陈伟业
- 作品数:50 被引量:126H指数:6
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 含有新型插入位点的羊痘病毒载体和应用
- 本发明提供含有新型插入位点的山羊痘载体基因工程毒株GTPVΔ135/EGFP和绵羊痘病毒基因工程毒株SPPVΔ135/EGFP,它们的保藏变编号分别为CCTCC NO:V201714和CCTCC NO:V201715。它...
- 步志高张敏敏陈伟业
- 文献传递
- 利用杆状病毒表达系统表达猪IFN-L3及其抗PEDV活性的研究被引量:4
- 2019年
- 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞上表达重组猪干扰素L3(rPoIFN-L3)进行抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的研究。首先通过间接免疫荧光和Western-blot验证rPoIFN-L3表达,并用Protein A亲和层析柱进行蛋白纯化;采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测rPoIFN-L3的抗病毒活性,含rPoIFN-L3的细胞上清的抗病毒活性为1×10^3AU/mL,纯化的rPoIFN-L3抗病毒活性为5×10^5AU/mg。进一步对纯化的rPoIFN-L3蛋白在IPEC-J2细胞上进行抗PEDV活性探究,结果显示,rPoIFN-L3可呈剂量依赖性抑制PEDV复制,并且上调相关干扰素-刺激基因(ISGs)的表达。由此证明,本研究表达的rPoIFN-L3具有抗病毒活性,并可有效抑制PEDV在IPEC-J2上的复制,对预防和治疗PEDV感染有重要意义。
- 郭珊珊陈伟业薛美尹灵丹罗毅冯力刘平黄
- 关键词:昆虫细胞猪流行性腹泻病毒
- 基于IPMA的小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒
- 本发明提供基于免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA)的小反刍兽疫病毒抗体检测试剂盒,包括:含细胞内阳性抗原与阴性抗原的96孔细胞培养板;阳性对照血清;阴性对照血清;样品稀释液;盐水洗涤液;HRP标记鼠抗羊McAb;二组分...
- 步志高刘文兴陈伟业
- 表达小反刍兽疫病毒F蛋白的重组山羊痘病毒疫苗的研究被引量:7
- 2009年
- 本研究利用gpt筛选基因和eGFP报告基因纯化筛选重组小反刍兽疫病毒(PPRV)F基因的重组山羊痘病毒(rGPV-PPRV-F),并经过PCR鉴定。免疫荧光和蛋白印迹试验都证实重组病毒能够感染绵羊羔羊睾丸细胞并表达PPRVF蛋白。以2×106PFU的rGPV-PPRV-F皮内注射免疫山羊3只,并于首次免疫后第28d以相同剂量进行二次免疫。分别于一免后21d和二免后14d采血后分离血清进行病毒中和试验。结果表明,一免后21d山羊痘病毒(GPV)中和抗体效价依次为1∶40、≥1∶80、≥1∶80,PPRV中和抗体效价依次别为1∶20、1∶40、1∶20,全部阳转;二免后14d,GPV中和抗体效价≥1∶80,PPRV中和抗体效价依次为1∶20、1∶80、1∶40。本研究为小反刍兽疫重组山羊痘疫苗的产业化奠定了基础。
- 曲林茂陈伟业胡倩倩胡森张倩支海兵黄克和步志高
- 关键词:小反刍兽疫F蛋白重组疫苗中和抗体
- 小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗
- 本发明提供小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗,其包括:(1)GPV弱毒疫苗,其作为载体;(2)PPRV疫苗的病毒囊膜表面融合蛋白F基因或血凝素蛋白H基因,其作为目的免疫基因;和(3)筛选基因,其包括gpt,和报告基因eG...
- 步志高胡森陈伟业
- 文献传递
- 小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗
- 本发明提供小反刍兽疫重组山羊痘病毒活载体疫苗,其包括:(1)GPV弱毒疫苗,其作为载体;(2)PPRV疫苗的病毒囊膜表面融合蛋白F基因或血凝素蛋白H基因,其作为目的免疫基因;和(3)筛选基因,其包括gpt,和报告基因eG...
- 步志高陈伟业胡森
- 表达融合外源表位N蛋白的重组小反刍兽疫病毒的构建及应用
- 本发明涉及免疫标记疫苗领域。具体地,本发明涉及表达融合外源表位N蛋白的重组小反刍兽疫病毒的构建及应用。
- 步志高陈伟业
- 文献传递
- 小反刍兽疫病毒反向遗传操作系统及其应用
- 本发明涉及一种小反刍兽疫病毒(PPRV)的反向遗传操作系统及其应用,该系统包含:转录质粒,所述转录质粒能够表达所述小反刍兽疫病毒的基因组全长cDNA序列;一个或多个辅助质粒,所述辅助质粒能够表达所述小反刍兽疫病毒的核蛋白...
- 步志高陈伟业
- 蓝舌病病毒VP5蛋白的原核表达及其抗原性分析被引量:2
- 2012年
- 为表达蓝舌病病毒(BTV)VP5蛋白并检测其生物学活性,本实验采用RT-PCR方法扩增血清12型BTV的VP5基因,构建重组质粒pMAL-VP5。将重组质粒转化TB1感受态细胞,以0.4 mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,融合了大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的VP5重组蛋白以可溶形式表达,分子质量约为112.2 ku。利用MBP标签对重组蛋白进行纯化,并以其作为包被抗原,间接ELISA检测山羊血清样品,结果 5份羊血清P/N值均大于1,其中有1只羊检测结果 P/N值为2.396,鉴定为阳性血清,表明重组蛋白可以与VP5抗体反应,可以作为检测BTV VP5抗体的抗原,为今后进一步开展BT诊断研究奠定了基础。
- 赵大维朱彦青陈伟业胡倩倩殷倩倩黄克和步志高
- 关键词:蓝舌病病毒VP5基因原核表达间接ELISA
- 表达鸡β干扰素的CHO细胞系及其应用
- 本发明公开了表达脊椎动物β干扰素的CHO细胞系,其含有编码所述动物β干扰素的基因。更具体地,本发明公开了表达鸡β干扰素的CHO细胞系。本发明还涉及利用上述CHO细胞系生产脊椎动物β干扰素标准品的方法以及通过该方法获得的鸡...
- 步志高陈伟业
- 文献传递