张雪雁
- 作品数：16 被引量：20H指数：2
- 供职机构：广州医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EB病毒LMP1 CCT蛋白特异性结合短肽的筛选
- 2006年
- 目的筛选能与EBVLMP1CCT蛋白高效结合的短肽。方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CCT蛋白筛选噬菌体12肽库。通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力。通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定。并对阳性克隆进行测序分析。结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果。ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合。硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA。结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础。
- 余琳张雪雁杨英马桂璋
- 关键词：LMP1
- p38γMAPK蛋白在直肠癌组织中的表达及临床意义
- 目的:探讨人直肠癌中p38γMAPK蛋白的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测54例直肠癌组织、近癌旁组织、癌周正常组织和15例腺瘤息肉组织中p38γ蛋白表达情况。结果:p38γ蛋白的表达主要定位于胞质中,仅少...
- 张雪雁曾山崎曹杰杜洪肖焕擎朱郇悯麦璟莹
- 关键词：直肠癌免疫组织化学
- 文献传递
- 弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的:克隆并表达弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段,为下一步表达蛋白纯化奠定基础。 方法:将弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区片段克隆入高效融合表达载体pET32α,转化大肠杆菌BL21(DE3), 37℃、IPTG诱导表达,SDS PAGE分析表达产物。结果:成功构建重组质粒pET32α SAG1,经诱导后表达出含 外源基因的融合蛋白,SDS PAGE分析表达产物分子质量约44kDa。结论:弓形虫SAG1成熟蛋白编码区在原 核表达系统pET32α/BL21(DE3)中获得成功表达,为下一步表达蛋白纯化提供试验依据。
- 马长玲胡旭初张雪雁沈浩贤李小敏陈新宇陈代雄
- 关键词：弓形虫SAG1基因大肠杆菌
- EB病毒LMP1-CTAR2结构域的原核表达及蛋白质纯化被引量：1
- 2010年
- 目的:构建LMP1-CTAR2原核表达载体,纯化LMP1羧基端活化区2(CTAR2)蛋白。方法:通过RT-PCR技术从B95-8细胞中扩增EBVLMP1 CTAR2 cDNA,克隆至PGEM-T载体后测序。运用亚克隆技术构建PGEX-6P-3-CTAR2重组表达载体。用SDS-PAGE与western blot对表达产物进行鉴定,利用Sepharose 4B亲和层析柱对表达产物进行分离和纯化。结果:PCR扩增出225 bp的基因片段,测序结果与已知的LMP1 CTAR2序列吻合。成功构建PGEX-6P-3-CTAR2原核表达载体,western blot分析表明表达产物能与抗LMP1单克隆抗体特异结合。成功分离出Mr约37000的PGEX-6P-3-CTAR2融合蛋白,纯化出Mr约15000的LMP1 CTAR2蛋白。结论:成功获得EBV LMP1 CTAR2蛋白,可用于噬菌体筛库和CTAR2致瘤机制研究。
- 余琳张雪雁李孜
- 关键词：EPSTEIN-BARR病毒原核表达蛋白质纯化
- EB病毒LMP1与细胞信号转导被引量：1
- 2003年
- EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是Epstein和Barr于1964年最先从非洲恶性淋巴瘤组织培养中发现的一种病毒,在分类学上将EBV归入疱疹病毒γ亚科嗜淋巴细胞病毒属的DNA病毒.
- 张雪雁马桂璋
- 关键词：EBV信号转导
- EB病毒潜伏膜蛋白1羧基端活化区域2蛋白特异性结合短肽的筛选
- 2011年
- 目的 利用噬菌体12肽库筛选能与EB病毒潜伏膜蛋白1（LMPl）羧基端活化区域（CTAR）2蛋白特异性结合的短肽.方法 用纯化的CTAR2蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CTAR2蛋白的亲和力.利用硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定,并对阳性克隆进行测序及序列分析.结果 CTAR2蛋白对噬菌体12肽库进行3轮筛选,第3轮的产率是第1轮的143倍[（3.0×10^-6）/（2.1×10^-8）],噬菌体克隆得到较好的富集.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CTAR2蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100％.测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列：GLKHHSPGLLLY.结论 筛选出与CTAR2蛋白特异性结合的短肽序列GLKHHSPGLLLY,为研究LMP1致瘤机制和开发拮抗LMP1蛋白的小分子短肽类药物提供实验依据.
- 张雪雁杨英余琳
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1噬菌体随机肽库
- 结肠癌患者CX_3CL_1的表达情况与术后预后的相关性分析被引量：1
- 2010年
- 目的探讨结肠癌组织中CX3CL1的表达情况、临床意义及其与术后预后分析的相关性。方法应用免疫组织化学法检测104例结肠癌病人的石蜡切片中CX3CL1的表达情况,用χ2检验来分析CX3CL1的临床意义,用Kaplan-Meier方法及建立Cox回归模型来分析CX3CL1表达情况与结肠癌术后预后的相关性。结果 CX3CL1高表达组占所有结肠癌病人的61.54%。CX3CL1的表达与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、Dukes分期、组织分化程度无明显相关(P>0.05),但与淋巴结转移相关(P<0.05)。CX3CL1高表达组(n=64)比低表达组(n=40)有更长的生存期(P=0.0096)。Cox回归模型分析表明,CX3CL1表达可作为判断结肠癌患者术后生存和预后的独立指标(RR=2.4;P=0.0135)。结论 CX3CL1可作为结肠癌的独立预后因素,结肠癌中CX3CL1高表达提示更好的预后。
- 曾山崎曹杰张雪雁曾军陈金培张伟健刘宏杰
- 关键词：CX3CL1结肠癌预后因素
- EB病毒LMP1蛋白CTAR23结构域的原核表达及纯化被引量：1
- 2004年
- 目的获得纯化的LMP1CTAR23结构域蛋白。方法用RT-PCR方法从B95-8细胞中扩增EBVLMP1CTAR23结构域的cDNA,将其克隆至PGEM-Teasy载体后进行测序鉴定。亚克隆至原核表达载体PGEX-6P-3,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导重组菌株表达。用SDS-PAGE与Westernblot对表达产物进行鉴定,用Sepharose4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,PreScissionProteas酶对融合蛋白进行解离。结果扩增的LMP1CTAR23长度为357bp,测序结果与已知序列吻合。获得PGEX-6P-3-CTAR23原核表达菌株,Westernblot表明重组蛋白能被LMP1单克隆抗体特异结合。获得约42000u的PGEX-6P-3-CTAR23融合蛋白,分离纯化出约13000u的LMP1CTAR23蛋白。结论成功获得EBVLMP1CTAR23蛋白,为研究LMP1致瘤机制,研制生物抗癌药物奠定基础。
- 张雪雁杨英马桂璋
- 关键词：EB病毒LMP1原核表达
- 组织型转谷氨酰胺酶与人非小细胞肺癌细胞侵袭力的关系及其机制
- 2013年
- 目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;RT-PCR法、Real-Time PCR法及Western blot检测A549和PAα细胞株中tTG、EGFR和MMP-2的转录和表达水平,观察使用tTG或EGFR抑制剂后PAα细胞中tTG、EGFR、p-EGFR和MMP-2的表达水平变化。结果:PAα细胞株的侵袭能力为A549的165.3倍(P<0.05)。PAα细胞株的tTG、EGFR转录水平为A549细胞株的650.68(P<0.05)和34.4(P<0.001)倍。PAα细胞株的tTG、p-EGFR表达水平高于A549细胞株,MMP-2的转录水平在A549和PAα细胞株之间的差异没有统计学意义(P>0.1),但PAα的MMP-2表达水平高于A549。结论:PAα相对于A549具有高的侵袭力;其机制可能与EGFR的高表达和磷酸化、tTG和MMP-2的高表达有关;tTG可调控MMP-2的水平但它本身不受EGFR信号通路的调控。
- 朱郇悯汤娟娟黎银燕刘嘉熙韦雪梅王飞陈晓湘张雪雁李孜
- 关键词：组织型转谷氨酰胺酶侵袭力表皮生长因子受体
- EB病毒LMP1 CTAR23蛋白特异性结合短肽的筛选被引量：2
- 2010年
- 目的利用噬菌体12肽库筛选能与EB病毒(EBV)LMP1 CTAR23蛋白高效结合的短肽。方法利用亲和层析柱加酶切的方法纯化CTAR23蛋白,并用其筛选噬菌体12肽库。通过夹心ELISA法分析噬菌体克隆与CTAR23蛋白的亲和力。通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定,并对阳性克隆进行测序及序列分析。结果对12肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果。ELISA提示筛选出来的噬菌体克隆能与CTAR23蛋白高效结合。硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列HVSLHKHYPTAS。结论噬菌体短肽HVSLHKHYPTAS为研究LMP1致瘤机理、开发拮抗LMP1蛋白的小分子短肽类药物奠定坚实的基础。
- 余琳张雪雁杨英
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1噬菌体随机肽库
