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大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR检测方法的建立被引量：4: 2010年; 为探索减毒胞内侵袭菌介导的粘膜免疫对宿主动物胃肠道微生态的影响,以大肠杆菌与葡萄球菌16S rRNA基因拷贝数为研究对象,采用实时定量技术(Real-time PCR)对2种细菌进行定量检测,建立大肠杆菌与葡萄球菌数量快速检测方法。结果表明:扩增出的2种细菌核苷酸序列与GenBank上已知目的菌种同源性为100%,构建的2条标准曲线相关系数均接近1,误差较小,熔解曲线显示均成单一峰值。成功构建了大肠杆菌与葡萄球菌实时定量PCR标准曲线,可为进一步研究减毒沙门氏菌介导的粘膜免疫奠定基础。; 尹传宝陈俊朱琦毛君婷程振涛周碧君文明; 关键词：粘膜免疫大肠杆菌葡萄球菌 REAL-TIME PCR

贵州省PRRSV分离株Nsp2基因的克隆及序列分析被引量：11: 2010年; 为了解贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离株的遗传变异情况和分子流行病学背景,本研究收集了2007年以来贵州省不同地区的12株PRRSV,并对其Nsp2基因进行序列测定与遗传变异分析。结果表明,该12株PRRSV均与我国2006年以来流行的高致病性PRRSV(HP-PRRSV)位于进化树的同一分支中。8株PRRSV的Nsp2蛋白存在第481位和533位～561位共30个氨基酸的不连续缺失,这与以往报道的HP-PRRSV的缺失特征相同;另外4株PRRSV缺失扩大,其中的3株在第481位氨基酸的两翼又缺失了29个氨基酸,即471位～500位氨基酸缺失;另外1株除第481位和533位～561位氨基酸缺失外,在第394位缺失1个氨基酸。这些新缺失毒株的出现,显示HP-PRRSV可能出现了新的变异走向。为深入研究该病毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。; 刘飞王开功周碧君罗险峰文明安同庆刘春国程振涛路宪礼陈俊; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2

山羊痘口服疫苗免疫后肠道主要细菌的动态变化被引量：1: 2012年; 为含山羊痘病毒P32基因真核表达质粒的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌黏膜疫苗(口服疫苗)的临床推广应用提供科学依据,采集不同时间山羊肠道内容物,提取细菌总DNA,以肠道最常见的大肠杆菌和葡萄球菌为检测对象,应用Real-time PCR方法测定细菌含量的动态变化。结果表明:口服疫苗组山羊的肠道大肠杆菌和葡萄球菌含量,与空白对照组山羊相比,免疫初期(7d左右)出现显著或极显著增加外,其余时间段均无明显差异,表明口服疫苗免疫后未造成山羊肠道微生态紊乱。; 陈俊程振涛周碧君王开功文明; 关键词：肠道葡萄球菌

山羊痘口服疫苗免疫后对其瘤胃中主要细菌含量的影响被引量：2: 2012年; 为弄清山羊痘口服疫苗免疫后对山羊的安全性,采用实时定量PCR方法,对山羊免疫后瘤胃中主要细菌的含量进行了测定。结果表明:口服疫苗组山羊瘤胃中白色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌和黄化瘤胃球菌3种纤维分解菌在30d前会产生一定程度的变化,但30d后,瘤胃中的3种纤维分解菌的含量变化与空白对照组差异不显著,口服疫苗未造成瘤胃微生态紊乱,具有较好的安全性。; 龙冲冲陈俊江楠李翡周碧君文明; 关键词：免疫实时定量PCR 纤维分解菌

贵州省猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查被引量：3: 2010年; 为了解猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在贵州的流行特点,2007年3月至2009年10月对贵州省PRRS的流行地区、流行季节、感染猪群及临床症状和病理变化进行了调查。结果表明:贵州省9个地区均有PRRS疫情的发生,但主要集中在中部和邻近省市的周边县;一年四季都可发生,但以夏秋两季(5-10月)多发,其发生率达82.0%;不同猪群均可感染发病,以仔猪和怀孕母猪较多;猪群接种PRRS疫苗后可产生一定的免疫效果,但抗体阳性率不高,且在临床健康猪群中存在PRRS隐性感染。临床上主要表现出体温升高、食欲减退、全身出血和母猪流产特征,发病率和死亡率高;剖解可见气管、肺、心、肝、脾、肾、淋巴结以及膀胱、胃、肠道等呈现明显的病变。可为贵州省PRRS的预防与控制提供依据。; 路宪礼周碧君罗险峰王开功文明陈俊刘飞; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查

3种瘤胃纤维分解菌实时定量PCR方法的建立被引量：4: 2010年; 为探索以减毒胞内侵袭菌介导的黏膜免疫对宿主动物胃肠道微生态的影响,本试验以白色瘤胃球菌、黄化瘤胃球菌和产琥珀酸丝状杆菌3种主要瘤胃纤维分解菌16SrRNA分别设计引物,以山羊瘤胃液提取细菌总DNA,分别扩增3种纤维分解菌目的DNA片段,并连接至pMD-18TVector上,经PCR和测序鉴定后,以不同稀释度的重组质粒为模板进行荧光定量PCR反应。结果显示,扩增得到的3种瘤胃纤维分解菌目的片段与已知菌种相应片段的同源性大于99%;以不同稀释度重组pMD-18T为模板建立的荧光定量PCR扩增曲线差异明显,绘制标准曲线的相关系数均接近1,熔解曲线均呈单一峰值。因此,本试验成功建立了3种瘤胃主要纤维分解菌的实时定量PCR方法,为减毒胞内侵袭菌介导的黏膜免疫研究奠定了基础。; 尹传宝陈俊朱琦程振涛周碧君文明; 关键词：REAL-TIMEPCR

雷山县小香羊寄生虫感染情况的调查被引量：3: 2010年; 为了解雷山县小香羊寄生虫感染的情况,随机抽取雷山县桃江、达地和望丰3个乡镇的小香羊25只进行体内外寄生虫调查。结果表明,在25只小香羊中共鉴定出体内外寄生虫22种,其中线虫9种、吸虫5种、绦虫4种、蜘蛛昆虫3种和原虫1种。该结果对雷山县小香羊寄生虫病的预防控制具有一定的参考作用。; 陈俊杨正梅王家鹏王开功田兴贵文明; 关键词：小香羊寄生虫

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陈俊