杨英
- 作品数：20 被引量：39H指数：4
- 供职机构：广州医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- EB病毒LMP1 CCT蛋白特异性结合短肽的筛选
- 2006年
- 目的筛选能与EBVLMP1CCT蛋白高效结合的短肽。方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CCT蛋白筛选噬菌体12肽库。通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力。通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定。并对阳性克隆进行测序分析。结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果。ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合。硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA。结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础。
- 余琳张雪雁杨英马桂璋
- 关键词：LMP1
- 轮状病毒(HRV)感染患儿双份血清特异性IgG、IgM、IgA抗体动态观察
- 1989年
- HRV是婴幼儿急性胃肠炎的主要病原体,36～63%需住院治疗的病例与HRV有关。目前,对HRV感染的诊断主要是以电子显微镜检查,ELISA和核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)等方法检查粪便中的病毒。但此只能发现粪便中有HRV存在。
- 郑伯建韩守信严詠楷马桂璋杨英梁希若
- 关键词：轮状病毒血清诊断
- 肿瘤源性早孕因子的筛检、纯化及鉴定被引量：16
- 2002年
- 目的筛检出具有t EPF样活性的肿瘤样本 ,并对其进行分离纯化。方法用活性玫瑰花结抑制实验进行筛检 ,采用DEAE纤维素离子交换色谱、S SepharoseF .F离子交换色谱、ConA SepharoseCl 4B亲和色谱、Heparin SepharoseCl 6B亲和色谱等方法进行纯化 ,用SDS PAGE测定其相对分子量 ,以等电聚焦电泳法检测其等电点。结果膀胱癌、黑色素瘤、绒癌、恶性葡萄胎 4种肿瘤血清和恶性葡萄胎清宫人流血及黑色素瘤标本组织液具有t EPF活性。蛋白含量为 0 .49mg/ml,相对分子量为 134 2 4、2 32 19、382 73,等电点为 6 .5 3。结论 4种肿瘤血清和 2种肿瘤组织液中纯化获得的t EPF在相对分子量、等电点等生化指标上完全一致 。
- 张冬云王家骥杨英林丽白冯苏妹苏宝田
- 关键词：纯化筛检肿瘤生物标志物
- EBV-LMP1 cDNA的克隆测序与原核表达质粒构建被引量：4
- 2002年
- 目的 克隆EBV LMP1cDNA ,构建EBV LMP1基因的原核表达重组质粒。方法 通过RT PCR技术从B95 8细胞中扩增EBV LMP1cDNA ,克隆至pGEM Teasy载体上并测序 ;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET 32a,转化JM10 9菌。提取质粒 ,限制性内切酶消化 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 扩增的LMP1cDNA长度为 115 8bp ,测序结果与已知序列吻合 ,重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子。结论 成功克隆了EBV LMP1cDNA ,并构建了pET 32a LMP1原核表达载体 。
- 林勇平吴淑华杨英汤郡马桂璋
- 关键词：LMP1CDNA原核表达
- ^(103)Pd粒子联合加热41℃对人肝癌细胞7402细胞毒作用的实验研究被引量：2
- 2004年
- 目的 研究10 3 Pd粒子与加热 41℃对人肝癌细胞株 (Bel -740 2 )的细胞毒作用 ,了解10 3 Pd粒子对热疗后残存的肝癌细胞的细胞毒作用。方法 以体外培养的人肝癌细胞 -740 2为研究对象 ,采用对照分组、水浴加温法、体外细胞毒试验 (MTT)、凋亡实验 (Hoechst3 3 2 5 8荧光染色法 )的方法以及方差分析 ,观察10 3 Pd粒子放疗联合加热 41℃对Bel -740 2细胞的生长抑制作用。结果 10 3Pd粒子对 41℃加热后的人肝癌细胞 -740 2有明显的细胞抑制作用 ,强于单纯10 3 Pd粒子放疗。结论 人肝癌细胞 -740 2对10 3 Pd粒子放疗敏感 ,10 3 Pd粒子联合加热 41℃有增效作用。提示 :10 3 Pd粒子对热疗后残存的肝癌细胞有细胞毒作用。
- 叶亮陈萍刘衍民杨英梁伟坚
- 关键词：人肝癌细胞细胞毒作用放疗热疗温法
- EBV反义LMP-1转染CNE2细胞对裸鼠致瘤的作用被引量：4
- 2003年
- 目的研究反义LMP1基因转染CNE2细胞对裸鼠的成瘤作用。方法用反义LMP1转染的CNE2细胞、空载体转染的CNE2细胞以及原始CNE2细胞分别接种裸鼠,观察三种细胞的成瘤能力及细胞的恶性程度。结果反义LMP1转染的CNE2细胞比空载体转染的CNE2细胞及原始CNE2细胞在裸鼠体内成瘤能力(包括平均瘤重及总瘤重)和镜下细胞恶性程度都有所降低。结论反义LMP1能成功抑制LMP1的表达,逆转NPC细胞的恶性表型,为临床应用反义技术进行鼻咽癌基因治疗提供了实验依据。
- 马桂璋莫薇李剑蔡征涛杨英
- 关键词：EB病毒CNE2细胞
- 日本血吸虫TGF-β1成熟肽编码序列的克隆、表达及其转录水平
- 2008年
- 目的获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)成熟肽基因的DNA,进行原核克隆和表达,并比较它与Sj26kd的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)在成虫和虫卵期的转录水平。方法根据美国国立生物信息学中心(NCBI)上登录的小鼠TGF-β1基因的全长序列,设计两条位于保守区的寡核苷酸作为引物,利用RT-PCR从日本血吸虫成虫的mRNA中扩增SjTGF-β1基因的部分序列,并利用生物信息学进行分析和鉴定。克隆SjTGF-β1成熟肽基因的cDNA到原核表达载体pGEX-6p-3,将重组载体转化大肠杆菌BL21株并诱导表达。利用RT-PCR半定量分析SjTGF-β1基因与Sj26GST基因在成虫和虫卵期的转录水平。结果成功获得并构建了SjTGF-β1成熟肽基因的原核表达载体。融合表达后的重组融合蛋白经SDS-PAGE分析,显示其相对分子质量约为35000,与目的基因编码蛋白的预测分子量相符。SjTGF-β1在成虫与虫卵期的转录水平都低于Sj26GST基因,但虫卵期的转录水平比成虫高。结论SjTGF-β1成熟肽基因的获得为其编码序列全长的获得奠定了基础;重组融合蛋白的成功表达为进一步的功能研究提供保障;虫卵期该基因的转录水平高提示该基因在血吸虫虫卵与宿主的相互作用中可能具有一定的作用。
- 朱郇悯麦璟莹赵晶晶马长玲陈晓湘张雪雁杨英张惠球李孜
- 关键词：日本血吸虫
- EB病毒潜伏膜蛋白1羧基端活化区域2蛋白特异性结合短肽的筛选
- 2011年
- 目的 利用噬菌体12肽库筛选能与EB病毒潜伏膜蛋白1（LMPl）羧基端活化区域（CTAR）2蛋白特异性结合的短肽.方法 用纯化的CTAR2蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CTAR2蛋白的亲和力.利用硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定,并对阳性克隆进行测序及序列分析.结果 CTAR2蛋白对噬菌体12肽库进行3轮筛选,第3轮的产率是第1轮的143倍[（3.0×10^-6）/（2.1×10^-8）],噬菌体克隆得到较好的富集.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CTAR2蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100％.测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列：GLKHHSPGLLLY.结论 筛选出与CTAR2蛋白特异性结合的短肽序列GLKHHSPGLLLY,为研究LMP1致瘤机制和开发拮抗LMP1蛋白的小分子短肽类药物提供实验依据.
- 张雪雁杨英余琳
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1噬菌体随机肽库
- 肺癌病人外周血单个核细胞NK活性和LAK活性的研究被引量：2
- 1998年
- 梁增伟杨英张求旺梁希若
- 关键词：肺癌NK活性LAK活性白细胞介素-2干扰素
- EB病毒LMP1蛋白CTAR23结构域的原核表达及纯化被引量：1
- 2004年
- 目的获得纯化的LMP1CTAR23结构域蛋白。方法用RT-PCR方法从B95-8细胞中扩增EBVLMP1CTAR23结构域的cDNA,将其克隆至PGEM-Teasy载体后进行测序鉴定。亚克隆至原核表达载体PGEX-6P-3,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导重组菌株表达。用SDS-PAGE与Westernblot对表达产物进行鉴定,用Sepharose4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,PreScissionProteas酶对融合蛋白进行解离。结果扩增的LMP1CTAR23长度为357bp,测序结果与已知序列吻合。获得PGEX-6P-3-CTAR23原核表达菌株,Westernblot表明重组蛋白能被LMP1单克隆抗体特异结合。获得约42000u的PGEX-6P-3-CTAR23融合蛋白,分离纯化出约13000u的LMP1CTAR23蛋白。结论成功获得EBVLMP1CTAR23蛋白,为研究LMP1致瘤机制,研制生物抗癌药物奠定基础。
- 张雪雁杨英马桂璋
- 关键词：EB病毒LMP1原核表达
