李永光
- 作品数：8 被引量：18H指数：4
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项政府间科技合作项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2011年
- 从自然感染的羊脑内采集脑多头蚴原头节,提取总RNA。根据亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列设计特异引物,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因。PCR产物连接到pMD18-T载体构建重组质粒pMD-TmTPx,转化大肠埃希菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切及测序鉴定后进行序列分析。扩增获得大小为614bp的TmTPx基因cDNA,该基因的完整开放阅读框架(ORF,591bp)编码196个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为Mr 21690,等电点为7.61。生物信息学分析结果表明TmTPx具有一个典型的2-Cys Prx保守功能结构域。绦虫已知TPx的分子进化分析发现,多头带绦虫与亚洲牛带绦虫的亲缘关系最近,与猪带绦虫和肥头绦虫的亲缘关系次之,与细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的亲缘关系最远。
- 李永光李文卉盖文燕姚菊霞曲自刚贾万忠Radu Blaga付宝权
- 关键词：脑多头蚴克隆
- 细粒棘球绦虫TPx基因的克隆及序列分析被引量：7
- 2008年
- 从自然感染病羊肝内收集细粒棘球绦虫(Eg)原头蚴,分别提取总RNA和基因组DNA。根据GenBank数据库中的细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因序列设计1对引物,以总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出EgTPx基因片段,同时以基因组DNA为模板扩增出对应的基因组序列。PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析。结果表明,成功扩增到中国青海株细粒棘球绦虫EgTPx基因片段,其开放阅读框为582 bp,编码193个氨基酸,与已知的EgTPx基因核苷酸序列及其编码蛋白氨基酸序列的同源性均为99%,有3个碱基发生变异,分别在245,306,318位由C变为T;引起1个氨基酸变异,由Ala82变为Val82。EgTPx具有典型的2-Cys型过氧化物氧还蛋白催化性位点Cys48和Cys169,以及周围保守的FVCP和VCPA序列。EgTPx基因的开放阅读框对应的基因组序列包含2个外显子和1个69 bp的内含子。
- 李航李文卉苟惠天李永光王艳华张德林贾万忠史大中付宝权
- 关键词：细粒棘球绦虫基因克隆
- 多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及抗原性研究
- 脑多头蚴病（Cerebral coenurosis）俗称脑包虫病，是由多头带绦虫（Taenia multiceps，Tm）的幼虫-脑多头蚴（Coenurus cerebralis）寄生于宿主中枢神经组织内引起的一种严重致...
- 李永光
- 关键词：人兽共患寄生虫病脑多头蚴病硫氧还蛋白过氧化物酶基因抗原性
- 文献传递
- 细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的表达及抗原性分析被引量：5
- 2008年
- 目的在原核系统表达并初步鉴定细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因重组蛋白的抗原性。方法对已构建的重组质粒pMD-18T-EgTPx进行限制性酶切,获取目的基因片段后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-EgTPx,转化大肠杆菌DH5α。筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,对表达产物纯化后用Western-blot方法和ELISA鉴定重组EgTPx蛋白的抗原性。结果构建的重组表达质粒pET30a-EgTPx阳性克隆经PCR与双酶切鉴定,与预期结果一致,测序鉴定无基因突变,开放阅读框正确;含有pET30a-EgTPx重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE显示表达产物分子量约为27 kDa,而且主要以包涵体形式存在;Western-blot和ELISA结果表明EgTPx重组抗原可以被棘球蚴感染羊阳性血清特异性识别。结论成功构建了pET30a-EgTPx表达质粒,EgTPx重组蛋白得到了高效表达,表达产物具有良好的抗原性。
- 李航李文卉李永光苟惠天王艳华张德林贾万忠史大中付宝权
- 关键词：细粒棘球绦虫基因表达抗原性
- 多头带绦虫TPx基因片段的克隆及原核表达被引量：4
- 2009年
- 从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个氨基酸。对TmTPx基因片段进行限制性酶切后连接到表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,以IPTG进行诱导表达,用SDS-PAGE分析表达产物。结果显示,成功表达了大小约为43 ku的融合蛋白。对表达产物纯化后免疫家兔,采集血清用ELISA测定抗体效价,发现兔抗TmTPx重组蛋白的抗体能够与多头蚴原头节抗原发生特异性反应,说明该重组蛋白具有较好的免疫原性。
- 李永光李文卉李航盖文燕王鸿盛姚菊霞王艳华张德林贾万忠Radu Blaga付宝权
- 关键词：多头蚴重组蛋白免疫原性
- 多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及抗原性研究
- 根据猪带绦虫TPx基因序列设计引物,从甘肃景泰羊源多头蚴克隆到TmTPx基因片段,序列分析表明与GenBank中亚洲牛带绦虫的TaHc2-D11 mRNA序列(EF420372)的一致性为99%,与猪带绦虫Prx mRN...
- 李永光李文卉盖文燕王鸿盛姚菊霞曲自刚王艳华张德林贾万忠RaduBlaga付宝权
- 关键词：脑多头蚴重组蛋白免疫原性
- 文献传递
- 寄生性蠕虫过氧化物氧还蛋白研究进展被引量：4
- 2010年
- 过氧化物氧还蛋白为广泛存在于需氧生物体的过氧化物酶家族抗氧化蛋白。寄生性蠕虫过氧化物氧还蛋白不仅可以清除虫体自身代谢产生的活性氧族分子(reactive oxygen species,ROS)和活性氮族分子(reactive nitrogen species,RNS),而且在抗御宿主免疫细胞产生的ROS和RNS的潜在损伤中起着至关重要的作用。本文综述了过氧化物氧还蛋白的分类、作用机制以及寄生性蠕虫(包括吸虫、绦虫和线虫)过氧化物氧还蛋白的研究进展。
- 李永光付宝权
- 关键词：活性氧族
- 多头带绦虫甘肃分离株分子分类鉴定研究
- 多头带绦虫(Taenia multiceps)的成虫寄生于犬、狼、狐狸等犬科动物的小肠,其中绦期幼虫多头蚴通常寄生于绵羊、牛等中间宿主的大脑、脊髓等中枢神经系统,可以引起严重致死性的人兽共患多头蚴病。该病在非洲、美洲、欧...
- 李文卉李永光盖文燕王鸿盛姚菊霞王艳华张德林罗建勋R.Blaga付宝权
- 文献传递
