尚海丽
- 作品数：7 被引量：21H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 番茄黄化曲叶病毒和黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体的制备及其检测应用
- 以抗体为核心建立的血清学方法用于植物病毒的检测具有操作方便、快捷、灵敏以及高通量等优点,但国内制备的植物病毒抗体并不多,大多数重要植物病毒的检测得依赖进口的抗体或者试剂盒。因此,制备重要植物病毒的特异性抗体、建立相应的血...
- 尚海丽
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒黄瓜绿斑驳花叶病毒抗体单克隆抗体IC-RT-PCR
- 文献传递
- 蕃茄黄化曲叶病毒和黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体的制备及其检测应用
- 以抗体为核心建立的血清学方法用于植物病毒的检测具有操作方便、快捷、灵敏以及高通量等优点,但国内制备的植物病毒抗体并不多,大多数重要植物病毒的检测得依赖进口的抗体或者试剂盒。因此,制备重要植物病毒的特异性抗体、建立相应的血...
- 尚海丽
- 关键词：黄瓜黄化曲叶病毒特异性抗体
- 文献传递
- 分泌抗番茄黄化曲叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗番茄黄化曲叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。克隆了番茄黄化曲叶病毒上海分离物（TYLCV-SH2）的外壳蛋白基因，利用原核表达系统表达了该病毒的外壳蛋白，用表达纯化的蛋白为抗原免疫BAL...
- 周雪平吴建祥刘欢谢艳尚海丽
- 抗链霉素单克隆抗体的研制
- 2010年
- 笔者采用化学方法使链霉素先与羧甲基羟胺合成链霉素-肟，然后链霉素-肟通过碳化二亚胺交联剂与BSA或OVA交联，分别合成链霉素-BSA、链霉素-OVA两种完全抗原，用合成的链霉素-BSA免疫的BALB／C鼠脾细胞与Sp2／0鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗链霉素的单克隆抗体（MAb）的杂交瘤细胞株（8A1），并制备其单克隆抗体腹水。该株单克隆抗体腹水间接ELISA效价在10^-6以上，抗体类型及亚类为IgGl，轻链为K链。单克隆抗体的链霉素50％抑制质量浓度为43．12μg／L。间接竞争酶联免疫吸附试验（CI-ELISA）显示，该单克隆抗体对链霉素和二氢链霉素有特异性反应，而对卡那霉素、庆大霉素、新霉素、青霉素、氯霉素其它抗生素没有交叉反应，表明该单克隆抗体可用于食品中链霉素残留的检测。
- 吴建祥倪跃群尚海丽
- 关键词：链霉素半抗原单克隆抗体
- 分泌抗番茄黄化曲叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗番茄黄化曲叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。克隆了番茄黄化曲叶病毒上海分离物（TYLCV-SH2）的外壳蛋白基因，利用原核表达系统表达了该病毒的外壳蛋白，用表达纯化的蛋白为抗原免疫BAL...
- 周雪平吴建祥刘欢谢艳尚海丽
- 文献传递
- 免疫斑点法和免疫捕获RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒被引量：19
- 2010年
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是葫芦科作物上重要的病毒之一.用提纯的黄瓜绿斑驳花叶病毒免疫新西兰大白兔制备CGMMV的多克隆抗体.该多克隆抗体的间接ELISA效价达1∶512 000,与CGMMV17.5 ku外壳蛋白有特异性反应,而与烟草花叶病毒、齿兰环斑病毒和健康植物没有任何反应.用ACP-ELISA分析多抗灵敏度表明多抗检测1∶40 960倍稀释的CGMMV病叶时仍呈阳性反应.用该多抗建立了检测CGMMV的免疫斑点法(dot-ELISA)和免疫捕获RT-PCR方法(IC-RT-PCR).病叶汁液可被dot-ELISA检出的最大稀释度为1∶10 240.IC-RT-PCR从感染CGMMV的病叶组织中扩增到与预期大小相同的480 bp DNA条带,且当CGMMV病叶稀释1∶163 840倍时检测仍呈阳性.检测CGMMV的dot-ELISA和IC-RT-PCR方法的建立为该病毒病的诊断和控制提供了技术支撑.
- 尚海丽周雪平吴建祥
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒多克隆抗体DOT-ELISAIC-RT-PCR
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体的制备被引量：2
- 2010年
- 用提纯的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)免疫的BALB/c鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经细胞筛选与克隆,获得4株能稳定传代并分泌抗CGMMV单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞,并分别制备其单抗腹水。4株单克隆腹水抗体间接ELISA效价在10-6～10-7之间,4株单抗的抗体类型及亚类均为IgG1,kappa链。特异性检测表明4株单抗仅与CGMMV的17.5 ku的外壳蛋白有特异性反应。利用最灵敏的11E5单抗为核心建立了检测CGMMV抗原包被间接ELISA方法(ACP-ELISA),该方法对病叶的检测灵敏度达到1∶10 240(g/mL)倍稀释,对提纯病毒的检测灵敏度达到0.01 ng。
- 尚海丽周雪平陈青吴建祥
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒单克隆抗体
