马丽娜
- 作品数：9 被引量：33H指数：3
- 供职机构：吉林大学药学院更多>>
- 发文基金：江苏省水产三项工程项目江苏省高校自然科学研究项目江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- 酶促开环聚合合成双亲性H型嵌段共聚物及其自组装被引量：1
- 2009年
- 通过固定化酶Novozyme435(NV435)催化聚乙二醇(PEG)开环聚合己内酯(CL)得到端基带有羟基的ABA型三嵌段聚合物,用2,2-二氯代乙酰氯将聚合物的端羟基功能化形成H型大分子引发剂,在CuCl/HMTETA体系中引发4-乙烯基吡啶(4VP)进行原子转移自由基聚合反应(ATRP),得到了具有两亲性的H型五嵌段聚合物(PVP)2-b-PCL-b-PEG-PCL-(PVP)2,用红外光谱(FT IR),核磁共振(1H NMR),凝胶渗透色谱(GPC)对其结构与分子量及其分子量分布进行了表征,结果表明:H型五嵌段聚合物分子量46121g/mol,分子量分布1.30.并利用动态光散射(DLS)和原子力显微镜(AFM)对聚合物在水溶液中的自组装行为进行了研究,H型嵌段聚合物的胶束呈球形结构,平均直径为70nm左右.
- 王书唯张宝艾鹏祝明王维撒中鹏马丽娜李亚鹏
- 关键词：原子转移自由基聚合酶促开环聚合
- CTGF-mRNA在实验性肝纤维化中的表达被引量：18
- 2005年
- 目的 :观察 CTGF- m RNA在实验性肝纤维化小鼠肝脏中的表达及其意义。方法 :采用 RT- PCR方法检测 5 2只实验性肝纤维化雄性昆明种小鼠肝脏中 CTGF基因表达水平。结果 :肝纤维化小鼠 CTGF基因表达水平显著高于正常小鼠 (P<0 .0 1) ,并与肝纤维化程度呈正相关 (r=0 .5 82 ,P<0 .0 1)。结论 :在实验性肝纤维化小鼠肝脏中 CTGF- m RNA的表达水平明显上调 ,提示 CTGF在肝纤维化激活及调控中具有重要作用。
- 金珍婧迟宝荣马丽娜赵文静苑坤
- 稳定表达NGF、BDNF和NT3星形胶质细胞系的建立及其鉴定被引量：4
- 2005年
- 目的 :探讨星形胶质细胞直接作为转基因靶细胞进行目的基因的表达。方法 :克隆大鼠 NGF、BDNF和 NT3基因 ,构建真核表达载体 ;3种重组载体分别转染星形胶质细胞 ,G4 18筛选后获得阳性克隆细胞进行扩大培养 ;取基因修饰星形胶质细胞培养液上清培养 PC12细胞或 Trk B- PC12细胞 ;用 Western blotting杂交或免疫组织化学方法检测基因靶细胞目的基因的表达及其水平。结果 :经 G4 18筛选后 ,转染 NGF、BDNF和 NT3基因修饰星形胶质细胞呈 G4 18抗性 ;转染 NGF和 NT3基因条件培养液上清培养的 PC12细胞 ,数量增多 ,突起明显变长 ,转染 BDNF基因条件培养液上清培养的 Trk B- PC12细胞 ,同样数量增多 ,突起明显变长。大部分 G4 18抗性的基因靶细胞出现 NGF、BDNF和 NT3免疫染色阳性。Western blotting杂交显示有相应分子量大小的蛋白条带出现。结论 :星形胶质细胞直接作为基因靶细胞能有效地表达和分泌有生物学活性的 NGF、 BDNF和 NT3。
- 马丽娜遇红梅赵文静洛涛陈森野元裕古川昭荣
- 关键词：星形细胞
- 肝细胞损伤条件培养基对大鼠骨髓间充质干细胞肝向分化的促进作用被引量：3
- 2016年
- 目的:制备肝细胞损伤条件培养基(CM),体外模拟损伤组织微环境,探讨其对大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)肝向分化的作用。方法:取1周龄乳鼠,经差时贴壁和差速梯度法结合优化梯度离心和贴壁换液时间分离培养BMMSCs。取6~8周龄大鼠,腹腔注射60%四氯化碳溶液(0.75mL·kg^(-1))制备肝细胞损伤组织匀浆上清(CM1)和肝细胞损伤血清(CM2)。将第3代(P3)BMMSCs随机分为0%CM组(对照组,采用10%FBS L-DMEM培养)、10%CM1组、20%CM2组和10%CM1+10%CM2组。倒置显微镜下观察细胞形态表现,免疫组织化学法检测各组BMMSCs表面标志物CD105和各组细胞中白蛋白(ALB)的阳性表达率,油红O染色法检测BMMSCs成脂分化的脂滴形成阳性率;RT-PCR法检测各组细胞中甲胎蛋白(AFP)和ALB的表达水平,糖原染色法检测细胞中糖原合成阳性率,鉴定并比较各组BMMSCs肝向分化能力。结果:骨髓细胞原代培养72h,贴壁细胞呈圆形或梭形,铺满瓶底时呈均匀有序的成纤维梭形状,P3BMMSCs表面标志物CD105呈阳性表达。P3BMMSCs经地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤和消炎痛(DX+IBMX+IS+ID)联合诱导后4d,镜下可见脂滴形成。P3BMMSCs经CM诱导后细胞中AFP和ALB呈阳性表达,细胞糖原染色呈阳性。诱导后7d,含CM成分的3组BMMSCs中均可见细胞胞浆内容物变得丰富,细胞呈圆形、三角形或肝板样排列;诱导后7、14和21d,与对照组比较,含CM成分的3组BMMSCs中ALB阳性表达率均明显增加(P<0.01);10%CM1+10%CM2组BMMSCs中ALB阳性表达率高于10%CM1组和20%CM2组(P<0.05)。诱导后7和14d,与对照组比较,含CM成分的3组BMMSCs中糖原合成阳性率均明显增加(P<0.01);10%CM1+10%CM2组BMMSCs中糖原合成阳性率高于10%CM1组和20%CM2组(P<0.05)。结论:CM1和CM2可诱导大鼠BMMSCs向肝细胞分化,在达到相同诱导作用效果时所需的CM1和CM2浓度更低;CM1和CM2提供的微环境更有利于BMMSCs向肝细胞分化,其诱导细胞分化效率�
- 赵美子王丹丹虞振静段颜莉马丽娜
- 关键词：骨髓间充质干细胞条件培养基细胞增殖
- 胶原和微载体基质在脑星形胶质细胞培养中的应用
- 2005年
- 目的:研究脑星形胶质细胞在用一定量胶原、微载体基质制备的细胞培养环境中微载体上的贴壁分布,探讨胶原、微载体基质及其浓度与细胞生长的关系,并筛选出最佳技术参数。方法:以乳化的微小球形颗粒载体为基质,用一定浓度胶原、微载体基质制备细胞培养微载体环境,对大鼠脑星形胶质细胞进行囊化高密度长期培养。结果:细胞贴壁率与胶原、微载体培养环境中胶原浓度有关,不同浓度胶原包埋微载体培养环境条件对细胞生长影响不同。在胶原、微载体基质培养环境下培养7d后,脑星形胶质细胞密度由2×10 5/15 m m平皿达到18×10 5/15 mm平皿,培养6个月后达到4 0×10 5/15 m m平皿,在该培养条件下所能达到的细胞最大密度明显高于常规培养,并以很高的细胞存活率维持更长时间。此时微载体量为4 g·L- 1 ,胶原溶液与微载体的比例为1∶3。结论:在合适的培养条件下,细胞能维持在有限体积培养液中高密度长期生长。
- 马丽娜雒涛赵文静陈森
- 关键词：胶原微载体细胞培养星形细胞
- 罗氏沼虾源产气肠杆菌分离鉴定及耐药性分析被引量：1
- 2019年
- 2017至2018年春季罗氏沼虾育苗期间,江苏省高邮市多家育苗场幼体和仔虾持续发生死亡。从发病幼体和仔虾分离到大量优势生长的细菌,人工感染试验证明其对罗氏沼虾幼体和仔虾有较强的致病性。对分离菌进行了形态特征、理化特性、胞外酶及溶血素活性等表型生物学性状检验,测定了代表菌株的16S rRNA和gyrB基因序列,分析了16S rRNA和gyr B基因序列的同源性。结果显示:引起罗氏沼虾幼体大量死亡的病原之一为产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes),代表菌株XL2-1对罗氏沼虾仔虾和蚤状幼体的半数致死量(LD50)分别为2. 0×106和7. 0×105CFU/m L,胞外酶活性及溶血活性检测表明分离菌不溶血,不产生蛋白酶、卵磷脂酶、淀粉酶、尿酶及DNA酶;分离菌的耐药谱测定结果发现,分离菌对头孢噻肟等7种药物敏感,对青霉素G等9种药物耐药,对头孢曲松等19种药物存在株间差异。
- 童帅旗高晓建张双明苗珍李席席刘晓丹杨辉张晓君马丽娜
- 关键词：罗氏沼虾产气肠杆菌耐药性
- 大脑皮质星形胶质细胞体外条件化培养体系的建立
- 2004年
- 目的 :建立大脑皮质星形胶质细胞体外条件化培养体系。方法 :用快速灵敏的 MTT比色法测定细胞活力 ,对纯化细胞进行形态学观察、免疫组化鉴定。结果 :经分离、纯化 ,获得了纯的单一细胞群 ,星形细胞 MTT测定的 A值为 0 .2 5 5± 0 .0 12。结论 :建立大脑皮质星形胶质细胞体外条件培养体系可以快速、高效得到纯度高的贴壁的星形细胞。
- 马丽娜赵文静洛涛野元裕古川昭荣
- 关键词：细胞培养星形细胞
- AmoA、AmoE和AmoF蛋白在嗜水气单胞菌铁载体合成中的作用研究被引量：3
- 2019年
- 铁载体被认为是嗜水气单胞菌的毒力因子之一,其由amoCEBFAGH七个基因编码, AmoCGH在前人的研究中已证实参与铁载体的合成。RT-PCR实验表明amoAEF基因的表达受到铁的调控。为进一步探究amoAEF基因的功能,利用融合PCR和基因同源重组原理,以自杀性质粒PRE112为载体构建基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF。通过CAS平板检测实验以及arnow实验来检测野生株WT与各基因缺失突变株铁载体的合成情况,并比较野生株与各缺失株在低铁培养基中的生长差异。结果显示,成功构建了基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF;在富铁条件下,基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF的生长与野生株无显著性差异,但在低铁条件下,基因缺失株ΔamoA、ΔamoE和ΔamoF的生长能力、铁载体合成能力显著低于野生株。可见, amoA、amoE和amoF基因是嗜水气单胞菌铁载体合成的关键基因,其缺失会导致细菌在低铁环境中的生长受到抑制。
- 冯宇晴张倩倩章晋勇张兰梨马丽娜冯东岳吴振兵郝静文王姝懿李爱华
- 关键词：嗜水气单胞菌铁载体
- 病原性鳗弧菌(Vibrio anguillarum)双重PCR与LAMP检测方法的建立被引量：3
- 2015年
- 本研究检测了分离自发病大菱鲆、半滑舌鳎及鲤鱼的22株病原鳗弧菌（Vibrio anguillarum）毒力相关基因的携带情况,并建立了病原鳗弧菌的分子生物学检测方法。以PCR方法检测8个毒力相关基因的分布,结果显示,22株病原鳗弧菌均可扩增出6个基因（empA、vah1、vah4、flaA、rtxA和tonB）目的条带,未扩增出virA和angM基因;针对vah4和rtxA设计引物进行双重PCR扩增,同一PCR反应体系可扩增出两条目的条带,灵敏度为2.4×103 CFU/ml,对照菌无任何扩增条带;以vah4设计引物进行LAMP扩增,病原鳗弧菌可扩增出阶梯状条带,呈现阳性反应,6株对照菌无阶梯状扩增条带且呈现阴性反应,LAMP扩增灵敏度为2.4×10~1 CFU/ml。LAMP检测灵敏度是双重PCR的100倍,LAMP技术与PCR比较,操作简便、快速、灵敏度高且不需昂贵仪器,LAMP检测鳗弧菌的方法更适合于养殖生产实际应用。
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- 关键词：鳗弧菌毒力相关基因双重PCR
