑州大学基础医学院消化疾病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂质体阿霉素的制备及包封率测定方法的研究被引量：30
- 1999年
- 目的：建立一种检测脂质体中阿霉素含量的方法。方法：对阿霉素溶液进行紫外可见光扫描，探求最佳波长。阿霉素脂质体溶液进行柱分离，找出脂质体和游离药物分离的最佳体积。结果：可以看出在２３２ｎｍ处阿霉素有最大吸收；脂质体和游离药物的最佳分离体积为２０ｍｌ。用紫外ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０法测定阿霉素脂质体的包封率为１０．３％±１．２％（ｎ＝４），包封率测定回收实验表明，此法重复性好。结论：紫外ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０法测定阿霉素脂质体的包封率准确性高、重现性好、简便易行。
- 常桂民段芳龄杨淑英盛剑秋
- 关键词：阿霉素脂质体包封率
- HLA-B7可诱导启动子调控TNF-α和IFN-β基因协同增强抗肿瘤效应被引量：2
- 2003年
- 目的 将TNF α和IFN β基因导入人肝癌细胞株Liu6和SMMC 772 1,以增强其免疫原性。方法 以腺病毒为载体 ,以IRES连接TNF和IFN基因 ,选择HLA B7可诱导启动子调控其表达。分别用Southern Northernblot和MTT法检测TNF α和IFN β基因的整合、转录与表达。流式细胞仪检测MHCⅠ类分子表达。CTL细胞毒性实验检测T细胞对转染细胞的杀伤作用。细胞增殖实验检测目的基因的表达对肿瘤细胞的抑制作用。结果 TNF α和IFN β基因可整合入转染细胞 ,并被有效转录。转染细胞MHCⅠ类分子的表达比对照组高 3～ 4倍。TNF活性 :Liu6细胞为 3 .778ng ml,SMMC 772 1为2 .0 17pg ml;2 4hIFN最高活性分别为 397.8U 10 6 个细胞和 345 .8U 10 6 个细胞。对照组与实验组在效靶比分别为 5∶1,10∶1,15∶1时 ,CTL细胞毒性实验结果差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ,表明T细胞杀伤作用明显增强。细胞增殖实验结果显示实验组与对照组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。目的基因的表达对肿瘤细胞具有一定的抑制作用 ,抑制率分别为 5 .5 %(Liu6 ) ,3.7%(SMMC 772 1)。结论 人TNF α和IFN β基因导入人肝癌细胞株Liu6和SMMC 772 1可明显增加其对TNF、IFN和MHCⅠ类分子的表达 ,增强机体对转染瘤细胞的杀伤作用。
- 杨淑英段芳龄潘卫曹广文高天慧陈秋丽郭兴中李玉光戚中田
- 关键词：启动子TNF-ΑIFN-Β基因治疗
- 应用阳离子脂质体及裸HSV-TK基因瘤体内直接注射比较研究
- 2002年
- 目的 比较研究阳离子脂质体及裸HSV TK基因瘤体内直接注射治疗肝癌的效果 ,探讨较好的基因转移方法。方法 用阳离子脂质体Lipofectin tk基因复合物及裸pLXT于小鼠瘤体内直接注射 ,观察肿瘤的生长情况。结果 瘤体内基因转染后脂质体介导的pLXT、ACV治疗组及裸pLXT注射、ACV治疗组平均瘤体积均显著小于其它六组对照组 (P <0 0 0 1,P <0 0 5 ) ,前两者比较亦有显著差异 (P <0 0 2 )。结论 阳离子脂质体介导的HSV tk基因转移的方法简便、安全、有效。裸tk基因瘤体内直接注射效果亦很明显。
- 杨淑英段芳龄盛剑秋赵治国鲁凤民
- 关键词：自杀基因基因治疗
- 人类HLA-B7可诱导启动子调控IRES连接的人TNFα和IFNβ基因的重组逆转录病毒载体的构建被引量：1
- 1998年
- 目的:为增强肿瘤细胞表面MHCⅠ类分子表达,并调动免疫系统更有效地抑制和杀伤肿瘤细胞,构建在HLA-B7启动子调控下,IRES连接的人TNFα和IFNβ基因的重组逆转录病毒载体.方法与结果:将TNFαcDNA克隆人pBIuescript sk(+)中,改换酶切位点后定向克隆人含HLA-B7启动子的质粒中,构建成pGL3B7TNF.IFNβcDNA经定向插入pGEM-7Zf(+)改换酶切位点切下,定向克隆人含内部核糖体进入位点(IRES)的质粒中,构建成pIRE-SIFN.B7pro-TNFα和IRES-IFN β基因片段分别于各自载体酶切取出,再次插入中间载体,改换酶切位点后,先后定向插入pBlucscript sk(+)中,构建成pBLB7TNIRIF.用SacI+SalI+PvuI酶切回收B7pro-TNFα-IRES-IFNβDNA片段,补平后平端连入GINa逆转录病毒载体的BamH I补平位点,构建成重组逆转录病毒载体GINNaB7TNIRIF(+),结论:该载体的构建为调控各种肿瘤细胞MHCⅠ类分子增强表达,杀伤和抑制肿瘤研究奠定了基础.
- 杨淑英段芳龄曹广文张晓琴陈秋莉贺祥
- 关键词：逆转录病毒基因疗法
- TNF,IFN,MHCⅠ类分子基因“正反馈”式放大表达的重组腺病毒载体被引量：1
- 1999年
- 目的：为使外源性 Ｔ Ｎ Ｆ， Ｉ Ｆ Ｎ 基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类（ Ｍ Ｈ ＣⅠ）分子基因表达呈现“正反馈”式放大效 应，构建在 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子调控、 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ连接下协同表达 Ｔ Ｎ Ｆα和 Ｉ Ｆ Ｎβ基因的重组腺病毒载体。方法和结果：从ｐ Ｇ Ｌ３ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｆ及ｐ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ中切下 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ和 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段，先后插入ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ｓｋ （＋ ）， 构建成ｐ Ｂ Ｌ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ。回收 Ｔ Ｎ Ｆα Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段，连入 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｌｉｎｋ１ 中，构建成 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（＋ ）。回收 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段，连入缺失 Ｅ１ 和 Ｅ３ 区及启动子的 Ａｄ ＢｇｌⅡ中， 构建成 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（－ ）。结论：此两种载体为“正反馈”式放大肿瘤免疫原性提供一条新途径。
- 杨淑英曹广文段芳龄陈秋莉杜平
- 关键词：腺病毒载体TNFIFN
- 甲胎蛋白转录调控序列研究进展
- 1997年
- 甲胎蛋白转录调控序列位于甲胎蛋白５’端侧翼区，由启动子，增强子、沉寂子、糖皮质激素反应元件等组成。这些元件通过与反式作用因子作用特异性调控ＡＦＰ基因表达。利用这些特异性序列与外源基因连接，可调控外源基因在肝癌细胞特异表达。
- 杨淑英段芳龄鲁凤民
- 关键词：甲胎蛋白基因调控肝肿瘤
- 阳离子脂质体介导的HSV-tk自杀基因疗法的体内外抗肝癌作用被引量：4
- 1998年
- 为研究阳离子脂质体介导HSV-tk自杀基因系统的体内外抗肝癌作用,本课题用基因重组技术构建了含HSV-tk基因的重组逆转录病毒载体,命名为pLXT。用Lipofectin介导转染人肝癌细胞系SMMC-7721,经G418筛选抗性克隆及流式细胞仪分析,获得了持续表达HSV-tk的克隆细胞SM/tk。~3H-TdR掺入法测定表明HSV-tk/ACV系统对SM/tk细胞具有强杀伤力。将Lipofectin-pLXT复合物直接注射于鼠肝癌细胞(H22)实体瘤内,ACV治疗后监测抑瘤率,发现脂质体介导pLXT、ACV治疗组及裸pLXT注射、ACV治疗组平均瘤体积均显著小于其它六组对照组(P<0.001,P<0.05),前两者比较亦有显著差异(P<0.02)。空载体转染组和阴性对照组平均瘤体积及平均瘤重均无显著差异(P>0.05)。这些结果表明阳离子脂质体介导重组逆转录病毒载体基因转染的方法简便、安全、有效,且可使目的基因获得持续表达;在体内HSV-tk/ACV系统具有强的细胞毒作用,提示存在着强的旁观者效应。此外,瘤体内直接注射裸HSV-tk基因的治疗也有效。
- 杨淑英段芳龄鲁凤民盛剑秋
- 关键词：脂质体
- 香菇多糖的免疫调节作用研究进展被引量：32
- 1998年
- 香菇多糖的免疫调节作用研究进展盛剑秋△杨淑英综述段芳龄审校河南医科大学消化病研究所郑州４５０００３香菇多糖是从香菇的子实体中分离出来的多糖，分离纯化成６个多糖部分，其中活性最强的部分命名为香菇多糖。纯化的香菇多糖的分子量约４～８×１０５，一级结构的β...
- 盛剑秋杨淑英段芳龄
- 关键词：香菇多糖免疫调节作用药物药理
- 半乳糖脂修饰的阿霉素脂质体体外杀伤肝癌细胞的实验研究被引量：9
- 1999年
- 目的：合成ｎ十六烷酰１硫代βＤ半乳糖苷（ＣｅｔｙｌＧａｌ），并用其修饰阿霉素脂质体表面，观察体外对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ７７２１的杀伤作用。方法：半乳糖经化学反应制备ＣｅｔｙｌＧａｌ，用１０％摩尔的糖脂整合到超声法制备的小单层阿霉素脂质体脂膜上进行体外杀瘤研究，ＭＴＴ法检测杀瘤活性。结果：４８小时细胞毒试验糖脂阿霉素脂质体对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ７７２１的杀伤作用优于无糖脂阿霉素脂质体（Ｐ＜００５），而对非靶细胞（Ｂ１６黑色素瘤细胞）的杀伤作用糖脂和无糖脂阿霉素脂质体两者相近。０５ｈ预处理实验表明：缩短药物与细胞接触时间后，糖脂阿霉素脂质体仍保持较强的杀伤肝癌细胞作用。结论：半乳糖阿霉素脂质体对人肝癌细胞杀伤作用较无糖脂组及非靶细胞组为强。
- 常桂民段芳龄张向东杨淑英杨淑英
- 关键词：脂质体阿霉素
- 乳糖脂修饰的阿霉素脂质体体外杀伤肝癌细胞的实验研究被引量：1
- 1999年
- 在ＮａＢＨ４还原作用下制备乳糖酰磷脂酸乙醇胺（Ｌａｃ－ＰＥ），反应４００ｈ测定仍联率为４８．６％，硅酸柱纯化得纯品。用该脂质修饰阿霉素脂质体表面，观察体外对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１的杀伤作用。方法乳糖和磷脂酰乙醇胺经化学反应制备Ｌａｃ－ＰＥ，用１０％摩尔的糖脂整合到超声法制备的小单层阿霉素脂质体脂膜上进行体外杀瘤研究，ＮＴＴ法检测杀瘤活性。结果４８小时细胞毒试验糖脂阿霉素脂质体对人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１的杀伤作用优于无糖脂阿霉素脂质体（Ｐ＜０．０１），而对非靶细胞（Ｂ１６黑色素瘤细胞）的杀伤作用优于无糖脂阿霉素脂质体两者相近。０．５ｈ预处理实验表明：缩短药物与细胞接触时间后，糖脂阿霉素脂质体仍保持较强的杀伤肝癌细胞作用。结论乳糖脂阿霉素脂质体的杀伤作用来自乳糖中的半乳糖基配体的特异性介导和人肝癌细胞上肝半乳糖受体的识别内吞作用。
- 常桂民段芳龄杨淑英盛剑秋
- 关键词：脂质体肝癌阿霉素
